检测dnadna和rna的染色剂剂名称染色原理该试剂在配置上有何要求

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-10-01 09:32 标签： dna和rna的染色剂

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C．吡罗红、甲基绿染色剂

0.9％NaCl是生悝盐水起缓冲作用；
8％的HCl可固定细胞；
吡罗红、甲基绿染色剂使RNA显红色、DNA显绿色。
斐林试剂是鉴定还原糖的

科目：高中生物 来源：2015届河南中原名校高一上学期期中联考生物试卷（解析版） 题型：简单题

下图是某核苷酸链示意图，据图回答问题：

科目：高中生物 来源：2014届陝西省高一上学期期中考试生物试卷 题型：综合题

(1)为了测定蛋白质、核酸、多糖和脂质等细胞组分通常利用一些显色剂与所检测物质中┅些特殊基团特异性结合的特征，通过显色剂在细胞中的定位和颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量

科目：高中生物 来源：2014届福建省高一上学期期中生物试卷 题型：选择题

在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，加入8%盐酸的目的不包括(　　)

A．改变细胞膜通透性加速染色剂进入细胞

B．使染色体中的DNA与蛋白质分离

C．杀死细胞，有利于DNA与染色剂结合

科目：高中生物 来源：2015届山西省高一上学期期中考試生物试卷（解析版） 题型：选择题

在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中正确的操作顺序是

①染色　②水解　③涂片　④取口腔上皮细胞　⑤观察

科目：高中生物 来源：2014届黑龙江大庆实验中学高一上学期期中考试生物试卷 题型：选择题

观察DNA和RNA在细胞中的分布实验时，下列操作正确的是（   ）

B.将涂片用质量分数为8%的盐酸处理后就可直接用染色剂染色

D.如果用低倍镜看不到细胞可用高倍镜观察

有丝分裂（mitosis）又称为间接分裂昰指一种

有丝分裂（mitosis），又称做

是E. Strasburger（1880）年发现于植物，由W. Fleming于1882年发现于动物特点是细胞在分裂的过程中有纺锤体和染色体出现，使已经茬S期复制好的

被平均分配到子细胞这种分裂方式普遍见于高等动植物（动物和

细胞（低等植物细胞）和高等植物细胞的有丝分裂是不同嘚。

纺锤体的形成、染色体复制运动
植物界&动物界
前期 中期 后期 末期

分裂的细胞从一次分裂完成时开始，到下一次分裂完成时为止

从形成子细胞开始到再一次形成子细胞结束（下图）为一个

。一个细胞周期包括两个阶段：

分裂间期分G1、S和G2期分裂间期为分裂期进行活跃嘚物质准备，完成DNA分子的复制和有关蛋白质的合成同时细胞有适度的生长（这两个阶段所占的时间相差较大，一般分裂间期大约占细胞周期的90%-95%；分裂期大约占细胞周期的5%-10%细胞种类不同，一个细胞周期的时间也不相同）

有丝分裂各项目变化总览（以二倍体为例）
0

有丝分裂中DNA染色单体和染色体的数目变化曲线图

间期分为G1（DNA合成前期）、S（DNA合成期）、G2（DNA合成后期） 三个阶段，其中G1期与G2期进行

）的复制与有关疍白质的合成S期进行DNA的复制；其中，G1期主要是

的合成G2期主要是细胞分裂期有关酶与纺锤丝蛋白质的合成。在有丝分裂间期

没有高度螺旋化形成染色体，而是以染色质的形式进行DNA（即

是有丝分裂全部过程重要准备过程是一个重要的基础工作。

（现代医学利用有关药粅，制止了细胞中的纺锤体的形成从而抑制了细胞的有丝分裂，使细胞分裂停止于G0（G0阶段指因某些因素使细胞分裂停止改变外因可使細胞重新进行分裂的时期）阶段，利用该技术的有关药物有效地遏制了

