尼康显微镜黄色激发块Texas Red HYQ（带通）的介绍_上海光学仪器厂新闻资讯尼康显微镜黄色激发块Texas Red HYQ（带通）的介绍 & &&
&紫外可见和近红外透射为尼康Texas Red HYQ高性能滤波器组合频谱轮廓下面示于图1.该滤波器组是一个两尼康黄色激发组中，这两者都采用的带通发射（阻挡）滤波器而不是一个长通品种，以便限制从荧光团发射的量，组合优化的波长区域以外的干扰。 在75纳米发射窗（608至683纳米）是结合了介质宽度（55纳米）激发通带（532至587纳米），以允许选择性地激发和检测特定荧光团受欢迎，这是在多个标记实验常用的。 Texas Red HYQ滤波器组合配备有595纳米（截止波长）长通二色镜。
黄色激发滤光片座Texas Red HYQ规格：
激发波长筛选：532-587纳米（带通，560 CWL）
双色镜截止波长：595纳米（长通，LP）
屏障过滤波长：608-683纳米（带通，645 CWL）
Texas Red HYQ滤波器组合被设计，以增加次级荧光的亮度，而不产生在信噪比的相应增加。 更陡的通带是通过增加在两个激发和发射滤光片干涉腔的数量，从而使频谱轮廓之间的更接近创建。 所得更宽和更陡的滤波器通带使该组，以提供更多的激发能量并捕获荧光信号的更高的水平。 该过滤器组合与流行的荧光探针得克萨斯红色和CY3.5进行了优化，当单独或多重标记技术被用于他们，并且也建议由黄色波长的激发荧光等应用。 带通发射滤波器功能，以减少或消除从荧光团发射的深红色或近红外光谱区的干扰。 Texas Red HYQ滤波器组合被设计为尼康Y-2E / C组的较高的能量的变化，与更广泛的激发和发射滤光器透射区域。它适合于用基本相同的组的探针的使用，同时提供对这些发光超出在Y-2E / C发射带的上限改进的性能。(奥林巴斯)
因为由膨胀激发和发射通带区域允许增加的能量传输，与Texas Red HYQ集合产生的图像通常是亮的并显得比那些从类似Y 2E / C组合更红。 Texas Red HYQ，CY3.5，氨基放线菌素D（AAD），酸性品红，Alexa Fluor 568和594，茜素络合剂，BOBO-3，BO-PRO-3，BODIPY：学习以下荧光当Texas Red HYQ过滤器设置建议，ROX（羧基-X-罗丹明），DiBAC4（5），HcRed，LDS 751（结合的RNA），MitoTracker红，MRFP-1（单体红色荧光蛋白），naphthofluorescein，SYPRO红，SYTO 17（59,61， 64），YO-PRO-3，和YOYO-3。 在图2中呈现的图像表明具有多种针对不同细胞内位置黄色吸收荧光探针的这种过滤器组合的性能。
示于图2（a）是从大鼠袋鼠肾（PTK2线）的上皮细胞进行免疫荧光标记与初级抗波形蛋白（一种中间丝蛋白）的小鼠单克隆抗体的培养的荧光发射随后的山羊抗小鼠Fab片段结合到罗丹明红。 最大吸收罗丹明红的是570纳米，并且最大发射发生在590纳米。 角蛋白是一类形成单丝，中间丝的一种类型，存在于细胞骨架结构的水不溶性蛋白质。 另外，将试样同时染色用DAPI核DNA。 注意没有来自蓝色荧光团（DAPI），其不能有效地由黄色光激发信号的，但是从罗丹明标记波形蛋白中间纤维网的高水平的红色荧光强度。
由薄小鼠肾脏的部分沾上多个（3）的荧光团的荧光发射强度显示在图2（b）。 在组织切片细胞核靶向与核酸探针的DAPI，当在细胞培养物和组织切片结合到DNA，其具有最大激发在358纳米，并且具有发射最大值在461纳米。 另外，低温恒温器部也同时沾上的Alexa Fluor 488麦胚凝集素（肾小球和曲小管）和Alexa Fluor 568鬼笔环肽（丝状肌动蛋白和刷状缘）。 注意没有信号的同时从蓝色（DAPI）和绿（的Alexa Fluor 488）探针，但强烈的红色荧光由于的Alexa Fluor 568中的肌动蛋白和刷状缘的网络的存在。
