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孢子体型自交不亲和反应中信号转导的研究进展
DO I : 10 . 13989 / j. cnki .
. 2008 . 32 . 074安徽农业科学 , J o u r n a l o f A n h u i A g r i .S c i . ) : 1, 14007 责任编辑 　罗芸 　责任校对 　李洪孢子体型自交不亲和反应中信号转导的研究进展刘珠琴 , 张绍铃 　(1. 宁波农业科学研究院林业所, 浙江宁波1 2 . 南京农业大学园艺学院 , 江苏南京 210095)摘要 　孢子体型自交不亲和性是植物特异性地识别并拒绝自花或亲缘关系很近的花粉的一种遗传机制 , 该特异性受 S 基因座控制 。 在 前人的研究基础上总结了孢子体型植物自交不亲和反应过程中的信号转导的研究进展 。 关键词 　自交不亲和性 ; 信号转导 ; 孢子体型 中图分类号 　S 312　　文献标识码 　A 　　文章编号 　 ( 959 -03 R e s e a r c hA d v a n c e i nS i g n a l T r a n s d u c t i o nd u r i n gS p o r o p h y t i c S e l f i n c o mp a t i b i l i t yR e s p o n s e L I UZ h u q i ne t a l 　( C o l l e g e o f F o r e s t r y , N i n g b oA c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e , N i n g b o , Z h e j i a n g315040) A b s t r a c t 　S p o r o p h y t i cs e l f i n c o m p a t i b i l i t yc o n t r o l l e db yt h em u l t i a l l e l i cS l o c u sw a s o n eo f s e v e r a l m e c h a n i s m s t h a t e v o l v e dt op r e v e n t i n b r e e d i n gi np l a n t s .T h ep r o g r e s s o f s i g n a l t r a n s d u c t i o n d u r i n g s p o r o p h y t i c s e l f i n c o m p a t i b i l i t yr e s p o n s ew a s i n t r o d u c e do nt h e b a s i s o f p r e v i o u s r e s e a r c h . K e yw o r d s 　S e l f i n c o m S i g n a l t r S p o r o p h y t i c　　 孢子体型自交不亲和性 ( S p o r o p h y t i c s e l f i n c o m p a t i b i l i t y , S S I ) 是十字花科 、 旋花科和菊科植物所采用的一种抵制近亲 繁殖的重要措施 。 目前研究最为广泛深入的 S S I 系统还是 十字花科芸苔属植物 。芸苔属 S I 反应发生在受精的早期阶 段 , 即花粉水合 、 花粉代谢的激活 、花粉管的形成和花粉管穿 [ 1] 入柱头乳突细胞壁等过程中 , 主要依靠柱头细胞表达的 S R K 和存在于花粉粒上的相应的单元特异性配体 S C R /S P 11 之间的相互识别 。过去十多年的分子试验研究表明 , 芸苔 属植物 S I 的研究实质上是对细胞信号转导的研究 。 目前 , 对芸苔属植物花粉中的配体信号成分与柱头乳突细胞中受 体识别成分的研究是最为清楚的 , 而且在 S I 信号转导成分 的鉴定上也有所突破 , 至今已分离到 3类与该位点连锁的基 因 。花粉与雌蕊之间高度特异的识别不仅与 S 位点基因的 表达相关 , 同时还受到 A R C 1、T H L 1 /T H L 2、水通道蛋白等其 他因子的调控 , 这些因子的编码基因虽然不与 S 位点连锁 , 但对于自交不亲和至关重要 。 1　 与S 位点连锁的信号分子 1. 1　S R K 　S 受体激酶 ( S r e c e p t o r k i n a s e ,S R K ) 是一种由雌 蕊 S 基因编码的跨膜蛋白质激酶 , 位于柱头乳突细胞的质膜 [ 34] 上 , 主要由 N 端胞外区 、与 S e r /T h r 激酶同源的 C 端胞质 区以及跨膜区构成 。 S R K 的胞外区是花粉配体的结合位点 , 有较高的多态性 , 包括几乎完全保守的 12个半胱氨酸残基 和 3个多变区域 , 决定 S I 中的识别反应 ; 而它的激酶区域是 功能部位 , 通过 S e r 和 T h r 的磷酸化来表达传递来自胞外的 信号 。