过氧化物酶体脂肪酸β氧化--《中国生物化学与分子生物学报》2009年01期
过氧化物酶体脂肪酸β氧化
【摘要】：除线粒体外,过氧化物酶体也是真核细胞脂肪酸β氧化分解的重要部位.过氧化物酶体β氧化过程包括氧化、加水、脱氢和硫解4步反应,主要参与极长链、支链脂肪酸等的分解.近年关于过氧化物酶体β氧化的研究活跃,在代谢途径及功能等方面有了新的认识,尤其在对相关代谢酶的研究中取得了较大进展.本文就过氧化物酶体β氧化相关进展作一综述.
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：Q547【正文快照】：
自从1976年Lazarow和De Duve[1]发现哺乳动物过氧化物酶体内存在脂肪酸β氧化体系以来,研究者对过氧化物酶体β氧化体系组成及功能的认识不断加深.与线粒体β氧化类似,过氧化物酶体β氧化包括4个连续的反应(Fig.1).(1)氧化反应:脂酰辅酶A脱氢生成2-反-烯脂酰辅酶A;(2)水化反应
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人参皂苷Compound K对2型糖尿病的降血糖作用及肝糖异生信号转导通路调控
【摘要】：当前，随着人们饮食结构和生活习惯的改变，糖尿病已成为人类疾病的第三位死亡病症，仅次于心脏病和癌症。在我国，2型糖尿病患病率逐年增多，严重威胁着人们的健康甚至生命，已经成为严重的社会问题，举世关注。糖尿病是一种需长期治疗的慢性疾病，不仅要依靠药物治疗，更主要是改变不良的生活习惯，同时食用副作用小的抗糖尿病功能性食品。目前，国内外许多学者都在天然药物中寻找糖尿病补充治疗剂，以期减少糖尿病药物的副作用并改善症状，提高生活质量。
人参，五加科植物人参（Panax ginseng C.A. Meyer）的干燥根及根茎，是我国名贵中药材，吉林省主要的道地药材。近年来，人参治疗和预防糖尿病及其并发症的作用受到了各国学者的广泛关注。人参皂苷被认为是降血糖活性的主要成分，人参皂苷主要分为三种结构类型，即人参二醇型（protopanaxadiol-type ginsenosides, PDG），三醇型（propanaxatriol-type ginsenosides, PTG），齐墩果烷型皂苷（oleanane-typeginsenosides）。Compound K（20-O-β-D-glucopyranosyl-20-(S)-protopanaxadiol，CK）作为人参二醇型皂苷PDG的肠内菌代谢产物，被认为是人参皂苷真正发挥药理活性的生物“前药”，它的降血糖作用逐渐被研究。
首先，本课题利用生物酶法对二醇型皂苷（PDG）进行生物转化获得人参稀有皂苷Compound K。采用响应曲面法（response surface methodology, RSM）优化酶转化的各种参数，最后确定最佳的转化条件，即酶解温度41℃，酶用量17.51%，酶解时间18.27min。进而利用反复经典硅胶柱色谱分离CK，进行结构鉴定，为接下来的动物试验提供物质保证。
本课题成功利用高脂饮食联合STZ诱导2型糖尿病ICR小鼠模型，该模型同时具有高血糖、高血脂、葡萄糖耐量异常及胰岛素抵抗等多种2型糖尿病的临床表现特征，最大限度模拟临床2型糖尿病。研究发现：人参二醇型皂苷PDG及CK可以显著降低2型糖尿病ICR小鼠空腹血糖（FBG），改善胰岛素抵抗，提高胰岛素敏感指数，改善糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量。同时观察动物状态，与糖尿病模型组相比，给予PDG和CK后，糖尿病小鼠多饮、多尿、多食现象明显减少，体重增加，提示二者对糖尿病小鼠有良好的治疗作用。
导致2型糖尿病的主要原因是外周胰岛素抵抗和胰岛素分泌相对不足，即表现为脂肪和骨骼肌等外周组织对葡萄糖的摄取减少和胰岛素抑制肝脏糖异生能力的减弱从而葡萄糖输出增加，导致葡萄糖和脂类代谢异常，最终引起机体血糖升高。近十年来，治疗肝胰岛素抵抗类疾病已成为糖尿病治疗最活跃的研究领域之一。研究表明：2型糖尿病发生时，由于胰岛素分泌不足和胰岛素抵抗，肝脏糖异生作用紊乱，肝糖生成异常增多，导致高血糖发生。因此，有效抑制肝脏过度糖异生，减少内源性葡萄糖生成，是治疗2型糖尿病的重要靶标之一。