印度麂的鹿皮沾上的Alexa Fluor 568缀合鬼笔环肽，其结合到细胞内丝状肌动蛋白网络的成纤维细胞的培养，示于图2的（c）。 最大吸收的Alexa Fluor 568的是578纳米，并且最大发射发生在603纳米的可见光谱的橙色区域。 另外，将试样同时用DAPI染色（在细胞核靶向DNA;蓝色发光）和MitoTracker绿FM（靶向线粒体;绿色发光）。 注意没有信号从绿色（MitoTracker）和蓝色（DAPI）的荧光团，它们是不能有效地激发在黄色的波长，但明亮的橙红色荧光的肌动蛋白丝发挥。
图2（D）展示了从HeLa细胞的培养即进行免疫荧光标记的同随后缀合的Alexa Fluor 546的吸收最大值的Alexa的山羊抗-小鼠Fab片段初级抗组蛋白（锅）的小鼠单克隆抗体的荧光发射强度氟546是556纳米，并且最大发射发生在573纳米（在可见光光谱的黄色区域）。 第一抗体，从HeLa细胞的纯化核级分生产，特异性结合的抗原决定簇，其存在于所有五个组蛋白（H1，H2A，H2B，H3和H4）。 注意从两个间期核和单核前期强劲的红色荧光强度。
大鼠胸主动脉（平滑肌）染色的细胞与MitoTracker红CMXRos，其靶向细胞内的线粒体的网络，在图2（e）是示出。 最大吸收MitoTracker红CMXRos的是579纳米，并且最大发射发生在599纳米。 另外，将试样同时用DAPI染色（在细胞核靶向DNA;蓝色发光）和BODIPY FL-phallacidin（靶向肌动蛋白;绿色发光）。 注意没有信号从蓝色（DAPI）和绿（BODIPY）荧光团，但明亮的红色荧光被管状线粒体发挥。
由薄脚轮豆的部分自发荧光发射强度（ 蓖麻 ）组织表现出如图2（f）所示。 在植物组织中的内源性的自发荧光产生于各种生物分子，包括叶绿素，β-胡萝卜素，叶黄素和。 在黄色激发区域，叶绿素具有吸收带具有低消光系数，但仍然产生荧光的检测水平在580纳米的发射波长和上述（橙色和红色）。 对于以上所说明的脚轮豆薄部分，注意自发荧光发射强度的在红色光谱区的存在，但不存在强度中的低级（绿色和蓝色）的波长。BX53和BX43荧光显微镜的报价及波段选择
【原创】 作者： 日 14:27
&& &因为很多人在初次选择显微镜的时候，往往对荧光波段不知道如何选择，小张在这里给大家一一列举，如果需要配置电话一、概述奥林巴斯和尼康的三波段激发的荧光滤光片组合包括两个很精确的平衡组合（DAPI-FITC-TRITC和DAPI-FITC-Texas Red），每个组合包括三个带通的发射区域，可以选择性的通过蓝色、绿色、黄色、橙色和红色光谱区的激发光。这样的相互辅助作用就可以探究激发滤光片和发射滤光片光谱以及多色反光镜的激发和发射滤光片的改变（为在紫外、蓝光和绿光区的多色荧光标记设计的三波段激发光组合）是如何影响信号级别、光谱交叉、整体滤光性能和图像对比度的。表一奥林巴斯三波段激发荧光滤光片组合参数滤光片组合激发滤光片(nm)多色反光镜(nm)发射滤光片(nm)附DAPIFITCTRITC385-400475-490545-565435500570450-465505-535580-620Violet EX / Blue EMBlue EX / Green EMGreen EX / Orange-Red EMDAPIFITCTexas Red395-410490-505560-580445510590450-470515-545600-650Violet EX/ Blue EMBlue EX / Green EMGreen EX / Red EM&&&&DAPI-FITC-TRITC C这个滤光片组合的设计是用来同时检测DAPI, FITC和TRITC或者其他具有相似光谱的荧光探针。