怎样使细胞生长的更好
怎样使细胞生长的更好
09-03-19 &匿名提问
发表于刚刚出版的《生物学》（Journal of Biology）的一项研究，挑战近代生物学中关于细胞生长的理论。研究人员表示，哺乳细胞并不会调控它们的大小，因而驳斥了科学家从70年代以来的假说。 研究人员Conlon 和Raff 做了一系列的试验，使用大鼠坐骨神经的Schwann细胞进行研究，建立哺乳细胞如何控制它们的大小并且决定于何时进行分裂。这种细胞决定大小、生长和分裂的过程，已经在酵母中普遍地研究了30年。当酵母和哺乳动物的细胞生长及分裂时，知道要维护恒定的细胞大小。 因此研究人员长久以来假设，酵母细胞可以确保分裂及生长时达到正确大小的机制，也适用于哺乳动物的细胞，但这项假说并未进行实验测试，直到这篇研究发表。 使用精确地测量方式，Conlon 和Raff 发现酵母和哺乳细胞生长上的重要区别。酵母细胞成指数地增长，在固定的时期大小加倍，但哺乳细胞则是线性地生长，每天增加的大小是一致的；这意味着，哺乳细胞增长的比率是相同的，但是酵母细胞中，较大的细胞生长得会比小的更为快速。 培养细胞生长过程：潜伏期→指数增生期→停滞期 一、潜伏期(latent phase)： 细胞接种后,先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期.此时,细胞质回缩, 胞体呈圆球形.然后细胞贴附于载体表面,称贴壁,悬浮期结束. 细胞贴壁速度与细胞种类, 培养基成分,载体的理化性质等密切相关。一般情况下，原代培养细胞贴壁速度慢,可达10-24 小时或更多, 而传代细胞系贴壁速度快, 通常10-30 分钟即可贴壁。细胞贴壁后还需经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期.原代培养细胞潜伏期，约24-96 小时或更长, 连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期短，仅需6-24 小时。 二、指数增生期(logarithmic growth phase) 这是细胞增殖最旺盛的阶段，分裂相细胞增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长是否旺盛的一个重要标志。通常以细胞分裂相指数（Mitotic index, MI）表示，即细胞群中每1000 个细胞中的分裂相数。一般细胞的分裂指数介于0.1%-0.5%，原 代细胞分裂指数较低，而连续细胞和肿瘤细胞分裂相指数可高达3％－5％。 指数增生期的细胞是细胞活力最好时期，是进行各种实验最佳时期，也是冻存细胞的最好时机。在接种细胞数量适宜情况下，指数增生期持续3－5 天后，随着细胞数量不断增多、生长空间减少，最后细胞相互接触汇合成片。正常细胞相互接触后能抑制细胞运动，这种现象称接触抑制现象(contact inhibition)。而恶性肿瘤细胞无接触抑制现象，能继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，使细胞发生堆积（piled up）。细胞接触汇合成片后，虽然发生接触抑制，但只要营养充分，细胞仍能进行增殖分裂，因此细胞数仍然在增多。但是，当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养枯竭和代谢产物的影响，导致细胞分裂停止，这种现象称密度抑制现象（Density Inhibition）。 三、停滞期(Stagnate phase) 细胞数量达到饱和密度后，如不及时进行传代，细胞就会停止增殖，进入停止期。此时细胞数持平，故也称平台期（Plateau phase）。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动。如不进行分离传代，细胞会因培养液中营养耗尽、代谢产物积聚、pH 下降等因素中毒，出现形态改变，贴壁细胞会脱落，严重的会发生死亡，因此，应及时传代。 培养细胞基本形态特点 培养细胞随贴附支持物形状不同而形态各异，最常见的是贴附于平面支持物细胞。在一般光镜下生存中的细胞是均质而透明的，结构不明显。细胞在生长期常有1-2 个核仁。 在细胞机能状态不良时，细胞轮廓会增强，反差增大。若胞质中时而出现颗粒、脱滴和腔泡等，表明细胞代谢不良。 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支持物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养基中悬浮生长。 （1）成纤维型细胞 在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称之为成纤维细胞。本型细胞由形态与体内成纤维细胞的形态相似而得名，细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长，细胞中央有卵园形核，胞质向外伸出2-3 厘米个长短不同的突起，除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间质起源的组织细胞常呈本类形态生长。 （2）上皮型细胞 此类型细胞在培养器皿支持物上生长具有扁平不规则多角形特征，细胞中央有园形核，细胞紧密相连单层膜样生长。起源于内、外胚层细胞如皮肤、表皮衍生物、消化管上皮等组织细胞培养时，皆呈上皮型形态生长。 （3）游走型细胞 本型细胞在支持物上散在生长，一般不连成片。细胞质经常伸出伪足或突起，呈活跃的游走或变形运动，速度快且不规则。此型细胞不很稳定，有时亦难和其它型细胞区别。在一定的条件下，由于细胞密度增大联成片后，可呈类似多角型或成纤维细腻包形态。常见于羊水细胞培养的早期。
