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从哪里看出DNA分子复制不是从多个起点开始的?——2009年高考江苏卷第12题的探讨--《中学生物教学》2009年08期
从哪里看出DNA分子复制不是从多个起点开始的?——2009年高考江苏卷第12题的探讨
【摘要】:正~~
【关键词】:
【分类号】:G634.91【正文快照】:
1肠目图2为真核生物染色体上DNA分子复制过程示惫图,有关叙述错误的是().....……复制起点哪里能看出DNA分子复制不是从多个起点开始的呢?真核生物DNA的复制是从多个位点开始的,所以真核生物的DNA分子上有多个复制单位同时进行DNA的复制。多方面的实验结果表明,大多数生物
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第5章.DNA复制
第五章 遗传物质的复制第一节 复制概述 第二节 细菌DNA复制第三节 真核生物DNA复制第四节 RNA的复制 第一节 复制概述复制是生物体基本的生命活动之一。复制就是产生相 同拷贝的过程。在各种生物大分子中只有核酸(DNA 和RNA)能进行复制。DNA 复制是以亲代模板合成子代DNA 的过程:dATP, dTTP 1 dsDNA ──→ 2 ssDNA ───────→ 2 dsDNA dGTP, dCTPRNA的复制方式有两种:从RNA到RNA途径 从RNA到DNA再到RNA途径(反转录途径) DNA双链的互补配对:A对T,G对C ┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳ A T C GG CA T A G C CT T CG T A GCC G T A T C G GA A GC ┻┻┻┻┻┻┻┻┻┻┻┻┻┻┻┻DNA复制是半保留复制半保留复制证明:放射性同位素15N标记实验。 细菌培养于15N硝酸盐培养基中一定时期,使细菌的 DNA带上15N 标记;分离菌体培养在不含15N(含14N) 并分别于第1、2轮复制结束后提取细菌DNA;通过 密度梯度离心观察DNA带分布。
LL LH HH3210世代 有关DNA复制的几个基本概念: 复制子:DNA分子上作为复制单位的区域 (片段)。复制子包括一个复制起点和一至若干个复制终点;原核DNA通常只有 一个DNA分子,含一个复制子;真核生物DNA通常有多个 DNA分子,每个DNA分子均含多个复制子.DNA复制方向:新链由5'- 端向3'- 端延伸,所以两条DNA 新链中,一条是连续合成的,一条是分段合成的。RNA引物:在DNA合成前,先由RNA聚合酶催化合成一段RNA引物,然后DNA聚合酶再接着进行DNA合成,引物被水 解后再补上DNA合成,最后由DNA连接酶将不连续DNA片段 连接成完整的DNA链。复制叉(生长点):复制发生的位点,也是复制过程中双链DNA解开双螺旋的位置。 后随链不连续合成复制叉5`3`3`引物5`复制叉前导链连续合成 5`3`3`5`DNA聚合酶I降解引物 (5'-3' 外切酶活性) 5`3`3`5`DNA聚合酶I补充DNA合成 (5'-3' 聚合酶活性) 5`3`3`5`DNA连接酶连接DNA片段 ?DNA复制是单向或双向进行 第二节 细菌DNA复制拓扑异构酶:解开负超螺旋; 单链结合蛋白:稳定DNA单链; DNA聚合酶:延伸DNA链; DNA负超螺旋 拓扑异构酶 I 解链酶:解开双螺旋; 引物酶:合成RNA引物; DNA连接酶:连接DNA片段拓扑异构酶IV 1.1 起始:拓扑异构酶的作用下,DNA超螺解开为双螺旋; ? 复制起点与起始蛋白复合体(DnaA-ATP)结合, 并附着于细胞膜上; ? DNA双螺旋局部打开(3个13 bp富含AT的序列); ? DNA解旋酶(DnaB) 结合到起始复合体上继续打 开双螺旋,单链结合蛋白(Ssb)结合稳定已解开的 单链DNA; ? 引物酶(一种RNA聚合酶)附着于复合体上催化合 成引物RNA; ? DNAD旋酶(另一种拓扑异构酶)缓解因双螺旋 解开而产生的正超螺旋扭力。? ? 大肠杆菌的复制起点大肠杆菌的复制起点称为oriC,是由245个碱 基对组成DNA区域,这些序列在大多数细菌 中是高度保守的,关键序列是3个13bp和4个 9 bp的富含AT的重复序列。