三个窄带激发和发射波段是紫外激发光的特定区和相对应的蓝色发射光，蓝色激发光对应的绿色发射光，以及绿色激发光和相对应的橙色-红色发射光。DAPI-FITC-Texas Red C与标准的DAPI-FITC-TRITC组合相比，这个滤光片组合的设计初衷是为了观察紫外激发-蓝色发射的带通区，和蓝色激发-绿色发射的带通区之间的细微变化。这个设计是为了更好的与Texas Red所需的更大的激发和发射波长结合。多带通区域提供了最佳的探测条件，最小的光谱交叉和噪声，可以同时观察DAPI, FITC和Texas Red，或者具有相似波长的荧光探针组合。&二、使用方法 WWW.SUOHONG.CC首先是随即选择的荧光标本出现在Specimen Image窗口，同时紫外-蓝光-绿光的三带通激发光滤光片组合（DAPI-FITC-TRITC）的光谱特征显示在“滤光片组合”（Filter Set Spectral Profiles）栏下。通过选择在“光谱交叉部分”（Spectral Cross Sections）下合适的check box（Absorption或Emission），荧光的吸收和发射光谱交叉的部分（滤光片投射带通的重叠部分）就可以单一或者一起观察了。当一个或者多个check box被激活时，组合的滤光片传送和发射光谱会附加在用于标本荧光观察的吸收和发射光谱（不包括自发荧光的植物标本）上。荧光吸收光谱在辅助区时用褐色填充的，而在相应的发射光光谱区用灰色填充的。滤光片组合的波长特征以较低的位置展示在黑色的长方形box内。这些数值常常根据滑块从左到右转换而更新。为了操作这个辅助部分，使用Filter Set滑块可以将三带宽激发的两个滤光片组合相互转换。因为滑块是由左至右滑动的，所以激发光和阻挡滤光片以及多色反光镜的光谱会同时转换。值得注意的是，持续转换光谱并不意味着任何的滤光片组合都是可能的，也不意味单一的滤光片组合的光谱可以随意改变。在选择的滤光片组合中改变光谱范围很简单，有助于在每一个光学模块中的滤光片组合建立联系。 小张单一的滤光光谱（激发光，发射光和多色反光镜）可以通过选择和去除Filter Set Spectral Profiles下相应的check box来添加和删除。除此之外，荧光的吸收和发射光谱可以通过同样的操作添加和删除（Spectral Cross Sections）。观察样本的图像会随着滤光片的转换而改变，反应出信号强度和对比度的变化；而这种变化是由滑块移动引起滤光片组合产生的。一个新的目标样本可以通过Choose A Specimen的下拉菜单随时进行，而用于观察的荧光种类就列在下拉菜单中。在任何情况下，样本都经过两种或者多种荧光探针的染色，通过选择的宽窄的带通阻挡滤光片组合来观察。&三、详细介绍奥林巴斯和尼康的三波段荧光组合主要是为特定的三色荧光组合观察而设计的，而且他们在相似的吸收和发射光谱的其他探针组合中同样有效的观察。利用精确的波段选择，和在反射与传递区的极速转换，多种的激发和发射信号可以在最低的干涉条件下区分开来。为了保持三个不同荧光信号波段的稳定性，这些特制的滤光片组合也可以将多带通特性和多色反光镜结合，这样与特定激发和发射滤光片互补的传递和发射区就可以使用了。每一个尼康的三波段荧光组合都为DAPI、FITC和TRITC优化设计。与这些荧光组合的相关光谱区的范围由紫外激发和蓝光发射到绿光激发和红光发色区域。奥林巴斯和尼康DAPI-FITC-TRITC的三波段滤光片组合一个为紫外区域激发光（385到400nm）设计的激发滤光片结合，这个激发光滤光片伴有一个带通发射滤光片在它最初的信号波段内传递蓝色荧光（450到465nm）。这个滤光片的第二个激发-发射波长组合使蓝光在475-490nm这么窄的波长范围内激发，在505-535nm探测到绿色荧光。第三个荧光信号由绿光区域激发光产生（nm），这可以引起橙色-红色光发射，探测到580-620nm的波长。