存不存在“吞噬”病毒的痰涂片细菌吞噬既然有噬菌体,那么有

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让病毒“吃”细菌
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噬菌体的光彩被抗生素遮挡了几十年
1915年,细菌学家弗雷德里克·特沃特发现了一些能够杀死细菌的物质,不过他并没有搞清楚这些东西是什么,也没有对此继续研究.1917年,菲里克斯·迪海莱独立地发现了这种成分,并且把“细菌”和“吞噬”组合起来,把它命名为“噬菌体”
既然噬菌体能够杀死细菌,那么能否用它来治疗细菌引起的疾病呢?1919年,迪海莱和助手在巴黎开始了噬菌体疗法的试验.他们给4个得了细菌性痢疾的年轻人注射了一次抗痢疾噬菌体,结果在24小时内,病人的病情都出现了好转.这一疗法迅速引起了巨大关注.
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噬菌体治疗的机遇与挑战
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百科词条: (最后修订于 4:17:53)[共238字]摘要:细菌噬菌体亦称细菌病毒,或简称噬菌体。是一类感染细菌使菌体裂解而增殖的病毒。是由F.d′Herelle(1917)和F.W.Twort(1915)各自独立的发现。d′Here-lle根据“吞噬细菌”生物的这一涵义,命名为细菌噬菌体。M.Delbrück等将细菌噬菌体作为研究噬菌体本身增殖的模型,A.Lwoff等将之作为研究细胞调节机制的模型,而成为了分子生物学诞生的前奏。关于噬菌体的分类,曾作过若干次从理论上进行系统分类的尝试,但今天仍难于系统分类。表中为代表性的噬菌体。......&&&
相关文献:具备适当的监测系统。2.有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。3.证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。4.血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。5.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。6.对细胞有良好的支持繁殖作用。(二)、我国在对牛血清的质量2000年版《中国生物制品主要原辅料质控标准》中提出比较严格的标准要求。包括蛋白质含量,细菌、真菌、支原体双链DNA病毒,如疱疹病毒和细菌噬菌体,在感染过程中向细胞内注入其遗传物质,这一病毒基因组的侵入过程由称为门户蛋白(portalprotein)的DNA通道介导。日《分子细胞》(MolecularCell)的封面文章表明,门户蛋白通过构象变化促使噬菌体的成熟和侵入。噬菌体的生长和繁殖包括吸附、侵入、增殖、成熟和释放多个过程,门户蛋白是噬菌体P22衣壳蛋白的重要成分,以往研究表明的研究人员MichielVos发现,土壤中的噬菌体能够根据其周围细菌的类型而不断改进他们感染细菌的能力,因此,噬菌体的这种进化方式能够重构其生存的小范围内的生态系统。这篇研究报告发表在《Science》杂志上。MichielVos在一块土地上选取5个点为土壤样本,每个样本土壤面积为25cm×25cm。然后从各个样本中分离出Stenotrophomas细菌及其相关的噬菌体。噬菌体对细菌进行感染,增殖一、选择题A型题1.下列除哪项外,现在都发现有相应的噬菌体A.细菌 B.放线菌 C.螺旋体 D.真菌 E.立克次体2.能与宿主菌染色体整合的噬菌体基因组称为A.毒性噬菌体 B.温和噬菌体 C.前噬菌体 D.溶原性噬菌体 E.