3个13bp 串联重复序列 DnaA蛋白结合的4个9bp序列 Ssb 1.2 延伸: ? DNA pol III α亚基催化从 5’-端向 3`端接着引物 合成DNA, 先导链连续合成,后随链分段(冈崎片 段)合成; ? DnaB不断打开双螺旋,先导链不断延伸DNA, 引物酶在后随链上不断地以一定间隔合成引物并 接着由DNA聚合酶合成冈崎片段(nt); ? DNA pol I 降解引物并填充DNA,DNA ligase 将 冈崎片段连接成长链。 ? DNA pol I 的5'-3'外切酶活性可除去RNA引物, 5'-3' 聚合酶活性可填补去引物后的空隙,3'-5'外 切酶活性可校正错误渗入的核苷酸。 ? DNA 速率约为每秒 900 bp。 半不连续复制(延伸)dsDNAOkazaki fragment
? DNA连接酶的作用机理 DNA复制的忠实性在大肠杆菌DNA的复制中,差错率为10-9-10-10。 ? 1、碱基配对原则 ? 2、引物RNA的作用 ? 3、DNA聚合酶I的校正阅读作用 1.3 终止:?细菌 DNA 复制子有一个起点(ori C) 和两个复制叉,复制 终点相对于复制起点(180o)。 复制叉移至复制终点,tus gene 产物结合于终点抑制 DnaB 解旋酶并阻止复制叉的位移; 复制完成, 拓扑异构酶IV分离两个交联的子代DNA环,两 个子DNA分子分开。?? 当任意一个复制叉碰到一个功能性Tes-Tur复合物 时,就停止。而另一个复制叉碰到第一个被阻止的复 制叉时也停止前进。 逆时针复制叉 顺时针复制叉顺时针复 制叉陷阱逆时针复制叉陷阱 第二节 真核生物DNA复制2.1 起始真核生物DNA复制发生于S期,成簇的20-50 复 制子同时起始;DNA合成同样需要引物RNA ? 一般情况下,常染色质的复制快于异染色质,着 丝点DNA和端粒DNA最后复制; ? 复制子锚定在染色质支架蛋白上,每复制子在起 点处有11 bp的一致序列与识别蛋白复合体(ORC) 结合,CDKs (cyclin-dependent kinase)活化 ORC打开 DNA双螺旋; ? 许可因子确保每个复制起点在一个细胞周期中只 使用一次。? multiple origins 2.2 延伸真核DNA复制涉及三种DNA pol. 在RNA引物合成 后, DNA polα 接着延伸DNA,然后DNA polδ迅速 取代polα继续延伸DNA,DNA polε完成引物清 除后所留下间隙的DNA合成。 ? 解开核小体的过程迟缓了复制叉移动,真核生物 DNA的复制子远远短于原核DNA。 ? 复制叉DNA与复制所需的酶在支架蛋白上组装成 复制器。?2.3 终止DNA延伸到达终点, 相邻复制子的终点相遇; DNA连接酶将各个复制子的新生DNA片段相连. 真核生物DNA聚合酶有:??? ? ? ? ?DNA聚合酶α,负责染色体DNA的复制。该酶大亚基负责聚 合,小亚基负责引物的合成,由于缺乏3-5的外切活性, 可能参与滞后链RNA引物的合成。 DNA聚合酶δ 负责DNA链的延伸,该酶需要增殖细胞核抗 原(PCNA)来协助。其主要功能类似于原核生物DNA聚合 酶的β亚基,形成一个环行的钳子,增加DNA聚合酶δ复制 的连续性。 DNA聚合酶β 主要负责核DNA的修复。 DNA聚合酶ε 除去冈崎片段上的引物,负责核DNA修复。 DNA聚合酶γ 负责线粒体DNA的复制。 RFA 是真核生物的DNA单链结合蛋白 RFC 促进复制复合物的组装。 2.3 端粒DNA的复制新链DNA 5`端 RNA引物被降解后由于没有3`-OH, DNA pol 不能催化补充合成DNA, 导致新合成的 DNA链略短于模板链; ? 随着复制次数的增加,新链短缩终将导致遗传信 息的丢失,使复制不能进行甚至细胞死亡。 ? 端粒DNA由高度重复的简单序列构成,3'- 端突出. ? 端粒酶含有一小片段的RNA与端粒DNA重复序列 互补,使端粒酶能将小片段的重复序列RNA加接 到突出的3'- 端,使缩短的端粒DNA得以恢复。 ? 在正常的体细胞中端粒酶基因不表达。但在肿瘤 细胞中端粒酶基因组成性表达,导致DNA不断复 制和细胞无限增殖。?