大量证据表明 , S R K 是 S I 反应中的核心因子 , 它不 仅是雌蕊的决定因子 , 在花粉的识别中扮演重要角色 , 而且 当与同源的 S C R 授粉结合时 , 其胞内激酶区被激活 , S e r 和 T h r 残基发生磷酸化 , 从而产生级联反应 , 使信号在乳突细胞 [68] 中传递和放大 , 最终导致花粉萌发受阻 。目前 , 人们对 S R K 在自交不亲和性机制中的作用基本上已没有争议 , 因为 许多转基因植物试验已确切证明 S R K 是S I 反应中雌蕊一方 [ 78] [ 9] 的首要因子 ,S R K 基因发生突变可导致 S I 丧失 。基金项目 　宁波市农业科学研究院资助项目 。 作者简介 　刘珠琴 ( 1979 ) , 女 , 安徽 安庆人 , 博士 , 工 程师 , 从 事植物 生殖生理研究 。 收稿日期 　 [ 5] [ 2]1. 2　S L G　S 位点糖蛋白 ( S l o c u s g l y c o p r o t e i n ,S L G ) 是由雌 蕊S 基因编码的分泌型柱头特异糖蛋白 , 主要分布在柱头乳 突细胞的细胞壁和胞间区 。 总长一般为 436 个氨基酸残基 , 不同序列间的氨基酸变异可达 30%, 这种变异可能与 S 基因 的特定识别作用有关 。 S L G 的 C 端含有数个保守的氨基酸 和可达 12个残基的 N 糖基化位点 , 不同 S 基因编码的 S L G 的 N 糖基化位点确切位置不一样 , 表明 S L G 具有分子多样 性。 N 端为疏水区 , 含有约 30个氨基酸 , 成熟的蛋白质中没 有这段疏水区 , 因此推测该区为信号肽 , 负责引导 S L G 进入 [ 10] 细胞分泌系统 。 S L G 也是一个高度多态的 S 位点基因 , 表 达水平要比 S R K 高, S L G 与 S R K 胞外域具有高度的序列同 源性 。 S L G 蛋白的表达时间与柱头乳突细胞自交不亲和 反应的时间有关 。 对S L G 的研究最早是 30多年前对第一个 S 相关蛋白的 [ 11] 鉴定 , 而 1985年 , N a s r a l l a h 等 克隆到第一个编码 S 位点糖 蛋白的 c D N A 则成为该领域的里程碑 。 免疫化学和原位分 子杂交试验表明 , 芸苔属 S L G 主要分布在柱头的乳突区 , 含 量可高达柱头总蛋白的 5%, 并分泌到乳突细胞的细胞壁和 胞间区 , 不存在于营养组织如叶和根中 , 而且也不在花柱 、子 房或苗中积累 。虽然 S L G 大量存在于柱头细胞壁中 , 且在某 些自交亲和突变体中 S L G 含量显著降低 , 表明 S L G 的积累 与自交亲和是相关的 , 人们最初也认为柱头识别花粉主要依 赖 S L G ,但 S L G 与 S R K 转基因试验表明 S L G 在 S I 中只起辅 助作用 , 在花粉拒绝反应中并非是必要的 , 某些植物中甚至 [ 7] 没有 S L G 出现同样发生 S I 反应 ; 它可能是通过与 S C R 以 及其他花粉胞被蛋白的相互作用 , 穿过柱头细胞壁 , 与锚定 在细胞膜上的 S R K 结合 , 从而促进花粉与柱头的粘合 。 1. 3　S C R/S P 11　自从雌蕊 S 决定子基因被鉴定后 , 人们开 始集中精力鉴定雄性 S 决定子 。 T a k a y a m a 等认为孢子体自 交不亲和雄性 S 决定子应具有以下特点 : ①它定位于 S 基 因座 ( 与S L G 和 S R K 紧密连锁 ) ; ② 它在 S 单元型中有等位 的多态性 ; ③它在花粉母细胞减数分裂前表达或以后存在花 药绒毡层细胞中 ; ④在一个 S 单元型 特异的模式中 , 它与 S L G 或S R K 相互作用 。 S c h o p f e r 等 [ 14] 和 S u z u k i 等 [ 15] 几乎同时发现了雄性决定 子 S C R ( S 位点富半胱氨酸蛋 白 ) /S P 11 ( S 位点蛋白 11) 。[ 13] [ 12] [ 4]13960　　　　　　　　　　安徽农业科学 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 2008年[ 16]S C R/S P 11属于 P C P ( P o l l e nc o a t p r o t e i n s ) 家族, 在花粉壁的发生 。但用高度提纯的原生质膜部分 ( 不含有硫氧还蛋 白) 进行的实验结果说明 , S P 11 /S C R 激活 S R K 与硫氧还蛋 [ 33 ] 白的负调控无关 。 2. 