以上都不是3.下列哪项为噬菌体的特性A.通过细菌滤器 B.严格宿主特异性 C.只有一种核酸 D.有溶菌周期与溶原状态 E.以上均是4.下列细胞中,不受噬菌体侵袭的是A.真菌细这些抗生素的细菌中就存在着产生耐药性的保护机制,在抗生素的刺激下这些细菌的保护机制将会导致细菌耐药基因的产生。(2)遗传物质的传递[5]:细菌的许多功能均是借助于遗传物质来完成的,如移动性质粒、细菌噬菌体、转座子及整合子等均可介导细菌遗传物质的转移。通过这些基因的转移元件,可使细菌的耐药性得到传播。(3)基因突变:由于抗生素的广泛使用,且细菌的适应性不断改变,使得细菌基因发生突变而产生新的耐药性壳聚糖酶[21]。目前,BacilluscirculansMH-K1和Streptomycessp.N174的壳聚糖酶3级结构已被测定,Streptomycessp.N174的壳聚糖酶3级结构与细菌噬菌体T4溶菌酶的3级结构相似。虽然BacilluscirculansMH-K1和Streptomycessp.N174种壳聚糖酶在氨基酸序列上有20%的相似性,但总的分子构像相似,两者分子结构有3个%。这些初乳中的免疫球蛋白对于幼畜的存活是非常重要的,它们能协助胃肠道预防感染。  Silverstein氏等研究了羊免疫反应的个体发生,发现不同日龄的胎儿对抗原的反应有显著差别。41天的胎儿对细菌噬菌体×174能产生抗体,56天的胎儿对铁蛋白能产生抗体,80天的胎儿对血清蛋白能产生抗体,120天的抬儿对卯清蛋白能产生抗体。胎儿对卡价苗、伤寒沙门氏菌或白喉杆菌病毒没有反应,羊胎儿对抗原同样会产生基于CRISPR元件的噬菌体-细菌侵染关系分析流程。右:口腔噬菌体-细菌教材侵染网络。在复杂的人体环境中,从体表到机体内部都共生着规模庞大的微生物,其群落结构变化与人体健康状况联系密切。其中种类丰富、数量巨大的噬菌体能通过塑造菌群结构影响人体健康。但由于人体内的噬菌体过于微小,且缺乏像细菌16SrDNA和真菌ITS一样的标签序列,目前人们仅通过少数低通量的分离纯化实验来确定其与细菌宿主的侵染关系,病毒是地球上数量最多的生命体,在控制寄主群落演替、遗传基因的水平移动、生物进化和地球生物化学循环中起到重要的作用。细菌病毒(噬菌体)数量上一般是细菌的10倍左右,被认为是地球上数量最多的病毒类型。尽管噬菌体广泛存在,但与具有细胞结构的微生物相比,对其基因多样性研究甚少。究其原因,一方面传统噬菌体研究依赖于分离培养,但环境中的细菌大多数尚处于难培养状态,限制了噬菌体的获得;另一方面也与噬菌体基因中没peptidecanmimicrytheepitopeofLPSorLipidA.  Keywords LPS Mimicpeptide Phagedisplaypeptidelibrary  已知细菌脂多糖为非胸腺依赖抗原,难以诱导有效的免疫回忆反应,90年代初曾有人用抗独特型抗体成功地模拟了脂多糖表位,提示了用蛋白或多肽模拟脂多糖的可能性。从噬菌体肽库中筛选目的短肽是近年来发展起来的一项新技术异噬菌体抗体筛选出来;③通过体外突变系统,在抗体可变区引入随机突变,可模拟抗原驱动下的体细胞突变抗体成熟过程,提高抗体的亲和力;④具有优越的表达性能,阳性噬粒感染琥珀非抑制型大肠杆菌时,抗体可分泌至细菌周质,经折叠后还可进一步分泌至细胞培养液中。可以预测,随着蛋白质三维结构预测和分子模拟技术与噬菌体抗体技术的融合,必将推动抗体改造及抗原抗体作用的分子机制等多方面的研究进程。  利用单抗可变区基因构据英国《自然》杂志网站和美国《国家科学院学报》网站3月2日报道,美国科学家通过对噬菌体进行改造,使其能够抑制细菌对抗生素的耐受性。如果将其与抗生素联合使用,还能杀死目前已存在的对抗生素广泛耐受的细菌。噬菌体是一类寄生并侵害细菌的病毒,又称细菌病毒。