流式 isotype 马云为什么不做物流可以吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-04-30 08:12 标签： 不做人流的流产办法
为何用了Fc Block封闭Fc受体还需要用Isotype Control呢(受体,荧光抗体,非特异性结合) - 免疫实验 - 生物秀
标题: 为何用了Fc Block封闭Fc受体还需要用Isotype Control呢(受体,荧光抗体,非特异性结合)
摘要: [为何用了Fc Block封闭Fc受体还需要用Isotype Control呢(受体,荧光抗体,非特异性结合)] 最近想做流式，在网上查了资料。有的人说需要做Isotype Control，有的说不一定。我想弄清楚，到底需不需要？我做之前都用Fc Block将Fc受体封闭了，那荧光抗体还会非特异性结合吗？谢谢！ 关键词:[受体 荧光抗体 非特异性结合]……
最近想做流式，在网上查了资料。有的人说需要做Isotype Control，有的说不一定。我想弄清楚，到底需不需要？我做之前都用Fc Block将Fc受体封闭了，那荧光抗体还会非特异性结合吗？谢谢！
回复我跟你的问题相反，用了同型对照，但是本底还是高，在考虑要不要用FC-BLOCK.这是我在百度上看到的，不知道是否对你有帮助。博凌科为科技-为你解答：一、为什么要用同型对照？同 型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的及亚型的，用于消除由于抗体非特异性与细胞结合而产生的背景染色。同型 对照是真正意思上的阴性对照，它不但可以用来设定流式细胞仪的电压，而且还可以帮忙省去昂贵与繁琐的重组竞争封闭步骤。在流式细胞仪上样前，染色方式如下：样本管：一抗＋样本，同型对照管：同型对照＋样本二、如何选择同型对照？(1)一般选择与一抗的成分完全相同种属来源、相同亚型和亚链、相同荧光标记的抗体，比如抗人的CD56 FITC标记的抗体，成份是MouseIgG1,。那么它的同型对照应该是FITC标记的MouseIgG1,。注意同型对照的成份跟它的名称是相同的.(2)如果是抗体的组合形式是纯化的一抗＋荧光标记的二抗，那么应该选择一抗的同型对照。比如CD86的纯化抗体，成分是MouseIgG1,。它的同型对照是纯化的Mouse IgG1,。它的二抗PE标记的抗小鼠IgG1,。那么染色方式如下：样本管：纯化的CD86＋PE标记的抗Mouse IgG1(二抗)＋样本,同型对照管：纯化的同型对照＋PE标记的抗MouseIgG1(二抗 )＋样本.(3)如果没有找到适合的同型对照，在保持来源相同、荧光标记相同、免疫球蛋白类别相同条件下，那么优先选择的顺序应该是亚链不同－－亚型不同－－相同类别。比如，某种的抗体的来源是Mouse IgG2а,。如果在同型对照表里面找到不到完全相同的同型对照，那么优先选择相同荧光标记Mouse IgG2а为同型对照。如果也没有找到Mouse IgG2а，那么优先选择相同荧光标记的Mouse IgG2b作为同型对照。如果最后还是没有找到Mouse IgG2b，那么选者相同荧光标记的Mouse IgG2作为同型对照。3、哪些客户需要使用同型对照？A 对流式不是非常熟悉的客户。B 做胞内流式客户，比如胞内、和信号蛋白等。C 使用不常见的标志或者特异性不高的标志的客户，因为客户不熟悉不常见标志的表达情况，根据同型对照可以判断阳性细胞的位置。一些特异性不高的，如多抗，非特异性结合非常多，使用同型对照可排除假阳性。D 对流式非常熟悉又使用常用的表面标志的客户，一般可以不使用同型对照。4、为什么有时候同型对照的表达会比的表达高？首先需要检查同型对照的抗体是否加错类型、剂量等。其次，因为有些标志在细胞的表面或者胞内表达不高，而跟其类似的抗原非常多，那么加入同型对照时，同型对照非特异性的结合会超过抗体的特异性，所以会造成这种现象。这个时候推荐使用其他阴性对照，如空白对照等。
相关热词：
..........
生物秀是目前国内最具影响力的生物医药门户网站之一，致力于IT技术和BT的跨界融合以及生物医药领域前沿技术和成功商业模式的传播。为生物医药领域研究人员和企业提供最具价值的行业资讯、专业技术、学术交流平台、会议会展、电子商务和求职招聘等一站式服务。
官方微信号：shengwuxiu
电话：021-

我要回帖

更多关于 不做人流的流产办法 的文章

 

随机推荐