4 　 ML P K　 M位点 蛋白 激 酶 ( Ml o c u sp r o t e i nk i n a s e , M L P K ) 是 M u r a s e 等首先从芸苔属自交不亲和途径中发现的 一种新的激酶 , 它包含 1个典型的 N 端 十四 [烷 ] 酰化 ( 豆 蔻酰化 ) 的花边序列 : M e t G l y -X X X S e r /T h r ( A r g ) ( X 代表任 何一个氨基酸 ) 和 1 个具有 30 个氨基酸并且富集丝 氨酸 ( 33%) 的 区域 以 及 11 个蛋 白 激 酶的 亚 结 构域[ 34 ]上 大量积 累 , 具有亲 水性 和碱性 , 大 小为 8 400 ～ 8 600; K a c h r o o 等在花粉标本中发现 S C R 呈 16 000大小的二聚体 , 但这是它的天然构象还是与 S R K 结合时的构象目前还不清 楚 , 其每一成熟多肽包含 8个半胱氨酸残基 , 相互形成 3 ～ 4 个二硫键[ 17]。S C R/S P 11信号肽中 C 1～ C 2之间的 G l y 残基和 C 3～C 4之间的芳香残基都具有高度保守性 , S h i b a 等推测 [ 18] 这可能与 其特异结合 有关 。一 般认为当自 花授粉时 , S C R/S P 11在 S L G 的帮助下进入柱头细胞壁中 , 与 S R K 相互 识别 , 同时与 T H L 1 /T H L 2作用 , 减弱了 T H L 对 S R K 磷 [ 22] 酸化的抑制 , 促使 S R K 的磷酸化 , 从而引发了一个由受体 介导的级联反应 , 导致 S I 的发生 。 2　 与 S位点非连锁的信号分子 2. 1　A R C 1　A R C 1( A r mr e p e a t c o n t a i n i n g p r o t e i n1) 是一个 柱头特异的臂重复蛋白[ 23 ] [ 19 21 ]。用B L A S T 搜索的结果显示 , M L P K 属于一组类似细胞质受体激 [ 35] 酶( R L C K s ) 家族 。人们对 R L C K s 所知甚少 , 而 M L P K 是 R L C K s 家族中与受体激酶信号转导途径相联系的第 1个成 员 , 所以人们对 M L P K 的了解更少 。 作为 R L C K s 家族成员的 M L P K , 有可能是一个 S R K 信 号转导途径中的介体 。在芸苔属 S I 信号转导途径中 , 一般 认为 , M L P K 在由雌蕊细胞分化出来的质膜部分才大量表达 , 而已有的实验证明 S R K 恰恰是在质膜上表达的 。 另外 , 在 基因型 m/m ( M位点突变成 m ) 的植物中 , S I 完全丧失 , 这意 味着 M L P K 参与了所有可能存在的 S R K调控的信号途径 [ 27 , 29 ] ( 假设有多种途径存在的话 ) 。以上这些就为非受体激 酶M L P K 与受体 S R K 相结合形成信号复合物 , 共同调控自交 不亲和反应的假设从理论上提供了支持 。而这些信号复合 物的磷酸化可以激活其他参与者的活性 , 并且建立与下游信 号成分结合的位点 。 3　芸苔属植物 S I 反应的模式 　根据近年来的研究进展 , 提 [ 27] 出了一种芸苔属植物自交不亲和反应的新模式 ( 图 1) 。, 主要在柱头中表达 , 一般存在于细胞核和细胞质中 ; 当它在细胞质中被磷酸化时 , 可能与内 质网相联系 。 体外试验证明 , A R C 1通过 C 末端的臂重复区 与有活性 的 S R K 激酶 域相互 作用 , 导致了 A C R 1 的 磷酸 化 ,N 端可能是其他蛋白结合区 , 它含有一个广泛存在 [ 26] 于泛素连接酶中的 U b o x 结构域 。 S t o n e 等的研究表明 A R C 1其实就是连接酶 E 3, 它和 E 1、E 2酶参与的泛素化反应 在 S I 中具有重要地位 。 A R C 1是一个由酵母双杂交试验所筛选出来的蛋白质 , 可在 S I 的早期阶段阻止花粉与柱头的粘连 、水合及萌发 。 在自花授粉时 A R C 1与 S R K 激酶区结合发生磷酸化 , 促使细 胞内一未知底物泛素化而形成一复合物 , 该复合物可能导致 某种能促进自交亲和的蛋白质降解 , 或者可能调节柱头乳突 细胞上的水孔蛋白从而限制不亲和的花粉获取水分 [ 28 -30] 。 2. 2　a q u a p o r i n 　 芸苔属植物的 S I 反应发生于干性柱头的 表面 , 因此水是花粉萌发所必需的 , 在研究与 S I 有关的基因 时 , 找到了一种编码类似于水通道蛋白 ( a q u a p o r i n ) 的基因 M O D 。虽然它不是 S 位点基因 , 但发现该基因的缺失可导致 自交亲和的产生 ; I k e d a 等认为这个基因编码的类水孔蛋白 有 3个丝氨酸残基 , 是潜在的磷酸化位点 , 可能是 S R K 介导 信号途径的一个靶蛋白[ 31] [ 27] [ 24 ] [ 25]。 水通道是 S I 所必需的 , 同时也图 1　 芸苔属自交不亲和反应的模型 F i g . 1　Mo d e l o f s e l f i n c o m p a t i b i l i t y o f B r a s s i c a是 S R K 信号传导途径的组成部分 , 在自花授粉中 , 磷酸化的 S R K 通过一系列信号转导途径激活 M O D 蛋白 , 刺激水分子 进入柱头细胞而远离花粉 , 从而阻止花粉水合 。