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一.细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养，既包括微生物细胞的培养，也包ǘ?锖椭参锵赴?岸?参镒橹?呐嘌??细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。 细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。培养基按其物理状态可分为液体培养基和固体培养基。液体培养基用于大规模的工业生产以及生理代谢等基本理论的研究工作。液体培养基中加入一定的凝固剂(如琼脂)或固体培养物(如麸皮、大米等)便成为固体培养基。固体培养基为细胞的生长提供了一个营养及通气的表面，在这样一个营养表面上生产的细胞可形成单个菌落。因此，固体培养基在细胞的分离、鉴定、计数等方面起着相当重要的作用。从多细胞生物中分离所需要细胞和扩增获得的细胞以及对细胞进行体外改造，观察，必须首先解决细胞离体培养问题，同微生物细胞培养的难易相比，比较困难的是来自多细胞生物的单细胞培养，特别是动物细胞的培养。 1、细胞培养的一般条件 简言之，既细胞需要什么就提供什么，道理是如此，真正能做到这点尚需时日，人们至今对细胞的生命周期控制机理认识不足，癌细胞虽然也来自正常细胞，但至今不知道究竟为什么癌细胞很难停止已经启动的有害分裂，尽管如此，人们长期的研究结果表明，离体细胞培养需要的基本条件就是下列细胞生理条件。 (1)温度 温度过低时细胞生长缓慢甚至不生长。利用冷冻保藏细胞可保持细胞的原有分裂分化能力。温度过高导致细胞死亡。这主要是由酶和蛋白质所需要的最适温度决定的。多数生物大分子遇到高温后容易导致空间结构改变或者丧失（变性）。细胞膜遇到高温后容易变态。在自然界，即有耐高温的细胞，也有耐低温的细胞。在极端情况下生长的生物对付极端环境的机制研究在生物进化和农业、环保、发酵工业中意义重大。 (2)ph 过酸或过碱可导致细胞死亡。这主要与蛋白质的变性和细胞膜的结构受损有关。 (3)渗透压 细胞内外可溶于水的物质比例和种类决定细胞的膨胀与收缩程度，因为细胞膜是半透膜，只允许对自己有利的物质通过。同一物质在细胞内外的分布的数量不同，当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时，有可能导致细胞干瘪死亡，这些物质在细胞内过多时导致细胞过量吸水膨胀。细胞膜调节渗透压的能力是有限的。 (4)营养物 营养物和水一起，又叫细胞培养液，培养液中含有细胞增殖和生长所需要的各种物质。营养物包括：n 源、c源，这些物质与提供能量有关；无机盐、维生素、激素，这些物质与代谢调节控制有关。细胞培养液的设计一直是细胞离体培养技术的关键。理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的ph、渗透压、营养物、调节物质的全部需要。在干细胞分化研究与应用中，关键是找到一种使干细胞分化成为所需细胞和组织的营养液。相同的人干细胞，放在不同的营养液中分化培养出人的各种脏器，这个昔日的梦想已经开始成为现实。植物细胞的组织培养技术已经基本完善配套。名贵花卉、中草药、脱毒马铃薯、组织培养莲菜苗等植物细胞与组织培养技术的不断完善，特别是由于组织培养液的商品化已经被广大农民普遍接受。 (5)水 水是细胞需要数量最大的物质，不同的物种、不同部位、不同生长期的细胞含水量差别相当大。干旱植物细胞的含水量高达90%。水的需求量一般随同细胞培养液一起考虑。 (6)无菌条件 体外细胞培养仅仅是对所需的细胞进行培养，但环境中（如空气）有各种其他微生物，必须对所需细胞进行无杂菌的隔离培养。无菌条件是细胞离体培养最基本的条件。 (7)光 植物细胞和少数细菌需要利用光进行光合作用。 (8)气体 动物细胞需要不断供给氧气和排除二氧化碳，植物细胞与此相反。 2、动物细胞培养的特殊条件 在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。 (1)血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。有一天人们真正学会了配制和血清一样的培养液，那时血清才可被取代。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 (2)支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，塑料等作为支持物。 （3)气体交换：二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件，每一次开箱操作后的快速恢复对设备的要求可想而知有多难？由此决定了动物细胞离体培养设备要求高、投资大。 3、植物细胞培养的特殊条件 (1)光照：离体培养的植物细胞对光照条件不甚严格，因为细胞生长所需要的物质主要是靠培养基供给的。但光照不但与光合作用有关，而且与细胞分化有关，例如光周期可对性细胞分化和开花调控作用，所以以获得植株为目的的早期植物细胞培养过程中，光照条件特别重要。以植物细胞离体培养方式获得重要物质，如药物的过程，植物细胞大多是在反应器中悬浮培养。 (2)激素：植物细胞的分裂和生长特别需要植物激素的调节，促进生长的生长素和促进细胞分裂的分裂素是最基本的激素。植物细胞的分裂，生长，分化和个体生长周期都有相应的激素参与调节。和动物细胞相比，植物细胞离体培养对激素要求的原理已经了解，其应用技术也已相当成熟，已经有一套广泛作为商品使用的培养液。同时解决了植物细胞对水、营养物、激素、渗透压、酸碱度、微量元素等的需求。 4、微生物细胞培养的特殊条件 微生物多为单细胞生物，野生生存条件比较简单。所以微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多。其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂，因为严格厌氧需要维持二氧化碳等非氧的惰性气体浓度，而好氧微生物则只需要通过不断搅拌提供无菌氧气。微生物对培养条件要求不如动植物细胞那样苛刻，玉米浆、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等成为良好的微生物天然培养基。对于一些特殊微生物的营养条件要求，可以在这些天然培养基的基础上额外添加。 我只能回答你第一个问题，能力有限。