利用感染和杀死细菌的病毒来战胜传染的理念可以追溯到大约100年前。但这种疗法从未曾在西方使用,当抗生素登上历史的舞台,噬菌体疗法更受冷落。不断有细菌对抗据英国《自然》杂志网站和美国《国家科学院学报》网站3月2日报道,美国科学家通过对噬菌体进行改造,使其能够抑制细菌对抗生素的耐受性。如果将其与抗生素联合使用,还能杀死目前已存在的对抗生素广泛耐受的细菌。噬菌体是一类寄生并侵害细菌的病毒,又称细菌病毒。利用感染和杀死细菌的病毒来战胜传染的理念可以追溯到大约100年前。但这种疗法从未曾在西方使用,当抗生素登上历史的舞台,噬菌体疗法更受冷落。不断有细菌对抗一.液体培养法1.将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养,一般培养16~24小时。2.将噬菌体原液100μl与寄主细菌悬浮液300μl均匀混合,静置15分钟使其感染。3.将混合液接种至含10ml新鲜液体培养基的试管中,于适当温度下振荡培养约8~24小时,培养时间依噬菌体之不同而异。4.将培养液移入离心管中,以10,000rpm(5,000g)离心10分钟,以沉淀寄主细菌。5.将上清液移至新ershey-Chase实验中,冷泉港卡内基研究所的AlfredHershey和MarthaChase利用噬菌体证明了细胞中的遗传物质是DNA而不是蛋白质。噬菌体能通过包裹在蛋白质外壳内的DNA感染细菌。Hershey和Chase对噬菌体的硫元素(只存在于蛋白外壳而非DNA中)和磷(只存在于DNA而非蛋白中)元素进行了放射性标记了。然后用这些噬菌体感染细菌。将细菌分离并进行分析发现,细菌中只含有放英国剑桥的科学家最近宣称,在英国的康河里发现的噬菌体病毒可能成为下一代抗生素。  英国剑桥郡威康信托桑格研究所的安娜#8226;托里伯说:“噬菌体把细菌当作感染对象,某些噬菌体仅仅攻击特定的细菌。因此,通过使用噬菌体病毒攻击引起疾病的细菌,可以治疗细菌感染。这种方法比传统的抗生素治疗更有针对性。”  啮齿柠檬酸杆菌是大肠杆菌的一个“近亲”,人体食物中毒和肠胃感染一般由该杆菌引起,这种细菌也会引起日中华传染病杂志2004Vol.22No.6P.377-380(宁夏)为了建立噬菌体生物扩增法快速测定乙胺丁醇(EMB)耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌(MTB)EMB耐药性测定中的应用价值,研究者应用噬菌体生物扩增法测定102株MTB临床分离株EMB耐药性,并与绝对浓度法结果进行比较,对不符合的菌株测定其最低抑菌浓度(MIC)。结果噬菌体法测定102株MTB临床分离株EMB敏日中华肝脏病杂志2006Vol.14No.9P.666-6698(西安)为了构建人工进化丙型肝炎病毒(HCV)C和E1区基因噬菌体展示文库,并进行初步筛选。研究者应用DNA改组技术进行不同基因型的HCVC和E1区基因的人工进化,克隆于噬菌体载体,以辅助噬菌体M13KO7援救后,构建噬菌体展示文库,应用HCVC和E1区单克隆抗体进行初步筛选。随机选取筛选后的20个噬菌体克隆,用噬菌体展示技术  80年代中期,Georgep.s在前人对丝状噬菌体分子生物学研究的基础上首先提出了噬菌体展示技术。其基本原理是将外源DNA片段插入噬菌体编码蛋白基因PⅢ或PⅥ中,使外源DNA片段对应的表达产物融合在噬菌体的外壳蛋白中形成融合蛋白,呈现在噬菌体表面。该技术将蛋白质分子的表型和基因型巧妙地结合于丝状噬菌体这样一个便于对其进行一系列生化和遗传操作的载体上,从而大大简化了蛋白质分子表达一项概念验证研究提出,噬菌体疗法可能提供一种方法从而解决长期以来难以处理的抗生素耐药性问题。以瞄准病原细菌的定制病毒为基础的噬菌体疗法可能帮助应对抗生素耐药性的激增,但是这种策略也受到一些缺点的影响,尤其是向受感染组织提供噬菌体的困难,以及耐噬菌体基因在细菌之间的频繁转移。