本文较为系统的研究了人参皂苷CK通过激活AMPK对2型糖尿病糖异生信号通路调控的分子机制。动物实验研究表明，CK可有效降低2型糖尿病ICR小鼠肝脏糖异生关键酶PEPCK及G6Pase蛋白质表达水平，抑制肝脏糖异生，降低空腹血糖。此外，CK还可明显激活AMPK活性，增加p-AMPK/AMPK比值。研究亦表明：人参皂苷CK能够显著抑制核转录因子PGC-1α等蛋白质表达水平。HepG2细胞实验给予AMPK抑制剂（compound C）及激动剂（AICAR），进一步阐明CK是否通过激活AMPK活性而抑制肝脏糖异生，结果显示：CK能够抑制糖异生关键酶PEPCK和G6Pase及核转录因子PGC-1α、FOXO1、HNF4α的蛋白表达，有效抑制了肝脏过度糖异生，减少内源性葡萄糖生成，减少葡萄糖的释放。
总之，本研究为人参皂苷CK治疗2型糖尿病的分子机制增添新的研究内容，为深入开展人参皂苷的降血糖作用及机制研究提供新的理论参考。
【关键词】：
【学位授予单位】：吉林大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2012【分类号】：R587.1【目录】：
提要4-6中文摘要6-9Abstract9-16英文缩写词表16-18第1篇 前言18-20第2篇 文献综述20-50 第1章 人参治疗糖尿病及作用机制研究概况20-31
1 人参各部位对治疗糖尿病的作用20-23
2 人参中活性成分对糖尿病的治疗作用23-28
3 人参精氨酸衍生物对糖尿病的作用28-29
4 西洋参抗糖尿病作用29
5 结语29-31 第2章 人参皂苷 COMPOUNDK 研究概况31-40
1 人参皂苷 Compound K 的发现31-33
2 人参皂苷 Compound K 的生物转化33-35
3 人参皂苷 Compound K 的药理作用35-39
4 结语39-40 第3章 AMPK 与糖脂代谢研究概况40-45
1 AMPK 结构与活性调节40-41
2 AMPK 在 2 型糖尿病糖脂代谢中的作用41-44
3 结语44-45 第4章 脏糖异生在 2 型糖尿病发生过程中的调控机制45-50
1 肝脏糖异生信号转导通路及分子调控机制45-46
2 肝脏糖异生的关键调控基因46-49
3 结语49-50第3篇 实验研究50-97 第1章 蜗牛酶转化二醇组皂苷制备人参皂苷 COMPOUND K50-64
第1节 材料与方法51-54
1 实验材料51
2 实验方法51-54
第2节 实验结果54-63
1 响应曲面法优化蜗转化条件54-55
2 响应曲面设计与结果分析55-56
3 响应曲面分析与优化56-61
4 验证性实验61
5 CK 分离与鉴定61-63
第3节 实验小结63-64 第2章 PDG 和 CK 对 2 型糖尿病小鼠的降血糖作用64-82
第1节 材料与方法65-73
1 实验材料65-69
2 实验方法69-73
第2节 实验结果73-81
1 PDG 和 CK 对 2 型糖尿病小鼠一般状态的影响73
2 PDG 和 CK 治疗对空腹血糖（FBG）和胰岛素（FINS）的影响73-74
3 PDG 和 CK 对 2 型糖尿病小鼠血清血脂水平的影响74-75
4 PDG 和 CK 对糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量（OGTT）的影响75
5 CK 对小鼠肝脏糖异生关键酶 PEPCK 和 G6Pase 的影响75-77
6 CK 对小鼠肝脏 p-AMPK/AMPK 活性影响77-79
7 CK 治疗对小鼠肝脏核转录因子 PGC-1α的影响79-81
第3节 实验小结81-82 第3章 CK 对 HEPG2 细胞糖异生的抑制作用及机制研究82-97
第1节 材料与方法83-88
1 实验材料83-85
2 实验方法85-88
第2节 实验结果88-96
1 CK 对 HepG2 细胞葡萄糖生成作用88-90
2 CK 对 HepG2 细胞 AMPK 和 p-AMPK 表达的影响90-92
3 CK 对 HepG2 细胞糖糖异生关键酶 PEPCK 和 G6Pase 的影响92-93
4 CK 对 HepG2 细胞糖糖异生核转录因子的影响93-96
第3节 实验小结96-97第4篇 讨论97-102 第1章 CK 的制备及对 2 型糖尿病小鼠的降血糖作用97-100
1 响应曲面法优化蜗牛酶制备人参皂苷 CK97
2 CK 对 2 型糖尿病小鼠糖脂代谢的影响97-100 第2章 CK 对肝糖异生信号通路的调控分子机制100-102
1 CK 对 2 型糖尿病肝糖异生的抑制作用100
2 CK 激活 AMPK 对 HepG2 细胞糖异生信号传导通路的影响100-102第5篇 结论102-103参考文献103-125作者简介及在学期间所取得的科研成果125-127致谢127
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