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发表于刚刚出版的《生物学》（Journal of Biology）的一项研究，挑战近代生物学中关于细胞生长的理论。研究人员表示，哺乳细胞并不会调控它们的大小，因而驳斥了科学家从70年代以来的假说。 研究人员Conlon 和Raff 做了一系列的试验，使用大鼠坐骨神经的Schwann细胞进行研究，建立哺乳细胞如何控制它们的大小并且决定于何时进行分裂。这种细胞决定大小、生长和分裂的过程，已经在酵母中普遍地研究了30年。当酵母和哺乳动物的细胞生长及分裂时，知道要维护恒定的细胞大小。 因此研究人员长久以来假设，酵母细胞可以确保分裂及生长时达到正确大小的机制，也适用于哺乳动物的细胞，但这项假说并未进行实验测试，直到这篇研究发表。 使用精确地测量方式，Conlon 和Raff 发现酵母和哺乳细胞生长上的重要区别。酵母细胞成指数地增长，在固定的时期大小加倍，但哺乳细胞则是线性地生长，每天增加的大小是一致的；这意味着，哺乳细胞增长的比率是相同的，但是酵母细胞中，较大的细胞生长得会比小的更为快速。 培养细胞生长过程：潜伏期→指数增生期→停滞期 一、潜伏期(latent phase)： 细胞接种后,先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期.此时,细胞质回缩, 胞体呈圆球形.然后细胞贴附于载体表面,称贴壁,悬浮期结束. 细胞贴壁速度与细胞种类, 培养基成分,载体的理化性质等密切相关。一般情况下，原代培养细胞贴壁速度慢,可达10-24 小时或更多, 而传代细胞系贴壁速度快, 通常10-30 分钟即可贴壁。细胞贴壁后还需经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期.原代培养细胞潜伏期，约24-96 小时或更长, 连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期短，仅需6-24 小时。 二、指数增生期(logarithmic growth phase) 这是细胞增殖最旺盛的阶段，分裂相细胞增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长是否旺盛的一个重要标志。通常以细胞分裂相指数（Mitotic index, MI）表示，即细胞群中每1000 个细胞中的分裂相数。一般细胞的分裂指数介于0.1%-0.5%，原 代细胞分裂指数较低，而连续细胞和肿瘤细胞分裂相指数可高达3％－5％。 指数增生期的细胞是细胞活力最好时期，是进行各种实验最佳时期，也是冻存细胞的最好时机。在接种细胞数量适宜情况下，指数增生期持续3－5 天后，随着细胞数量不断增多、生长空间减少，最后细胞相互接触汇合成片。正常细胞相互接触后能抑制细胞运动，这种现象称接触抑制现象(contact inhibition)。而恶性肿瘤细胞无接触抑制现象，能继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，使细胞发生堆积（piled up）。细胞接触汇合成片后，虽然发生接触抑制，但只要营养充分，细胞仍能进行增殖分裂，因此细胞数仍然在增多。但是，当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养枯竭和代谢产物的影响，导致细胞分裂停止，这种现象称密度抑制现象（Density Inhibition）。 三、停滞期(Stagnate phase) 细胞数量达到饱和密度后，如不及时进行传代，细胞就会停止增殖，进入停止期。此时细胞数持平，故也称平台期（Plateau phase）。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动。如不进行分离传代，细胞会因培养液中营养耗尽、代谢产物积聚、pH 下降等因素中毒，出现形态改变，贴壁细胞会脱落，严重的会发生死亡，因此，应及时传代。 培养细胞基本形态特点 培养细胞随贴附支持物形状不同而形态各异，最常见的是贴附于平面支持物细胞。在一般光镜下生存中的细胞是均质而透明的，结构不明显。细胞在生长期常有1-2 个核仁。 在细胞机能状态不良时，细胞轮廓会增强，反差增大。若胞质中时而出现颗粒、脱滴和腔泡等，表明细胞代谢不良。 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支持物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养基中悬浮生长。 （1）成纤维型细胞 在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称之为成纤维细胞。本型细胞由形态与体内成纤维细胞的形态相似而得名，细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长，细胞中央有卵园形核，胞质向外伸出2-3 厘米个长短不同的突起，除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间质起源的组织细胞常呈本类形态生长。 （2）上皮型细胞 此类型细胞在培养器皿支持物上生长具有扁平不规则多角形特征，细胞中央有园形核，细胞紧密相连单层膜样生长。起源于内、外胚层细胞如皮肤、表皮衍生物、消化管上皮等组织细胞培养时，皆呈上皮型形态生长。 （3）游走型细胞 本型细胞在支持物上散在生长，一般不连成片。细胞质经常伸出伪足或突起，呈活跃的游走或变形运动，速度快且不规则。此型细胞不很稳定，有时亦难和其它型细胞区别。在一定的条件下，由于细胞密度增大联成片后，可呈类似多角型或成纤维细腻包形态。常见于羊水细胞培养的早期。