由于 M O D 蛋白的序列与 M I P ( M a j o r i n t r i n s i c p r o t e i n ) 膜蛋白十分相似 , 而后者不仅可透过水分子 , 还可透过一些小分子 , 因此推测 M O D 蛋白可能通过调节花粉与柱头之间水分或某些小分子 的运输来调控 S I 反应 。 2. 3　T H L 1/T H L 2　B o w e r 等利用酵母杂交系统发现一类硫 氧还蛋白 H ( T h i o r e d o x i nH l i k e ) ― ― ―T H L 1和 T H L 2, 它们可 与 S R K 激酶区作用 。 C a b r i l l a c 等发现在加入 T H L 1后 , S R K 3的自体磷酸化受到了抑制 , 同时 , S 3 的花粉蛋白的加入 可以缓解这种抑制作用 。这些证据表明 , 在缺少 S R K 的 配体 S P 11 /S C R 时, T H L 1/T H L 2与 S R K 的激酶区相互作用 , 阻止 后 者 的 磷 酸 化 , 从 而 影 响 S I 的 表达; 反之, 当与 S P 11 /S C R 结合后 , 其构象改变 , 激活 S R K 的激酶域 , 导致 S I[ 22] [ 32 ]无亲和花粉时 , S R K 受 T H L 1抑制 。 A R C 1 可在核和胞 质内穿梭 , 但由于核输出信号 ( N E S ) 的存在 , 它主要位于胞 质内 。 在自交授粉期 间 , 花 粉配体 S C R的结合 可激活 受 T H L 1抑制的受体 S R K , 于是 T H L 1便游离下来 , 且促进 S R K 的磷酸化 。磷酸化的 S R K 与胞质内的 A R C 1结合导致 A R C 1 磷酸化 。 A R C 1可通过 N 末端亮氨酸拉链 ( L e uz i p p e r ) 和/ 或 卷曲螺旋结构域 ( c o i l e d -c o i l d o m a i n ) 与核 、胞质中底物和 / 或 内质网 ( E R ) 中输出的底物结合 。 A R C 1 通过 U b o x 结构域 和泛肽携带蛋白同源的 E 2酶作用后 , 与 A R C 1结合的底物 泛素化作用 , 并运输到 E R 膜表面的蛋白酶体 /C S N ( C O P 9 s i g n a l o s o m e ) 中 。在蛋白酶体 /C S N 中, A R C 1介导底物降解 , 并最终导致花粉自我抑制 。 目前 , 人们对这些 A C R 1 底物的 认识还不清楚 , 它们可能是促进花粉水合 、萌发和花粉管生　 36卷 32期 　　　　　　　　　　　　　　　刘珠琴等 　 孢子体型自交不亲和反应中信号转导的研究进展13961长的雌性亲和因子 。 在混合的花粉中 , 亲和花粉并不受抑制 , 所以 , 可以认为 S R K 信号途径在空间上仅局限于与不亲和花粉粒直接接触 的部位 。当一个自体不亲和花粉粒落到柱头上时 , 在乳突细 胞中 S C R /S P 11以单元特异性的方式与 S R K 的受体区域结 合 , 从而导致 S R K 构象发生改变 , 并激活 S R K 活性 , 这种结 合可促进 M L P K 加入到已激活的复合物上 , 伴随着 S R K 的激 活 , 加上 A R C 1与 S R K 激酶区域中磷酸丝氨酸 / 苏氨酸停靠 位点的结合 , 因而来源于 S R K 的信号转导可受到促进 。 这 种相互作用可能来源于 S R K 的磷酸化作用或 S R K 的构象变 化,A R C 1与 S R K 的相互作用会导致 A R C 1激活和磷酸化作 用 。某些胞内底物的进一步磷酸化可导致信号转导的级联 反应 , 最终导致花粉萌发受抑制 。自交不亲和反应就是这样 发生的 。尽管这样 , 但 A R C 1在 S I 中的具体功能仍然未知 , 尚待进一步研究 。这些都是单元特异性花粉配体存在下的 情况 ; 如果缺少单元特异性的花粉配体 S C R/S P 11, S R K 的活 [ 32] 性就会为 T h 抑制 。 T H L 1和 T H L 2是除了 A R C 1 以外在 酵母双杂交系统中得到的另外两个蛋白 , 它们与 S R K 激酶 区特异结合 , 同时又为花粉外壳中的半胱氨酸富含蛋白 S C R 所激活 。近年来的体外培养实验证明 , T H L 1是 S R K 自动磷 酸化的抑制子 , 这个抑制作用可以通过添加具有单元特异性 的 S C R 所解除 。据此可以认为 , T H L 1 是在缺少花粉配体 [ 22] S C R/S P 11的情况下起 S R K 负调节基因作用的 。 T H L 1和 T H L 2是否共同作用抑制 S R K 活性 , 还不很清楚[ 36 ][ [[[ [[[[[[[。M L P K与 S R K 结合所形成的复合物的激活和磷酸化可能会进一步 导致细胞内一种或更多信号途径的启动 , 它们之间是受体与 非受体激酶作用的关系 。 