第三节 RNA复制3.1 从RNA到RNA途径?一些病毒只含有RNA而不含DNA, 称为RNA病毒, 这些病毒中的RNA是遗传物质,编码特殊的RNA 复制酶,在宿主细胞中催化以RNA为模板的RNA 生物合成。RNA复制酶催化的合成反应是以RNA为模板,由 5‘- 向 3’- 方向进行RNA链的合成。RNA复制酶缺 乏校对功能的外切酶活性,因此RNA复制的错误 率较高,RNA复制酶只是特异地对病毒的RNA起 作用,而宿主细胞的RNA一般并不进行复制。? 病毒 RNA复制的几种方式:含正链RNA(+)的病毒(例如,噬菌体Q):(+)RNA 充当 mRNA(合成蛋白质模板) (+)RNA的复制以(+)RNA为模板 ,合成(-)RNA, 再以(-) RNA为模板合成(+) RNA。 ? 含负链RNA(-)的病毒(例如狂犬病):以(-)RNA为模 板合成(+)RNA,再由(+)RNA为模板合成蛋白质。 ? 含双链RNA的病毒(例如呼肠孤病毒):以(-)RNA为 模板合成(+)RNA,以(+)RNA为模板合成(-)RNA, 同时以(+)RNA为模板合成蛋白质。?
3.2反转录途径反转录(逆转录)是以RNA为模板合成DNA的过程? 反转录酶的酶活性RNA指导的DNA聚合酶活性 RNase H活性 DNA指导的DNA聚合酶活性 需要引物? 反转录过程产生的双链DNA的互补链作为RNA合成的模板转录成为子RNA分子. 转 录
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DNA复制叉的复制过程及其参与的酶有哪些
〓星宇〓TA0464
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以E.coli为例他的复制起点只有一个(真核生物DNA复制有多个起点),复制方向为双向复制,包括大肠杆菌在内的大多数生物DNA,只有真核生物线粒体DNA和某些大肠杆菌噬菌体DNA是单向复制复制泡:DNA复制起点附近形成的泡状结构复制叉是指两条DNA链分开,各自开始允许复制的那个点.半保留复制就不说了,大家都知道,还有一个就是半不连续复制,有前导链和后滞链(leading strand 和lagging strand)都是由5'末端到3'末端的复制.前导链是连续复制,后滞链,又叫冈崎片段,是不连续复制,冈崎片段在最后会背连接起来形成完整的DNA新链.接下来说一下参与复制的蛋白(你说酶也行……我们一般用英文= =)· 引物(primer)所有的DNA聚合酶都不能在没有引物的情况下开始DNA的复制.引物一般都是很小的RNA片段,大多是5个nucleotide那么长,有引物酶合成.DNA聚合酶Ⅲ催化前导链和冈崎片段的合成DNA聚合酶Ⅰ用它的5'-3'外切活性来去除引物并填充新DNA的空隙.DNA连接酶参与DNA片段合成的末端.·辅助蛋白DNA是双螺旋的,所以一开始先解旋.这时候就要用到DNA解旋酶了.它参与了DNA双螺旋的解旋,并且消耗ATP.单链DNA结合蛋白(SSB)它与单链DNA结合,防止碱基重新配对.拓扑异构酶Ⅰ,破坏在复制叉前面小段距离的DNA链的磷酸二酯键,允许一条DNA绕着另一条自由旋转解旋,然后再连接.(磷酸二酯键的连接也需要拓扑异构酶)拓扑异构酶Ⅱ也是破坏DNA双链结构的,然后再重新连接起来.------------------------或者你还要复制端粒的细节咩=0=
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