用ctab配方法提取雨生红球藻DNA ，液氮研磨的必要性还大吗？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2011-05-03 23:09 标签： 液氮研磨
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如何用CTAB法提取DNA
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（1）取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中；（2）加入800 μl的CTAB提取缓冲液,混匀（CTAB在65℃水浴预热）,每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min；（3）小心吸取上清液,加入等体积的酚：氯仿（各400μl）溶液,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min；（4）小心吸取上清液,加入等体积的氯仿,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min.（5）重复步骤（4）1-2次,以蛋白层不出现为止；（6）取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000 r/min,离心10 min；（7）弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀2次；（8）室温下干燥后（一般干燥5-15 min）,溶于30-50 μl DEPC去离子水中,于-20℃或者-70℃下保存备用.
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