4　 展望 尽管近些年来对孢子体型自交不亲和反应过程中的信 号转导的研究已经取得了突飞猛进的进展 , 但仍然有很多问 题需要解决 , 如 S R K 激活的机制具体如何 ? A R C 1如何与其 作用的信号传导元件一起进行 S I 的调控 ? 另外 , S R K 、M L P K 与 A R C 1之间准确的生化和胞间关系怎样等都将是今后的 研究热点 。相信随着人们对细胞 、蛋白质和核酸等研究水平 的不断深入 , 这方面的研究将会有突破性的进展 。 参考文献[ 1] H E S L O P H A R R I S O NJ . I n c o m p a t i b i l i t ya n dt h ep o l l e n s t i g m ai n t e r a t i o n [J ]. C e l l , 3 223 . [ 2] 芦岩 , 李玉花 . 芸苔属中自交不亲和反应的信号转导 [ J ]. 植物生理与 分子生物学, 2005, 41 ( 4) : 547 552. [ 3] S T E I NJ C ,H O W L E T TB ,B O Y E SDC ,e t a l . M o l e c u l a r c l o n i n g o f a p u t a t i v e r e c e p t o r p r o t e i n k i n a s e g e n e e n c o d e da t t h e s e l f i n c o m p a t i b i l i t y l o c u s o f B r a s s i c ao l e r a c e a [J ]. P r o c N a t A c a dS c i U S A , 1991, 88 :
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) : . 14] S C H O P F E RCR ,N A S R A L L A HME ,N A S R A L L A HJ B . T h e m a l e d e t e r m i n a n t o f s e l f i n c o m p a t i b i l i t y i nB r a s s i c a [J ]. S c i e n c e , : . 15 ] S U Z U K I G ,K A I N ,H I R O S E T ,e t a l . G e n o m i c o r g a n i z a t i o n o f t h e S l o c u s : i d e n t i f i c a t i o na n d c h a r a c t e r i z a t i o n o f g e n e s i n S L G /S R Kr e g i o n o f S 9h a p l o t y p e o f B r a s s i c ac a m p e s t r i s ( s y n . R a p a ) [J ]. G e n e t i c s , : 391 400. 16] D O U G H T YJ ,D I X O NS ,H I S C O C K SJ ,e t a l . P C P A 1 , ad e f e n s i n l i k e B r a s s i c ap o l l e nc o a t p r o t e i nt h a t b i n d s t h eSl o c u s g l y c o p r o t e i n , i st h e p r o d u c t o f g a m e t o p h y t i c g e n ee x p r e s s i o n [J ]. P l a n t C e l l , 33 1347. 17] K A C H R O OA ,S C H O P F E RCR ,N A S R A L L A HME ,e t a l . A l l e l e s p e c i f i c r e c e p t o r l i g a n di n t e r a c t i o n s i nB r a s s i c as e l f i n c o m p a t i b i l i t y [J ]. S c i e n c e , : . 18] S H I B AH ,I W A N OM ,E N T A N I T ,e t a l . T h e d o m i n a n c e o f a l l e l e s c o n t r o l l i n g s e l f i n c o m p a t i b i l i t y i nB r a s s i c ap o l l e ni s r e g u l a t e d a t t h e R N Al e v e l [J ]. P l a n t C e l l , 1 504 . 