这个组合的三色荧光波段可以同时优化DAPI, FITC和RITC组合。尤其是对不同的细胞成分观察时；DAPI, FITC, and TRITC的荧光组合也适合这个滤光片组合使用，这是因为Alexa Fluor 488和MitoTracker Red CMXRos的光谱特性与FITC和RITC的光谱特性相似的缘故。在三色激发模块中，与在其他的多波段组合一样，多色反光镜的设计原则是以分开不同荧光信号为基础的，还可以检测到最小的光谱交叉 (spectral bleedthrough)和噪声。与长分光光束器常用于传统的滤光片组合相反的是，多波段组合中使用有几个带通的区域的多色反光镜。典型的是，第一个反光镜的cut-on波长值就在短波长激发光峰值上几纳米处，接着是极速的cut-off，这样可以允许第二个激发波段通过。在三波段滤光片组合中，这个传递-反光模式可以在第三个信号通道中再次重复。在DAPI-FITC-TRITC模式中使用的二色反光镜有多带通传递区域。这些cut-on的波长位于435, 500和570nm。在多波段滤光片组合中应用薄片干涉技术的应用使各荧光信号水平得到平衡，这样可以得到最佳的成像效果。在很多滤光片组合中，短波长激发峰值的传递会降低以平衡两个或者三个发射信号，还可以是光漂白和对样本的毒害降到最低。这一点在为在紫外光谱区有单一荧光激发设计的滤光片组合中尤为重要，因为它可以使较短波长获得高的激发效率。短波长激发峰的密度的显著下降在尼康三波段组合中的传递光谱区域均有体现；也可以通过检测滤光片组合传递光谱区域获得同样的结果。举例来讲，双波段的FITC-Texas Red和三波段的DAPI-FITC-Texas Red组合利用同样的双色反光镜和发射光滤光片，仅仅在激发光滤光片部分有差别，在这两组滤光片组合中第三个短波带通添加到DAPI激发模式下。要想同时检测DAPI, FITC和Texas Red（或相似谱区的荧光），利用DAPI-FITC-Texas Red三激发波段滤光片组合很容易的观察到。紫外激发、蓝色发射光滤光片波段和蓝色激发、绿色发射波段（分别对应于DAPI和FITC）与DAPI-FITC-TRITC组合有类似的特性，但是与TRITC相比，它们的绿色激发红色发射在更长的波段发生。这个组合中使用的激发滤光片一个带通区为395-410nm，发射滤光片的带通区为450-470nm，这些波段适宜DAPI和相似荧光基团观察中使用。第二个波段的激发光在蓝色波长范围490-505nm，检测对应的绿光发射范围在515-545nm（用于FITC及相似荧光基团观察）。Texas Red荧光的信号通道最佳的激发光范围在560-580nm，发射波段是在红光区域的600-650nm处。虽然DAPI, FITC和Texas Red的三波段组合已经达到最佳，但是形同的吸收和发射光谱特性的荧光探针也可以用这个滤光片组合观察。跟DAPI-FITC-Texas Red 模块相比，DAPI-FITC-TRITC模块，具有红色发射光带通可以在较短波长观察情况下调整15nm，产生的图像颜色更偏橙色。DAPI-FITC-Texas Re滤光片组合中的双色反光镜（分束器）的带通区根据激发和发射光滤光片的窗口在445，510和590nm时定位。两种尼康三色带通滤光片组合的双色反光镜和滤光片参数见表一。
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　作者: 厂商投稿　编辑:
　　BX53和BX43荧光显微镜的报价及波段选择　　因为很老师在初次选择显微镜的时候，往往对荧光波段不知道如何选择，小张在这里给大家一一列举，如果需要配置电话　　一、概述　　奥林巴斯和尼康的三波段激发的荧光滤光片组合包括两个很精确的平衡组合(DAPI-FITC-TRITC和DAPI-FITC-Texas Red)，每个组合包括三个带通的发射区域，可以选择性的通过蓝色、绿色、黄色、橙色和红色光谱区的激发光。这样的相互辅助作用就可以探究激发滤光片和发射滤光片光谱以及多色反光镜的激发和发射滤光片的改变(为在紫外、蓝光和绿光区的多色荧光标记设计的三波段激发光组合)是如何影响信号级别、光谱交叉、整体滤光性能和图像对比度的。▲　　DAPI-FITC-TRITC&这个滤光片组合的设计是用来同时检测DAPI, FITC和TRITC或者其他具有相似光谱的荧光探针。三个窄带激发和发射波段是紫外激发光的特定区和相对应的蓝色发射光，蓝色激发光对应的绿色发射光，以及绿色激发光和相对应的橙色-红色发射光。　　DAPI-FITC-Texas Red&与标准的DAPI-FITC-TRITC组合相比，这个滤光片组合的设计初衷是为了观察紫外激发-蓝色发射的带通区，和蓝色激发-绿色发射的带通区之间的细微变化。这个设计是为了更好的与Texas Red所需的更大的激发和发射波长结合。多带通区域提供了最佳的探测条件，最小的光谱交叉和噪声，可以同时观察DAPI, FITC和Texas Red，或者具有相似波长的荧光探针组合。▲　　二、使用方法 WWW.SUOHONG.CC　　首先是随即选择的荧光标本出现在Specimen Image窗口，同时紫外-蓝光-绿光的三带通激发光滤光片组合(DAPI-FITC-TRITC)的光谱特征显示在&滤光片组合&(Filter Set Spectral Profiles)栏下。通过选择在&光谱交叉部分&(Spectral Cross Sections)下合适的check box(Absorption或Emission)，荧光的吸收和发射光谱交叉的部分(滤光片投射带通的重叠部分)就可以单一或者一起观察了。当一个或者多个check box被激活时，组合的滤光片传送和发射光谱会附加在用于标本荧光观察的吸收和发射光谱(不包括自发荧光的植物标本)上。荧光吸收光谱在辅助区时用褐色填充的，而在相应的发射光光谱区用灰色填充的。滤光片组合的波长特征以较低的位置展示在黑色的长方形box内。这些数值常常根据滑块从左到右转换而更新。　　为了操作这个辅助部分，使用Filter Set滑块可以将三带宽激发的两个滤光片组合相互转换。因为滑块是由左至右滑动的，所以激发光和阻挡滤光片以及多色反光镜的光谱会同时转换。值得注意的是，持续转换光谱并不意味着任何的滤光片组合都是可能的，也不意味单一的滤光片组合的光谱可以随意改变。在选择的滤光片组合中改变光谱范围很简单，有助于在每一个光学模块中的滤光片组合建立联系。 小张　　单一的滤光光谱(激发光，发射光和多色反光镜)可以通过选择和去除Filter Set Spectral Profiles下相应的check box来添加和删除。除此之外，荧光的吸收和发射光谱可以通过同样的操作添加和删除(Spectral Cross Sections)。观察样本的图像会随着滤光片的转换而改变，反应出信号强度和对比度的变化;而这种变化是由滑块移动引起滤光片组合产生的。一个新的目标样本可以通过Choose A Specimen的下拉菜单随时进行，而用于观察的荧光种类就列在下拉菜单中。在任何情况下，样本都经过两种或者多种荧光探针的染色，通过选择的宽窄的带通阻挡滤光片组合来观察。　　三、详细介绍　　奥林巴斯和尼康的三波段荧光组合主要是为特定的三色荧光组合观察而设计的，而且他们在相似的吸收和发射光谱的其他探针组合中同样有效的观察。利用精确的波段选择，和在反射与传递区的极速转换，多种的激发和发射信号可以在最低的干涉条件下区分开来。为了保持三个不同荧光信号波段的稳定性，这些特制的滤光片组合也可以将多带通特性和多色反光镜结合，这样与特定激发和发射滤光片互补的传递和发射区就可以使用了。每一个尼康的三波段荧光组合都为DAPI、FITC和TRITC优化设计。与这些荧光组合的相关光谱区的范围由紫外激发和蓝光发射到绿光激发和红光发色区域。　　