UdiQimron及其同事使用λ噬菌体,把一个CRISPR-Cas基因编辑系统转移到了抗生素耐药性细菌的基因组中,这个编辑系统日中华肿瘤杂志2005Vol.27No.11P.645-64723(上海)为了筛选人源肝癌组织特异性结合短肽。研究者体外培养人源肝癌细胞株BEL-7402,建立荷瘤裸鼠模型。尾静脉注射噬菌体12肽文库至荷瘤裸鼠体内,循环20min后回收肿瘤组织中噬菌体,作者:日中华肿瘤杂志2005Vol.27No.7P.397-40024(银川)为了寻找能够与胃癌腹膜高转移细胞GC9811-P特异性结合的噬菌体多肽,探索治疗胃癌腹膜转移的新方法。研究者运用噬菌体呈现肽技术,先后用胃癌的腹膜高转移细胞系GC9811-P和其亲本细作者:硫氰酸盐洗脱法测定噬菌体抗体的相对亲和力中华微生物学和免疫学杂志2000年第4期第20卷基因工程抗体作者:王刚 王琰单位:100037北京,解放军海军总医院关键词:抗体亲和力;噬菌体抗体;硫氰酸盐洗脱法  【摘要】 目的 建立一种测定噬菌体抗体相对亲和力的方法。方法 参照硫氰酸盐洗脱法测定完整抗体分子和Fab段相对亲和力的方法,在ELISA实验中以酶标抗M13为二抗检测5个单克隆噬菌体抗体的相对美国得克萨斯农工大学农业生命研究中心的科学家们选择噬菌体鸡尾酒疗法来防治致命的葡萄皮尔斯病。这项成果可能揭开价值数百万美元的美国葡萄酒行业新的一页。该研究发表在学术期刊PLOSONE上,描述了四种噬菌体的应用。它们被确认为有能力攻击可导致葡萄和其他几种植物巨大灾难的细菌。噬菌体是一种攻击细菌的病毒。因为它们在环境中很丰富,科学家尝试了解更多不同类型的噬菌体和具有攻击能力的特定噬菌体。农业生命研究中日中华结核和呼吸杂志2005Vol.28No.9P.619-62225(重庆)为了探讨噬菌体能否杀灭巨噬细胞内耻垢分枝杆菌,并成为减少细胞内活菌量的手段。研究者将体外培养的已感染耻垢分枝杆菌的小鼠腹腔巨噬细胞随机分为4组:生理盐水组,噬菌体高剂量组、中剂量组和低剂量组。分别加入生理盐水0.1ml、10#噬菌体2.1×107噬菌斑形成单位(PFU)、2.1×106PFU和2.1带尾噬菌体的形态一般从一个空衣壳或者原衣壳开始组装,然后噬菌体基因组插入到这个预备蛋白壳中。基因组包装的过程要考虑熵和静电的作用,以及DNA必须克服的弯曲能。事实上,噬菌体DNA的装运泵是众所周知的最强大的生物泵。装运一般由一个分子马达驱动,将ATP水解得到的能量转换为DNA的运动能量。8月6日《结构》(Structure)杂志的封面文章,报道了Morais等人描绘的噬菌体29DNA装运泵不同部科技发展中心9新的研究表明噬菌体结构-侵染细菌的病毒的结构,类似于某些感染人类的危险病毒结构。因此,我们可以研究噬菌体结构和其具体特征以及生活周期,而不用去研究感染人类的病毒。芬兰赫尔辛基大学病毒研究中心结构生物学家JuhaHuiskonen和SarahButcher和欧洲分子生物学实验室的同事们合作,发现了双链RNA病毒结构(phi6)。这个病毒被怀疑为噬菌体,侵染细菌而不是真核细胞。令研究人员 奕 何 进 秦慧莲 何 曦单位:周 铬 刘康达 龚 奕 何 进 (上海医科大学附属中山医院实验研究中心,上海200032);秦慧莲 何 曦 (上海医科大学免疫学教研室,上海200032)关键词:噬菌体展示技术;基因工程抗体;乙型肝炎X抗原  中国图书分类号 R371  摘 要 目的:进一步探索重组基因工程抗体在原核系统中有效的活性表达途径。