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FGF-酸性成纤维细胞生长因子是一种多功能强力细胞因子，对促进成纤维细胞的代谢和胶原蛋白的形成发挥着重要功能。aFGF 能促进皮肤组织的生长繁殖，它通过与细胞表面特异受体结合，调控皮肤上皮，内皮和基质细胞的分裂、繁殖和生长分化，促进细胞代谢，增强氧化作用；能促进与皮肤损伤有关细胞的迅速生长繁殖，并调节细胞间基质的合成、分泌及分解；能促进角质层细胞的再生，加速皮肤角质层和基质层的修复，促进人体皮肤细胞的生长；能增强皮肤细胞的蛋白质的合成和细胞代谢，具有延缓皮肤细胞衰老、促进表皮细胞的修复和生长作用，使皮肤光滑丰润。aFGF其PH值为5.8，与人体皮肤的酸碱度一致，能有效保持皮肤的微酸性环境，防止细菌生成。与bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）和hEGF（表皮细胞生长因子）相比，后者长期使用会造成皮肤发黄，并且修复深度有限。aFGF功能强大，具有深层修复作用，再现代临床医学及外科手术和美容手术中发挥着不可估量的巨大作用。产品功效1、 美容整形手术后（纹眉、漂唇、隆鼻、洗眉、割眼线）的新鲜创面修复。2、 烧伤、刮伤、烫伤、摔伤等新鲜创面的快速修复。3、 红血丝、祛斑和换肤后受损皮肤的修复。4、 受日光照射和滥用低值化妆品及环境污染引起的皮肤发红、褪皮、变薄、敏感等皮肤症状。5、 皮肤早衰、萎黄、皱纹、松弛等现象。6、 皮肤粗糙，气候变化使皮肤干燥、脱屑、瘙痒等。7、 皮肤灰黄、晦暗无光等。8、 光子嫩肤后受损皮肤的快速完美修复。9、 祛痘、祛粉刺、祛黑头、酒糟鼻、嫩滑肌肤。10、 任何肤质的日常护理、保湿、化妆品的完美替代品。使用方法:★将稀释因子（2ml)注射入冻干粉，按疗程指示使用。★修复原液直接适量涂于患处或面部，按疗程指示使用。产品作用原理1、防皱祛斑作用aFGF能促进表皮组织中多种细胞生长，加强细胞合成与分泌胶原物质（如HA、糖蛋白），可滋润皮肤及赋予衰老细胞新的活力，起到防止和祛除皱纹的效果。主要通过三个途径实现：（1）皮肤更新：aFGF能促使皮肤表皮细胞再生，新生细胞增多，不断更新皮肤表层老化细胞，使细胞大小、形态、功能恢复正常，保持皮肤旺盛的新陈代谢。（2）保持皮肤弹性：aFGF促使真皮层的成纤维细胞分裂增殖，分泌胶原纤维，网状纤维和弹性纤维，保持皮肤弹性和厚度，同时调节基质中胶原酶、透明质酸、硫酸软骨素，肝素的含量和活性，平衡皮肤水分和电解质代谢，改善萎缩细胞的缺水状态，使皮肤滋润光泽。（3）补充皮肤营养：aFGF促进皮肤血管新生，使皮肤萎缩，堵塞或消失的毛细血管内皮细胞新生，皮肤血管网增多，血流增加，皮肤营养充足，从而使皮肤白里透红，充满生机、活力。2、祛色斑作用对较黑肤色的皮肤和各类皮肤色素沉着，可通过aFGF促进新生细胞的生成来替代原来细胞，以降低皮肤中黑色素和有色细胞的含量，快速代谢沉积在皮肤内的黑色素，有效阻止黑色素的形成，从而发挥美白祛斑作用。3、修复作用aFGF 能主动与伤口附近细胞膜上的特异性受体相结合，从而激活蛋白酶，加快蛋白质的合成，促合皮肤和粘膜创面愈合并减少疤痕收缩和皮肤的畸形增生，快速高效修复创伤，如换肤后皮肤薄嫩，潮红色快速消退，除暗疮后的创面快速愈合，点斑、祛痣、祛皱纹、洗眉整形手术伤口的愈合。增强白细胞的吞噬功能，提高B细胞、T 细胞、NK细胞的免疫活性，控制局部炎症。并且对抑制粉刺生长和保护皮肤免受机械、化学、气候等的损伤方面极具功效。4、嫩白防晒作用aFGF涂于皮肤表面，可减少有害紫外线波段对皮肤细胞的伤害，使皮肤光滑嫩白。疗敏退红复合疗程注意事项专家提醒您：1、在疗程内，不得使用任何功效型化妆品；2、无过敏现象者，直接进行恢复期治疗疗程；3、红血丝治疗时，针对症状严重者，建议配合物理疗法。专家解惑：肌肤过敏是肌肤对外界刺激的应急反应，aFGF冻干粉含有阻断过敏反应链的酶，能减轻肌肤过敏反应，同时含有的细胞生长因子能快速重建角质层，增厚角质层，保护肌肤和阻隔有害刺激，提高肌肤免疫力。aFGF冻干粉和原液属于高效能产品，不含各种无用物质，不会额外增加肌肤负担。成纤维细胞生长因子激活真皮层成纤维细胞，促使角化生长因子的合成，从而使损伤的角质层得以重建。提高肌肤抵抗力，解决肌肤易敏感问题。本产品含有的血管抑制因子，能收缩扩张的毛细血管，使红血丝萎缩消失，退红效果显著。疗敏退红复合疗程适应对象：接触性过敏症肌肤，如化妆品过敏、花粉过敏，剥脱后的皮肤敏感，光子嫩肤后的皮肤敏感，剥脱性红血丝、易敏感肌肤。外在表现：皮肤红肿、痒、发热、起小疙瘩；用手触摸皮下有小硬点或硬块，严重的会流脓水。面部毛细血管扩张、发红、肤色不均；角 质层薄，易敏感。疗程设计：治疗期→恢复期→巩固期治疗周期：脱敏治疗周期36天；红血丝治疗：1-2个月护理方法：（1）治疗期护理方法：治疗前停用各种护肤品，在美容院对皮肤进行冷敷（或冷喷），用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）导入（3~5档）3分钟，症状严重者直接用棉签擦抹，每天一次，一次一支，通常5支为一疗程，特别严重者需做两个疗程。