19 ] K A C H R O OA ,N A S R A L L A HME ,N A S R A L L A HJ B . S e l f i n c o m p a t i b i l i t y i n t h e B r a s s i c a c e a e : R e c e p t o r l i g a n ds i g n a l i n ga n dc e l l t o c e l l c o m m u n i c a t i o n [J ]. P l a n t C e l l , 7 238. 20] I WA N OM ,S H I B AH ,F U N A T OM ,e t a l . I m m u n o h i s t o c h e m i c a l s t u d i e s o n t r a n s l o c a t i o no f p o l l e nS h a p l o t y p ed e t e r m i n a n t i ns e l f i n c o m p a t i b i l i t y o f B r a s s i c ar a p a [J ]. P l a n t C e l l P h y s o i l , 8 436. 21] S H I M O S A T OH , Y O K O T AN , S H I B AH ,e t a l . C h a r a c t e r i z a t i o no f t h e S P 11/S C Rh i g h A f f i n i t y b i n d i n g s i t ei n v o l v e di ns e l f /n o n s e l f r e c o g n i t i o n i n B r a s s i c a s e l f i n c o m p a t i b i l i t y [J ]. P l a n t C e l l , 7 117. 22] C A B R I L L A CD ,C O C KJ M ,D U M A S C ,e t a l . T h e S l o c u s r e c e p t o r k i n a s e i s i n h i b i t e d b y t h i o r e d o x i n s a n da c t i v a t e d b y p o l l e n c o a t p r o t e i n s [J ]. N a t u r e , 2001 , 410: 220 223 . 23] 王茂广. 孢子体型自交不亲和反应臂重复蛋白 A R C 1[ J ]. 生命科学,
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) : 56 59, 77图 6　S a c Ⅰ/X b a Ⅰ 双酶切电泳图 F i g . 6　E l e c t r o p h o r e t o g r a mo f S a c Ⅰa n dX b a Ⅰd o u b l ed i g e s t i o n坪草生长速度减缓 。 但是 , 植物生长延缓剂的使用也存在如下问题 : ( 1) 这种 矮化不能遗传 , 花卉和草坪大多数属于常年生植物 , 因此矮 化的保持需要长期使用生长延缓剂 , 需要大量的人力和物 力; ( 2) 施药容易对植株产生药害 ; ( 3) 植物生长延缓剂难以 大面积推广 ; ( 4) 容易造成产品和环境污染 。因此 , 笔者以木( 上接第 13961 页 )[ 34 ] M U R A S EK ,S H I B AH ,I W A N OM ,e t a l . M e m b r a n e a n c h o r e d p r o t e i n k i n a s e i n v o l v e d i n B r a s s i c a s e l f i n c o m p a t i b i l i t y s i g n a l i n g [J ]. S c i e n c e ,
: . [ 35 ] H A N K SS ,Q U I N NAM . P r o t e i nk i n a s ec a t a l y t i cd o m a i ns e q u e n c e d a t a b a s e : I d e n t i f i c a t i o n o f c o n s e r v e d f e a t u r e s o f p r i m a r y s t r u c t u r e a n d c l a s s i f i -c a t i o n o f f a m i l y m e m b e r s [J ]. M e t h o d s E n z y m o l ,
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