方法:在已构建的抗HBx单链抗体(ScFv)的基础上,应用噬菌体随机肽库研究蛋白质抗原表位的进展免疫学杂志2000年第4期第16卷综述与讲座作者:王细文 梁平 韩本立单位:王细文(第三军医大学新桥医院肝胆外科,重庆 400037);梁平(第三军医大学新桥医院肝胆外科,重庆 400037);韩本立(第三军医大学西南医院肝胆外科中心,重庆 400038)关键词:噬菌体;肽库;抗原;表位  [摘 要] 蛋白质抗原表位分析在抗原的结构与功能、抗原抗体反应、【摘要】目的探讨噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌在糖尿病合并结核感染快速诊断中的应用价值。方法收集我院门诊和综合医院内分泌科糖尿病患者的痰、纤支镜抽取液、穿刺液、脓液标本共60例,应用噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌,同时做抗酸染色,并用VersaTREKTM细菌培养仪做分枝杆菌种鉴定。结果噬菌体生物扩增法检测的阳性率为43.3%(26/60),显著高于涂片法25.0%(15/60)(P0.05)日中华肝脏病杂志2006Vol.14No.8P.561-5648(重庆)为了用T7噬菌体筛选系统筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白(NS)3的相互作用蛋白。研究者应用T7噬菌体展示技术,以通过原核表达的方式得到的丙型肝炎病毒NS3为靶分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行筛选,对筛选到的克隆进行DNA序列分析及同源性研究。结果经鉴定得到2个阳性克隆,并确定能与丙型肝炎病毒NS3相互作年06月12日中华肿瘤杂志2005Vol.27No.11P.645-64723(上海)为了筛选人源肝癌组织特异性结合短肽。研究者体外培养人源肝癌细胞株BEL-7402,建立荷瘤裸鼠模型。尾静脉注射噬菌体12肽文库至荷瘤裸鼠体内,循环20min后回收肿瘤组织中噬菌体,同时取正常对照组织进行噬菌体效价测定和免疫组化观察。将回收的噬菌体扩增、纯化,并以此作为起始物进行下一轮筛选。经过3轮体内筛选,得到日中华肿瘤杂志2006Vol.28No.10P.728-732(上海)为了构建重组表皮生长因子受体(EGFR)噬菌体疫苗,并观察其抗肿瘤效果。研究者将鸡源EGFR膜外部分的5个基因片段插入T7噬菌体表达系统中,EGFR蛋白以融合蛋白的形式表达在噬菌体的外壳蛋白10B上,从而构建成噬菌体疫苗。Westernblot方法检测噬菌体壳蛋白的EGFR表达,ELISA方法检测免疫小鼠血engineeringofaphagelysinthattargetsGram-negativepathogens”,文章中,研究者揭示了一种工程改造的细胞溶解酶可以杀灭革兰氏阴性致病菌。噬菌体是一种可以感染细菌具有多产能力的病毒,随着噬菌体感染细菌最终可以引起大多数细菌的死亡。自从噬菌体在1910年被发现以来,其用于治疗细菌感染的潜力被许多科学家不断发掘着;当然目前来说噬菌体疗法刚刚起步,但是随一.点滴法1.将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养,一般培养16~24小时。2.取300μl寄主细菌悬浮液加入5ml冷却至45℃的0.7﹪琼脂培养基中,均匀混合后立即平铺于已凝固的1.8﹪琼脂培养基上,并静置30分钟以上使其凝固。3.以1%peptone为稀释液,将噬菌体原液做10倍序列稀释,一般稀释至107倍即可。4.将平板划分为八个区域,以pipetman取不同稀释倍数之噬菌体稀释液[摘要]目的筛选并鉴定与表达人CD59的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞特异结合的内化短肽,为设计具有拮抗CD59肿瘤逃逸活性的短肽药物奠定基础。