（2）恢复期护理方法：红肿完全消退后，在美容院使用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）作弱档低温导入，每周两次，一次1ml，通常8支为一疗程；每天早晚使用aFGF修复原液修复肌肤，每次1ml。（3）巩固期护理方法：使用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）在美容院作导入，每周两次，一次1ml，通常5支为一疗程；同时在家配合使用aFGF修复原液，每天早晚各一次，每次1ml。美容效果及作用原理：整体美容效果：消除过敏症状，提高肌肤抵抗力，改变肌肤易过敏状况，修复巩固，从根本上解决肌肤过敏现象。＊第一疗程：彻底去除过敏源，中止过敏反应；＊第二疗程：收缩扩张的毛细血管，使红血丝萎缩消失，缓减肌肤过敏及红血丝症状；＊第三疗程：快速重建角质层，恢复肌肤天然屏障，提高肌肤耐受力，恢复肌肤健康态。斑后修复疗程注意事项专家提醒您：（1）祛斑后肌肤有过敏现象时，先用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）进行高效脱敏疗程，（2）初次使用本产品时，首先使用aFGF修复原液进行前期保湿及修复调整肌肤，约3天左右，第4天起开始使用aFGF冻干粉作导入治疗。（3）在修复过程中，不得使用任何功效型化妆品.专家解惑：对剥脱型或隐性脱皮进行祛斑治疗后，常导致肌肤表皮受损，角质层变薄，肌肤代谢不正常，易过敏且因防御能力降低，从而导致肌肤色斑易反弹，形成恶性循环最终导致严重的肌肤问题。aFGF能刺激成纤维细胞分裂增殖，激活细胞内分泌，合成胶原蛋白等细胞间质液，快速向表皮推进，重建新生的角质层；加速排泄，对祛斑产品残留在皮肤中的重金属等有害物清除排出，消除肌肤中毒症状。斑后修复疗程适应对象：祛斑换肤后肌肤外在表现：肌肤干燥，发痒，角质层薄，色斑反弹。疗程设计：修复期→巩固期治疗周期：约20天护理方法：（1）修复期护理方法：治疗前停用各种美白祛斑产品，直接用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）导入（3~5档）5分钟，每三天一次，一次一支，通常6次为一疗程；（2）巩固期护理方法：第四周起，用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）导入（3~5档）5分钟，每周2次，一次1ml，顾客在家配合用aFGF修复原液均匀涂于面部，每天早晚各1ml。美容效果及作用机理：整体美容效果：重建角质层，修复受损肌肤，清除肌肤残余毒素。＊第一疗程：快速修复因祛斑引起的受损肌肤，重建肌肤角质层；＊第二疗程：抑制色素反弹，清除肌肤残余毒素，改善肤质状况。衰老性损伤修复疗程注意事项专家提醒您：强效修复期内配合相应的物理疗法辅助治疗，效果更佳。专家解惑：肌肤衰老是由于肌肤细胞大多处于不活跃状态，分泌合成胶原蛋白、弹力蛋白等特质变慢，不能防止水分流失和补充修复变性、松弛的胶原纤维、弹力纤维，出现衰老症状。 aFGF激活衰老细胞，恢复皮肤生理功能，重建微循环，提供肌肤细胞营养，加速细胞间质物的分泌的合成，增强锁水功能，锁住水份；激活细胞分泌合成各种纤维组织，恢复肌肤弹性，消退皱纹。衰老性损伤修复疗程适用对象：衰老性肌肤外在表现：皱纹，干燥，松弛，肤色暗黄。疗程设计：强效修复期→活化调整期→巩固养护期治疗周期：约两个月护理方法：（1）强效修复期护理方法：直接用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）导入（3~5档）5分钟，每3天一次，一次1支，一次1ml，通常6次为一疗程；顾客在家配合用aFGF修复原液均匀涂于面部，每天早晚各1ml。（2）活化调整期护理方法：用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）导入（3~5档）5分钟，每周一次，一次1支，通常5次为一疗程；顾客在家配合用aFGF修复原液均匀涂于面部，每天早晚各1ml。（3）巩固养护期护理方法：直接用aFGF修复原液均匀涂于面部，每天早晚各1ml，每次1ml；连续使用2-3个月。美容效果及作用原理：整体美容效果：逆转皮肤生理状态，细化皱纹，皮肤饱满，不干燥，有弹性。＊第一疗程：修复断裂的胶原纤维，深度激活衰老细胞和皮肤干细胞，逆转皮肤生理状态。＊第二疗程：改善微循环，激活肌肤细胞内分泌，加强细胞间质物的合成与分泌（如HA、糖蛋白、胶原蛋白和弹力纤维等），消减皱纹，改善肌肤弹性；＊第三疗程：补充肌肤营养和能量，平衡皮肤水分和电解质代谢，改善萎缩细胞的缺水状态，使皮肤滋润光泽。特效除皱疗程注意事项专家提醒您：微创操作方法以专业人员指导为准。专家解惑：皱纹分为真性皱纹和假性皱纹，只有在面部有表情时才能见到的皱纹为假性皱纹，面部无表情时也能看到的皱纹，称为真性皱纹。真性皱纹本质上是纤维蛋白变形或断裂所致。 aFGF分子量很小，能够透皮吸收。它作用于成纤维细胞，促进其在细胞内合成胶原蛋白、弹力蛋白并分泌到胞外形成纤维蛋白，丰富皮下立体纤维，修复断裂的纤维，达到淡化直至祛除皱纹的效果。特效除皱疗程适用对象：皱纹肌肤外在表现：肌肤干燥，面部皱纹。疗程设计：强效修复期→修护活化期→巩固养护期治疗周期：约30-45天护理方法：（1）强效修复期护理方法：在美容院进行微创法祛除真性皱纹，直接用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）直接滴于或涂抹于微创面处，每天1次，每次1支，每次涂抹4遍；直至创面脱痂后继续使用1-2次，顾客在家配合用aFGF修复原液均匀涂于面部皱纹处，每天早晚各1ml。