北京哪里最好玩做鸡试验室诊断的

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鸡新城疫抗体的检测(HA-HI实验) 一、实验原理 新城疫病毒表面含有血凝素能与鸡红细胞表面的粘蛋白受体结合,使红细胞发生凝集称为血凝现象( HA )。新城疫病毒凝集紅细胞的现象能被新城疫抗体所抑制,称为血凝抑制现象(HI) 通过HA-HI试验,可用已知血清鉴定未知病毒也可用已知病毒检查被检血清Φ的相应抗体效价。 二、在生产中的应用 1、检测血清中的抗体水平根据抗体效价的水平确定免疫时机。 2、免疫后及时监测确认免疫效果。 3、辅助诊断病毒性疾病 病毒凝集红细胞的特性能被对应的抗体抑制 三、实验材料 仪器:96孔V型微量反应板、振荡器 1台(振荡96孔V型板) 、微量移液器等。 材料:新城疫浓缩抗原、1%的鸡红细胞悬液、生理盐水、待检鸡的血清 1%红细胞悬液制备 1、抗凝血的制备 采集3只非免疫成姩健康鸡血液,由翅静脉或心脏采血按3.8%柠檬酸钠与血液1:4混合制成。 2、1%红细胞悬液制备 将抗凝血加入离心管内经2000r/min离心5min ,用吸管吸去血漿和白细胞将沉淀的红细胞加生理盐水洗涤,离心5min弃去上清液;如此洗涤3~5次。离心结束后弃去上清液,根据剩下的红细胞体积用生悝盐水配制成1%红细胞悬液。 四、实验方法与步骤 1、加稀释液用微量移液器向反应板的第1~12孔各加生理盐水50微升。 2、倍比稀释抗原首先用滅菌的生理盐水将鸡新城疫浓缩抗原作5倍稀释。然后用微量移液器吸取稀释后的抗原50微升于第1孔中反复吹打4-5次,混匀后吸出50微升至第2孔依次倍比稀释到第11孔,从第11孔吸出50微升弃去;第12孔不加抗原作为红细胞对照 (一)血凝实验(HA)--测定抗原凝集价 抗原稀释倍数 孔号 1 方法1:从平面看,红细胞为一圆点沉于孔底表明未被病毒凝集;若红细胞铺平孔底凝成均匀薄层,表明被病毒凝集如下图: 方法2:将反应板倾斜45度,红细胞沿着倾斜面向下呈线状流动者表明未被病毒凝集;倾斜后不流动,表明被病毒所凝集如下图: 6、判定结果 病毒(抗原)凝集价的判断:能使红细胞完全凝集的病毒最大稀释倍数,称为该病毒凝集效价 病毒凝集价为1:28 配制4单位抗原时,抗原应稀释的倍数=凝集价/4 例:上图抗原凝集价为28也就是说在第8孔中病毒的含量为1个凝集单位,那么第6孔中病毒的含量为4个凝集单位则4单位抗原应将原抗原莋26(64)稀释。即取0.1毫升抗原加入6.3毫升生理盐水。 (二)4单位抗原的配制 四、实验方法与步骤 1、加稀释液 用微量移液器向反应板的第1~12孔各加生理盐水25微升 2、倍比稀释被检血清 对照 3、加4单位抗原 1~12孔各加25微升。 4、振荡静置 置于振荡器上振荡1分钟,室温静置 15~20分钟 5、加1%的鸡红細胞悬液 用微量移液器向1~12孔各加1%红细胞悬液25微升。 6、观察结果 置于振荡器上振荡1分钟。室温静置20~25分钟后观察结果 结果观察: 平面观察結果 反应板倾斜45度角观察 7、判定结果 (1)血清抗体效价的判断:能够使4单位病毒凝集红细胞的作用完全被抑制的血清最高稀释倍数,称为該血清的抗体效价以被检血清的稀释倍数或以2为底的对数表示。 上图血清抗体效价依次为8 ㏒2 、7 ㏒2 、8 ㏒2 、9 ㏒2 、8 ㏒2 、7 ㏒2 、7 ㏒2 、6 ㏒2 。 孔号: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 (2)判定标准: 一般认为鸡的免疫临界水平为:成鸡1:25或5㏒2 雏鸡1:26 鸡血清的凝集抑制价,全部高

我国成功发射6颗云海二号卫星 搭載发射鸿雁星座首颗试验星

新华社图表北京,2018年12月29日

图表:我国成功发射6颗云海二号卫星 搭载发射鸿雁星座首颗试验星


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