方法以高表达人CD59的CHO细胞为靶,对噬菌体随机十二肽库进行5轮亲和筛选,并进行竞争结合实验,用ELISA法筛选噬菌体阳性克隆并对其进行DNA序列分析。结果随机挑选的10个克隆中有6个与人CD59结合力高,测序后得到2个高度同源的氨基酸序列。结论获得了与hepatitisGantigenicepitope  自1985年美国Missouri大学Smith博士首先建立噬菌体表面展示技术(phagedisplaytechniques,PDT)以来,这一技术在研究分子间相互识别,如抗原-抗体、配体-受体、酶-底物等诸多领域已充分显示其独特的优势[1]。该技术是以经过改建摘 要:目的:从噬菌体随机6肽文库中筛选IL-6抗体的识别表位。方法:利用具有IL-6中和活性的单抗C220筛选呈现于丝状噬菌体表面P3蛋白的随机6肽文库。结果:从噬菌体随机6肽文库中筛选出36株可与单抗特异结合的噬菌体克隆,其中多数克隆呈现核心序列SWLR,该序列与IL-6的序列具有一定同源性。竞争结合实验和Western印迹分析,带有SWFNLR和HSWLRY小肽的2株噬菌体克隆可与IL-6λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径,其一是裂解生长,环状DNA分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长,即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体DNA中与之一起复制,并遗传给子代细胞,宿主细胞不裂解。平板培养时,裂解生长形成噬斑。液体培养时,裂解生长日中华肿瘤杂志2005Vol.27No.7P.397-40024(银川)为了寻找能够与胃癌腹膜高转移细胞GC9811-P特异性结合的噬菌体多肽,探索治疗胃癌腹膜转移的新方法。研究者运用噬菌体呈现肽技术,先后用胃癌的腹膜高转移细胞系GC9811-P和其亲本细胞GC9811对噬菌体12肽库进行消减性的全细胞淘洗,经过3轮筛选,随机挑选40个噬菌体单克隆C1~C40。用ELISA法据美国物理学家组织网近日报道,美国科学家在《自然》杂志上撰文指出,他们利用噬菌体,在实验室中让生物分子的进化速度提高了100倍。新研究有望让制药业使用实验室培育出来的蛋白质、核酸和其他成分按需制药。  该研究的领导者、哈佛大学化学和生化教授戴维·刘说,大多数现代药物都由有机小分子制成,但某些情况下,蛋白质或核酸等生物大分子可能更适合用来制药。但这种生物大分子如何快速地制造一直是一大难题,新研究提日《中华泌尿外科杂志》-期-609-613页医学空间()4月28日消息,该项研究的目的是建立国人前列腺癌噬菌体Fab抗体片段库,筛选、鉴定抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)的人源Fab抗体可变区的编码基因,为前列腺癌的诊断与基因治疗研究开辟新途径。方法采用20例前列腺癌患者外周血分离淋巴细胞,提取其总RNA,经RTPCR及半套式扩增得到新华网巴黎2月17日电(记者卢苏燕)经过3年多的研究,法国科学家终于发现了一种在鼠疫杆菌传播机制中发挥重要作用的噬菌体,这将有助于提高预防鼠疫传播的水平。  这项研究是由巴斯德研究所伊丽莎白·卡尔涅尔领导的研究小组完成的。研究人员介绍说,早在中世纪,鼠疫的大面积迅速流行曾使欧洲人口在3年内减少了三分之一。时至今日,鼠疫不但没有绝迹,反而在亚洲和非洲某些国家出现反弹。为此,该所从2004年开始与美日中华传染病杂志2005Vol.23No.4P.225-22814(上海)为了建立噬菌体生物扩增法快速测定异烟肼(INH)耐药性的方法,并探讨其在结核分枝杆菌(MTB)INH耐药性测定中的应用价值,研究者用PhaB法检测167株MTB临床分离株INH耐药性,并与Bactec-960测定结果比较,分析PhaB法的敏感性、特异性和准确性。