奥林巴斯和尼康DAPI-FITC-TRITC的三波段滤光片组合一个为紫外区域激发光(385到400nm)设计的激发滤光片结合，这个激发光滤光片伴有一个带通发射滤光片在它最初的信号波段内传递蓝色荧光(450到465nm)。这个滤光片的第二个激发-发射波长组合使蓝光在475-490nm这么窄的波长范围内激发，在505-535nm探测到绿色荧光。第三个荧光信号由绿光区域激发光产生(nm)，这可以引起橙色-红色光发射，探测到580-620nm的波长。这个组合的三色荧光波段可以同时优化DAPI, FITC和RITC组合。尤其是对不同的细胞成分观察时;DAPI, FITC, and TRITC的荧光组合也适合这个滤光片组合使用，这是因为Alexa Fluor 488和MitoTracker Red CMXRos的光谱特性与FITC和RITC的光谱特性相似的缘故。　　在三色激发模块中，与在其他的多波段组合一样，多色反光镜的设计原则是以分开不同荧光信号为基础的，还可以检测到最小的光谱交叉(spectral bleedthrough)和噪声。与长分光光束器常用于传统的滤光片组合相反的是，多波段组合中使用有几个带通的区域的多色反光镜。典型的是，第一个反光镜的cut-on波长值就在短波长激发光峰值上几纳米处，接着是极速的cut-off，这样可以允许第二个激发波段通过。在三波段滤光片组合中，这个传递-反光模式可以在第三个信号通道中再次重复。在DAPI-FITC-TRITC模式中使用的二色反光镜有多带通传递区域。这些cut-on的波长位于435, 500和570nm。　　在多波段滤光片组合中应用薄片干涉技术的应用使各荧光信号水平得到平衡，这样可以得到最佳的成像效果。在很多滤光片组合中，短波长激发峰值的传递会降低以平衡两个或者三个发射信号，还可以是光漂白和对样本的毒害降到最低。这一点在为在紫外光谱区有单一荧光激发设计的滤光片组合中尤为重要，因为它可以使较短波长获得高的激发效率。短波长激发峰的密度的显著下降在尼康三波段组合中的传递光谱区域均有体现;也可以通过检测滤光片组合传递光谱区域获得同样的结果。举例来讲，双波段的FITC-Texas Red和三波段的DAPI-FITC-Texas Red组合利用同样的双色反光镜和发射光滤光片，仅仅在激发光滤光片部分有差别，在这两组滤光片组合中第三个短波带通添加到DAPI激发模式下。　　要想同时检测DAPI, FITC和Texas Red(或相似谱区的荧光)，利用DAPI-FITC-Texas Red三激发波段滤光片组合很容易的观察到。紫外激发、蓝色发射光滤光片波段和蓝色激发、绿色发射波段(分别对应于DAPI和FITC)与DAPI-FITC-TRITC组合有类似的特性，但是与TRITC相比，它们的绿色激发红色发射在更长的波段发生。这个组合中使用的激发滤光片一个带通区为395-410nm，发射滤光片的带通区为450-470nm，这些波段适宜DAPI和相似荧光基团观察中使用。第二个波段的激发光在蓝色波长范围490-505nm，检测对应的绿光发射范围在515-545nm(用于FITC及相似荧光基团观察)。Texas Red荧光的信号通道最佳的激发光范围在560-580nm，发射波段是在红光区域的600-650nm处。　　虽然DAPI, FITC和Texas Red的三波段组合已经达到最佳，但是形同的吸收和发射光谱特性的荧光探针也可以用这个滤光片组合观察。跟DAPI-FITC-Texas Red 模块相比，DAPI-FITC-TRITC模块，具有红色发射光带通可以在较短波长观察情况下调整15nm，产生的图像颜色更偏橙色。DAPI-FITC-Texas Re滤光片组合中的双色反光镜(分束器)的带通区根据激发和发射光滤光片的窗口在445，510和590nm时定位。两种尼康三通滤光片组合的双色反光镜和滤光片参数见表一。