（2）修护活化期护理方法：用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）导入（3~5档）5分钟，每周1-2次，用量视皱纹面积而定，通常两周为一疗程；顾客在家配合用aFGF修复原液均匀涂于面部，每天早晚各1ml；连续使用1-2个月。（3）巩固修护期护理方法：直接用aFGF修复原液均匀涂于面部，每天早晚各一次，每次1ml，连续使用1-2个月。美容效果及作用原理：整体美容效果：活化抗衰老系统，消减皱纹，改善肌肤弹性。＊第一疗程：借助物理方式在皱纹处制造微创面，通过aFGF修复创面，在愈合过程中扶平皱纹；＊第二疗程：强力活化衰老细胞和皮肤干细胞，逆转皮肤生理状态，加强肌肤细胞内分泌，进细胞间质物的合成与分泌（如Ha、糖蛋白、胶原蛋白和弹力纤维等），消减皱纹，改善肌肤弹性；＊第三疗程：补充肌肤营养和能量，平衡皮肤水分和电解质代谢，改善萎缩细胞的缺水状态，使皮肤滋润光泽。调色美颜疗程注意事项专家提醒您：本疗程适合用于治疗因外环境损伤引起的各类色素沉着性皮肤。专家解惑：健康状况不佳，紧张、压力常影响到人体消化系统异常，肝功能和内分泌失常，加上紫外线诱导，化妆品使用不正确等，促使皮下黑色素细胞异常活跃，从而导致黑色素沉着而形成黑斑。黑色素形成与通常所讲的“三酶一素”关系密切。现在流行的美白成份的作用方式不外乎以下三种：一是通过抑制“三酶一素”的活性，减少黑色素的形成；二是促进表皮脱落，加快已形成黑色素的排泄；三是通过抗生物氧化，将氧化性的深色素还原成为还原性的浅色素，从而达到淡斑美白的功效。而目前市场上的大部分祛斑产品还是以通过剥脱或促进表皮脱落，加快已形成黑色素的排泄，来达到祛斑美白之功效，这类产品对皮肤的损伤较严重，过敏率高，并且较强的依赖性，一旦停用反弹率相当高；也有相当部分产品是通过抑制“三酶一素”的活性，减少黑色素的形成来达到美白淡斑之功效，如：熊果苷、曲酸衍生物等，此类产品有较强的副作用和较高的过敏率，并且祛斑效果较为缓慢，通常只能达到淡斑美白功效；而aFGF产品主要是通过清除自由基、抗生物氧化，将氧化性的深色素还原成为还原性的浅色素，并结合酪氨酸酶抑制剂激活调节基因，抑制“三酶一素”的活性、减少黑色素生成，同时生物活性因子来改善皮肤微循环、加速新陈代谢，从而加快沉着黑色素的排解，从三种途径入手，综合调理，标本兼治，从而达到调色美颜之功效，令皮肤红润、美白、健康。调色美颜疗程适用对象：暗黄、色素沉着、色斑性皮肤外在表现：肤色晦暗，色斑沉着疗程设计：治疗期→巩固期治疗周期：约1-2个月护理方法：（1）治疗期护理方法：在美容院使用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）做超导5分钟，每周2次，每次1ml，通常6次为一个疗程，顾客在家配合用aFGF修复原液均匀涂于面部，每天早晚各1ml。（2）巩固期护理方法：在美容院使用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）做超导5分钟，每周1次，每次1ml，顾客在家配合使用aFGF修复原液直接涂于面部，每次1ml，直至吸收，早晚使用，连续使用2-3个月。美容效果及作用原理：整体美容效果：调整肤色，恢复健康光泽，淡化色素，强效美白。＊第一疗程：通过aFGF抑制“三酶一素”活性，平衡色素代谢，从根本上淡化色素，嫩白肌肤；＊第二疗程：改善皮肤微循环、加速新陈代谢，从而加快沉着黑色素的排解，综合调理，抑制色斑反弹，令皮肤红润、美白、健康。暗疮护理疗程注意事项专家提醒您：（1）当面部皮肤既有暗疮，同时又有过敏现象时，先用aFGF冻干粉进行高效脱敏疗程。（2）因内因引起的暗疮，配合内调，效果更加理想。专家解惑：油性肌肤皮脂腺代谢异常旺盛，油脂分泌过度，若不注意清洁与个人卫生，常常会成为大肠杆菌如金黄葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、粉刺棒状杆菌之温床，极易引起发炎或感染而导致形成痤疮、粉刺，因此做好控油、镇静消炎工作，才能使让肌肤再生光滑柔润。aFGF能调整肌肤皮脂腺的代谢，平衡各种物质的分泌合成，改变肌肤过油状况，同时能加速暗疮创面愈合，避免暗疮凹凸洞和色素印的形成。暗疮护理疗程适用对象：油性肌肤、暗疮性皮肤外在表现：毛孔粗大、暗疮、粉刺疗程设计：针清治疗期→修复巩固期治疗周期：约1个月护理方法：（1）针清治疗期护理方法：在美容院使用暗疮针对粉刺黑头进行针清（务必清除彻底），针清后及时用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）直接滴于或涂抹于暗疮微创面处，每遍1ml每次3-4遍；顾客在家配合用aFGF修复原液均匀涂于面部暗疮部位，每天早晚各1ml；（2）修复巩固期护理方法：用aFGF修复原液直接涂抹全脸，每次1ml，直至吸收，早晚使用。美容效果及作用原理：整体美容效果：平疮去印，平衡油脂分泌，收缩毛孔，改变肌肤油性状况。＊第一疗程：通过aFGF促进暗疮创面的愈合，平疮去印，避免凹凸洞的形成；＊第二疗程：调整肌肤皮脂腺的代谢，平衡油脂分泌、调节肌肤PH值，收缩毛孔，改善肌肤油性状况，调整色素，避免色素印形成。创伤修复疗程注意事项专家提醒您：（1）常规清创后，建议用生理盐水冲洗创面后再使用本品；（2）与抗生素配合使用，不影响疗程；（3）根据创面程度，冻干粉稀释浓度做适当调整，效果更佳。专家解惑：当人体肌肤受到外界刺激如创伤等，人体细胞自身会自主分泌内源性的细胞生长因子来促进伤口愈合，但随着年龄的增加，人体自身合成分泌的内源性细胞因子含量极其微量，远远达不到创面快速愈合所需的药量。因此，通过使用aFGF细胞因子外用制剂，能瞬时提高伤口周围的细胞因子局部作用浓度，从而能加速细胞的分裂增殖，主动快速地修复创面，并减少疤痕形成，避免色素沉着，同时能促进血管、神经末梢、汗腺和毛囊的再生，提高创伤修复质量。