结果0.2μg/mlINH与菌液37℃作用λ-噬菌体基因表达的高分辨率图谱λ-噬菌体作为一种被广泛研究的有机体,已经成为研究基因调控的最简单模式菌株。无论是基因表达的集中研究还是现代矩阵杂交技术的应用,都阐明了λ-噬菌体在生长过程中基因功能的复杂性。最近兴起了一种核糖体图谱新技术,通过捕捉细胞内核糖体的瞬间翻译位点来为大家提供更细致和精准的基因表达图谱。近日,中科院天津工业生物技术研究所江会锋研究组运用核糖体图谱技术获得了λ-噬菌体基因馆#8226;病原体》(PLoSPathogens,00888)发表了中国科学技术大学生命科学学院孙宝林研究组的研究成果。该研究揭示了金黄色葡萄球菌可选择性σ因子σH参与调控原噬菌体在宿主基因组上整合和外切的过程。原噬菌体是病原菌重要的可移动基因元件之一,常携带有大量毒力相关基因,直接影响了病原菌的致病力强弱。金黄色葡萄球菌是临床感染和食品工业污染最重要的病原菌之一。孙宝林研霍乱弧菌中存在不含霍乱毒素基因的噬菌体CTXΦ基因组中华微生物学和免疫学杂志1999年第3期第19卷细菌学作者:阚飙 祁国明 刘延清 刘彩莲 高守一单位:102206北京,中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室关键词:霍乱弧菌;霍乱毒素;CTXΦ基因组  【摘要】 目的 近年研究发现产毒霍乱弧菌的毒素基因ctxAB由其溶原性噬菌体CTXΦ编码,这种丝状噬菌体可携带c芽孢杆菌属(Bacillus)细菌是一类广泛存在的革兰氏阳性菌,其中诸如炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、蜡样芽孢杆菌杆菌(B.cereus)、短小芽孢杆菌(B.pumilus)、苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis,Bt)等为人类、动物、植物或昆虫的病原菌。噬菌体为细菌病毒,它和其编码的裂解酶在细菌性病害的防治中有着巨大的应用前景。同时,在工业发酵中,Bt噬菌体的污染可导致工业发征。方法 所用KIR为NKAT2,其可溶性形式为NKAT2-IgG1。噬菌体抗体库为Nissim等报道的半合成抗体库。抗体库经包被免疫管的NKAT2-IgG15次筛选后,可溶性ScFv由IPTG诱导细菌而获得,筛选效果由测定噬菌体的菌落形成单位及DNA酶切图谱分析。ELISA、聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹分析ScFv特异性及免疫学特征,并进行DNA的序列测定。结果 5次筛选后,噬菌体得到200倍的lB前导序列各自进入细菌的质周腔中,在此完成重链、轻链的自发折叠而形成Fab抗体(Fd+κ或λ)。pelB前导序列在进入质周腔前被切下去,而质周腔中的Fab抗体则借助重链与cpⅢ形成的融合分子锚定在细菌内膜上,经辅助噬菌体(如VCSM13)感染后,Fab抗体便被包装入噬菌体内,借助于cpⅢ而呈现在噬菌体表面。由于噬菌体还含有天然的cpⅢ蛋白,可以再次感染宿主菌,故抗药噬菌体菌落即为重组成功的噬菌体偏振(fluorescencepolarization)和“磁镊子”将帮助研究人员对噬菌体进行控制。这项技术不仅有望使二十世纪上半期出现的,在抗生素出现后又衰落的治疗传染病的措施重获青春,而且对治疗会感染人类的疱疹和腺瘤病毒提供了新思路。噬菌体是一类感染、杀死细菌的病毒,其本身含有一个不定的遗传密码,能够应对细菌随时进化出的抗性,这是被动的抗生素所不具备的。面对致命性细菌,如Escherichi
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