产品名称: PCR Enhancer PCR 增强剂
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刚看到文献里有提做实验用的Buffer的成分，比如：500mM&&KCl&&;&&100mM&&Tris-HCl ，pH 8.3 ;&&15mM&&MgCl。
Tris-HCl应该是提供缓冲用的，镁离子的作用就不用说了，但是KCl是干啥的呢？？
另外，普通PCR的Buffer跟其他的PCR反应的Buffer，比如荧光定量PCR的，有什么不同么？？
有向Buffer里面添加其他东西，以保证反应更好进行的么？
问的比较多，大家讨论下～
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缓冲液中含有50mmol/L的K+，有利于引物与模板的退火。有些缓冲液中还加入明胶或血清白蛋白（100ug/mL）及去污剂（如Tween20 等），对Taq DNA聚合酶起稳定作用。
总之，缓冲液需针对Taq DNA聚合酶的特性来配置，商品化的Taq DNA聚合酶都有附带的最佳缓冲液，一般以工作浓度的10倍贮存液提供。
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& & 请问哪些添加剂对荧光定量PCR影响较大呢？比如曲线的形状，Ct值等等……
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生物秀探花
反应增强剂，稳定剂？
该用户从未签到
稳定剂有哪些？
增强剂又有哪些？
最近做定量，曲线丑的死，引物、探针、镁离子、dNTPs都做了正交实验，还是不能看……想看看Buffer能不能变下。
PS：没条件跑电泳，
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只有提供盐环境，DNA才能在退火中复性
签到天数: 3 天[LV.2]偶尔看看I
生物秀探花
学习学习，坚持每天露一下脸。
dmso、甜菜碱是所谓的增强剂吧，不过定量的pcr buffer里面应该没加。
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坚持啊，一天一点的积累，等待爆发的日子啊
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做定量的大大们这么少么？没几个人唉……
我的材料是DNA，用Taq Man探针做的……
该用户从未签到
呵呵，我们的定量做的还可以。buffer都是用的SYBS MIX。
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【求助】在线请教两种10×PCR buffer的区别？（KCL vs (NH4)2SO4）
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这个帖子发布于9年零192天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
今天订立MBI的taq酶，发现里面有两种不同的buffer，一种含KCL,另外一种含(NH4)2SO4,请问两个buffer在使用上有什么区别没？里面的解释我也看不大懂，望高手解答！
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KCl buffer的产率比较高，(NH4)2SO4 buffer的特异性比较好，你可以根据情况自己选择。一般常用的都是KCl
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我们仔细来研究下这段英文，好好翻译一下：both taq buffers can be sused for the same applications.however,the higher and more consistent yield of the specific pcr product over a vide range of mgcL2
concentration can be achieved in the buffer with (NH4)2SO4 than in the traditional buffer.我觉得这段话的主要意思是 (NH4)2SO4的buffer优于传统的KCL的一是， (NH4)2SO4的buffer获得更高的产率二是，使用(NH4)2SO4的buffer，mgcL2的浓度高低影响就不大了，(直译：在较宽的范围内获利一致的产率)
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连续的G会形成稳定的二级结构，影响退火，延伸，而不含k+的buffer可以避免这种情况。In real-time PCR amplicons are typicallyshort with limited capability to fold. But sequential runs of guanines, even only2–3 consecutive guanines, may fold the template into a tetraplex structure, whichis exceedingly stable and cannot be transcribed by the polymerase (Simonsonet al., 1998). Guanine tetraplexes form exclusively in the presence of K+ ions(Simonsson, 2001), and the problem can be avoided by using K+ free PCR buffer.
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目的片段中连续的G会形成稳定的二级结构，影响退火，延伸，而不含k+的buffer可以避免这种情况。提供一篇参考文献
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连续的G会形成稳定的二级结构，影响退火，延伸，而不含k+的buffer可以避免这种情况。In real-time PCR amplicons are typicallyshort with limited capability to fold. But sequential runs of guanines, even only2–3 consecutive guanines, may fold the template into a tetraplex structure, whichis exceedingly stable and cannot be transcribed by the polymerase (Simonsonet al., 1998). Guanine tetraplexes form exclusively in the presence of K+ ions(Simonsson, 2001), and the problem can be avoided by using K+ free PCR buffer.
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参考文献没有必要分成两部分，一个包要价两个叮噹就得了！
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关于丁香园RU ￥100.00
Ru ￥350.00
pfu酶,10×pfu
Buffer(with Mg2+)
Pfu DNA Polymerase
REBIO&R03019
EINECS编号
储存条件：
低温（-20度）
Pfu DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Pyrococcus furiosus的高度热稳定的DNA聚合酶。Pfu酶的分子量为90kDa。Pfu酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。和Taq酶不同，Pfu酶有3’至5’的外切酶活性(proofreading
activity)。另外，Pfu酶有5’至3’外切酶活性，但Pfu酶没有反转录酶活性。
&&&&&&由于Pfu酶有3’至5’的外切酶活性，因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低，出错率为2.6×10-6 per nt per cycle。Pfu的出错率不仅远远低于Taq酶，也低于一些其它的高保真DNA聚合酶例如Vent、DeepVent、Pwo、Tli等，因此Pfu酶常作为首选的高性价比的高保真DNA聚合酶。&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&10×Pfu
Buffer (with Mg2+)：200
mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 20 mM MgSO4, 100 mM
(v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。
销售价（RMB）
折扣价(RMB)
200U，10×pfu
Buffer(with Mg2+)
1000U&，10×pfu
Buffer(with Mg2+)
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10&PCR Buffer (Mg2+ plus)
■ 制品说明
本产品与TaKaRa Taq (Code No.: R001A/B/C) 以及TaKaRa Taq Hot Start Version (Code No.: R007A/B) 中所提供的Buffer相同。
1. PCR法扩增DNA。
2. DNA序列测定。
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