创伤修复疗程适用对象：创面修复外在表现：三纹、漂唇、点斑、祛痣、双眼皮等整形后伤口；光子嫩肤、削磨等物理疗法术后的伤口。疗程设计：特效修复期→修复巩固期治疗周期：视物理疗法周期而定护理方法：（1）特效治疗期护理方法：在美容院进行三纹、漂唇、点斑、祛痣、双眼皮等整形术以及光子嫩肤、削磨等物理方法后，用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）直接滴于或涂抹于微创面处，每天1 -2次，每次3-4遍，每遍1ml，脱痂后继续使用1-2次；顾客在家配合用aFG修复原液均匀涂于面部创伤部位，每天早晚各1ml。（2）修复巩固期护理方法：用aFGF修复原液直接均匀涂抹，每天2次，每次1ml直至吸收，早晚使用。美容效果及作用原理：整体美容效果：加速创面愈合，不留印痕。＊第一疗程：主动促进创面的愈合，修复受损的皮肤附属器官，提高愈合质量，避免疤痕的形成；＊第二疗程：调整色素，避免色素印形成，补充营养和水分，令肌肤恢复健康状态。眼部修护疗程注意事项专家提醒您：（1）第一次使用时，配合适度去角质；（2）个别人使用时，眼部肌肤松驰者，可能会出现眼袋短暂加重，此属正常现象，如继续使用原液，以上症状会在3天左右自然消失，不会影响治疗效果；（3）第一次使用时，个别人会出现轻度不适感，属正常现象。专家解惑：眼周肌肤是最娇嫩的，随着年龄增长及外界因素刺激，新陈代谢减缓，眼部组织出现退行性衰变，皮下组织萎缩，产生眼皱纹，眼袋，黑眼圈或眼部浮肿等症状，aFGF原液针对眼皱形成原因，为眼部皮肤建立一层天然保湿屏障，并提供充足养分养护薄弱的眼周皮肤，加强眼部淋巴、血液循环、抚平细纹，防止皱纹的产生，令眼部焕发动人光彩。眼部修护疗程适用对象：眼部肌肤外在表现：黑眼圈、眼袋，眼部肌肤松垂及假性皱纹。疗程设计：修护前期→修护后期治疗周期：约1个月。护理方法：（1）修护前期护理方法：在美容院洁面后，使用aFGF冻干粉（溶入稀释因子）导入（3-5档）3分钟，通常3天1次，每次一支，6次为一疗程；同时顾客在家配合用aFGF修复原液均匀 涂于眼部肌肤，每天早晚各1ml。（2）修护后期护理方法：用重组人细胞生长肽原液直接涂抹，每天2次，每次1ml直至吸收，早晚使用。美容效果及作用原理：祛除黑眼圈，消除眼袋，淡化眼部皱纹，紧致肌肤。＊第一疗程：改善微循环，促进细胞内分泌和旁分泌，快速补充细胞间质物如胶原蛋白、弹力纤维等，补充细胞营养和水分，抚平眼部细纹，同时还能改善黑眼圈及消除眼部浮肿。＊第二疗程：巩固美容效果，防止皱纹的产生，消减眼袋，令眼部焕发动人光彩。
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表于刚刚出版的《生物学》（Journal of Biology）的一项研究，挑战近代生物学中关于细胞生长的理论。研究人员表示，哺乳细胞并不会调控它们的大小，因而驳斥了科学家从70年代以来的假说。 研究人员Conlon 和Raff 做了一系列的试验，使用大鼠坐骨神经的Schwann细胞进行研究，建立哺乳细胞如何控制它们的大小并且决定于何时进行分裂。这种细胞决定大小、生长和分裂的过程，已经在酵母中普遍地研究了30年。当酵母和哺乳动物的细胞生长及分裂时，知道要维护恒定的细胞大小。 因此研究人员长久以来假设，酵母细胞可以确保分裂及生长时达到正确大小的机制，也适用于哺乳动物的细胞，但这项假说并未进行实验测试，直到这篇研究发表。 使用精确地测量方式，Conlon 和Raff 发现酵母和哺乳细胞生长上的重要区别。酵母细胞成指数地增长，在固定的时期大小加倍，但哺乳细胞则是线性地生长，每天增加的大小是一致的；这意味着，哺乳细胞增长的比率是相同的，但是酵母细胞中，较大的细胞生长得会比小的更为快速。 培养细胞生长过程：潜伏期→指数增生期→停滞期 一、潜伏期(latent phase)： 细胞接种后,先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期.此时,细胞质回缩, 胞体呈圆球形.然后细胞贴附于载体表面,称贴壁,悬浮期结束. 细胞贴壁速度与细胞种类, 培养基成分,载体的理化性质等密切相关。一般情况下，原代培养细胞贴壁速度慢,可达10-24 小时或更多, 而传代细胞系贴壁速度快, 通常10-30 分钟即可贴壁。细胞贴壁后还需经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期.原代培养细胞潜伏期，约24-96 小时或更长, 连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期短，仅需6-24 小时。 二、指数增生期(logarithmic growth phase) 这是细胞增殖最旺盛的阶段，分裂相细胞增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长是否旺盛的一个重要标志。通常以细胞分裂相指数（Mitotic index, MI）表示，即细胞群中每1000 个细胞中的分裂相数。一般细胞的分裂指数介于0.1%-0.5%，原 代细胞分裂指数较低，而连续细胞和肿瘤细胞分裂相指数可高达3％－5％。 指数增生期的细胞是细胞活力最好时期，是进行各种实验最佳时期，也是冻存细胞的最好时机。在接种细胞数量适宜情况下，指数增生期持续3－5 天后，随着细胞数量不断增多、生长空间减少，最后细胞相互接触汇合成片。正常细胞相互接触后能抑制细胞运动，这种现象称接触抑制现象(contact inhibition)。而恶性肿瘤细胞无接触抑制现象，能继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，使细胞发生堆积（piled
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表于刚刚出版的《生物学》（Journal of Biology）的一项研究，挑战近代生物学中关于细胞生长的理论。研究人员表示，哺乳细胞并不会调控它们的大小，因而驳斥了科学家从70年代以来的假说。 研究人员Conlon 和Raff 做了一系列的试验，使用大鼠坐骨神经的Schwann细胞进行研究，建立哺乳细胞如何控制它们的大小并且决定于何时进行分裂。这种细胞决定大小、生长和分裂的过程，已经在酵母中普遍地研究了30年。当酵母和哺乳动物的细胞生长及分裂时，知道要维护恒定的细胞大小。 因此研究人员长久以来假设，酵母细胞可以确保分裂及生长时达到正确大小的机制，也适用于哺乳动物的细胞，但这项假说并未进行实验测试，直到这篇研究发表。 使用精确地测量方式，Conlon 和Raff 发现酵母和哺乳细胞生长上的重要区别。酵母细胞成指数地增长，在固定的时期大小加倍，但哺乳细胞则是线性地生长，每天增加的大小是一致的；这意味着，哺乳细胞增长的比率是相同的，但是酵母细胞中，较大的细胞生长得会比小的更为快速。 培养细胞生长过程：潜伏期→指数增生期→停滞期 一、潜伏期(latent phase)： 细胞接种后,先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期.此时,细胞质回缩, 胞体呈圆球形.然后细胞贴附于载体表面,称贴壁,悬浮期结束. 细胞贴壁速度与细胞种类, 培养基成分,载体的理化性质等密切相关。一般情况下，原代培养细胞贴壁速度慢,可达10-24 小时或更多, 而传代细胞系贴壁速度快, 通常10-30 分钟即可贴壁。细胞贴壁后还需经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期.原代培养细胞潜伏期，约24-96 小时或更长, 连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期短，仅需6-24 小时。 二、指数增生期(logarithmic growth phase) 这是细胞增殖最旺盛的阶段，分裂相细胞增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长是否旺盛的一个重要标志。通常以细胞分裂相指数（Mitotic index, MI）表示，即细胞群中每1000 个细胞中的分裂相数。一般细胞的分裂指数介于0.1%-0.5%，原 代细胞分裂指数较低，而连续细胞和肿瘤细胞分裂相指数可高达3％－5％。 指数增生期的细胞是细胞活力最好时期，是进行各种实验最佳时期，也是冻存细胞的最好时机。在接种细胞数量适宜情况下，指数增生期持续3－5 天后，随着细胞数量不断增多、生长空间减少，最后细胞相互接触汇合成片。正常细胞相互接触后能抑制细胞运动，这种现象称接触抑制现象(contact inhibition)。而恶性肿瘤细胞无接触抑制现象，能继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，使细胞发生堆积（piled up）。细胞接触汇合成片后，虽然发生接触抑制，但只要营养充分，细胞仍能进行增殖分裂，因此细胞数仍然在增多。但是，当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养枯竭和代谢产物的影响，导致细胞分裂停止，这种现象称密度抑制现象（Density Inhibition）。 三、停滞期(Stagnate phase) 细胞数量达到饱和密度后，如不及时进行传代，细胞就会停止增殖，进入停止期。此时细胞数持平，故也称平台期（Plateau phase）。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动。如不进行分离传代，细胞会因培养液中营养耗尽、代谢产物积聚、pH 下降等因素中毒，出现形态改变，贴壁细胞会脱落，严重的会发生死亡，因此，应及时传代。 培养细胞基本形态特点 培养细胞随贴附支持物形状不同而形态各异，最常见的是贴附于平面支持物细胞。在一般光镜下生存中的细胞是均质而透明的，结构不明显。细胞在生长期常有1-2 个核仁。 在细胞机能状态不良时，细胞轮廓会增强，反差增大。若胞质中时而出现颗粒、脱滴和腔泡等，表明细胞代谢不良。 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支持物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养基中悬浮生长。 （1）成纤维型细胞 在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称之为成纤维细胞。本型细胞由形态与体内成纤维细胞的形态相似而得名，细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长，细胞中央有卵园形核，胞质向外伸出2-3 厘米个长短不同的突起，除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间质起源的组织细胞常呈本类形态生长。 （2）上皮型细胞 此类型细胞在培养器皿支持物上生长具有扁平不规则多角形特征，细胞中央有园形核，细胞紧密相连单层膜样生长。起源于内、外胚层细胞如皮肤、表皮衍生物、消化管上皮等组织细胞培养时，皆呈上皮型形态生长。 （3）游走型细胞 本型细胞在支持物上散在生长，一般不连成片。细胞质经常伸出伪足或突起，呈活跃的游走或变形运动，速度快且不规则。此型细胞不很稳定，有时亦难和其它型细胞区别。在一定的条件下，由于细胞密度增大联成片后，可呈类似多角型或成纤维细腻包形态。常见于羊水细胞培养的早期。
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