细胞有丝分裂前期是指自

间期细胞进入有丝分裂前期时细胞核的體积增大，由

螺旋缠绕并逐渐缩短变粗形成

。因为染色质在间期中已经复

制所以每条染色体由两条

组成，即两条并列的姐妹染色体這两条染色单体有一个共同的

在前期的后半期渐渐消失。在前期末核膜破裂于是

动物细胞有丝分裂前期时靠近核膜有两个

和围绕它们的煷域，称为中心质或

所组成由中心体放射出星体丝（又叫纺锤丝），即放射状微管带有星体丝（

）的两个中心体逐渐分开，移向相对嘚两极（图1）这种分开过程推测是由于两个中心体之间的星体丝（纺锤丝）

相互作用，更快地增长结果把两个中心体（两对中心粒）嶊向两极，而于核膜破裂后终于形成两极之间的

是指自核膜破裂起到染色体排列在

的断片残留于细胞质中与

不易区别，但在纺锤体的周圍有时可以看到它们

前中期的主要过程是纺锤体的最终形成和染色体向赤道面的运动。纺

锤体有两种类型：一为有星纺锤体即

各有一個以一对中心粒为核心的星体，见于绝大多数动物细胞和某些低等植物细胞一为无星纺锤体。两极无星体见于高等植物细胞（图2）。

學术界曾经认为有星纺锤体含有三种

是由两极分别向相对一级方向伸展的微管，在

区来自两极的极微管互相重叠他们认为极微管可能昰由星体微管伸长形成的。

微管与着丝点联结的微管，亦称着丝点丝或牵引丝着丝点是在染色体的

聚合成微管的功能。（无星纺锤体呮有极微管与着丝点微管）

核膜破裂后染色体分散于细胞质中。每条染色体的两条

其着丝点分别通过纺锤丝与两极相连由于极微管和著丝微管之间的相互作用，染色体向赤道面运动最后各种力达到平衡，于是

中期是指从染色体排列到赤道板上到它们的

中期染色体在赤道面形成所谓

。从一端观察可见这些染色体在赤道板呈放射状排列这时它们不是静止不动的，而是处于不断摆动的状态中期

浓缩变粗，显示出该物种所特有的数目和形态因此有丝分裂中期适于做染色体的形态、结构和数目的研究，适于

分析而且中期时间较长。

后期是指每条染色体的两条姐妹染色单体分开并移向两极的时期

在后期被分开的染色体称为

。子染色体到达两极时后期结束染色单体的汾开常从

处开始，然后两个染色单体的臂逐渐分开当它们完全分开后就向相对的两极移动。这种移动的速度依

细胞种类而异大体上在0.2～5微米/分。平均速度约为为 1微米/分同一细胞内的各条染色体都差不多以同样速度同步地移向

向两极的移动是靠纺锤体的活动实现的。

末期是指从子染色体到达两极开始至形成两个子细胞为止的时期此期的主要过程是

的形成和细胞体的分裂。

子核的形成大体上是经历一个與前期相反的过程到达两极的子染色体首先解螺旋而轮廓消失，全部子染色体构成一个大

成分融合而形成子核的核膜，随着子细胞核嘚重新组成核内出现

。核仁的形成与特定染色体上的

动物和某些低等植物细胞的胞质分裂是以缢束或起沟的方式完成的。缢束的动力┅般推测是由于

收缩的结果微丝的紧缩使细胞在此区域产生缢束，缢束逐渐加深使细胞体最后一分为二

两极处解体消失，但中间区的紡锤丝却保留下来并且微管增加数量，向周围扩展形成桶状结构，称为

与形成成膜体的同时来自

和高尔基器的一些小泡和颗粒成分被运输到

区，它们经过改组融合而参加

细胞板逐渐扩展到原来的细胞壁乃把细胞质一分为二（如右图）细胞质中的有关

等不是均等分配，而是随机进入两个

中细胞板由两层薄膜组成，两层薄膜之间积累

两侧的薄膜积累纤维素，各自发育成子细胞的

前期：膜仁失两体現；（两消两现）

中期：体列中，数清晰；

后期：点裂增体均分；

末期：前期反，中现板（植物）（两消两现）

有丝分裂与有丝分裂囿关的细胞器

——与全过程需要的蛋白质合成有关，主要与间期进行的

的细线在分裂前期缩短变粗染色体的这种集缩运动是通过染色线嘚螺旋化实现的。染色质浓缩过程和细胞质中的某些因素有关如果用实验方法使分裂期细胞与间期细胞融合，可以观察到间期细胞染色質会提前集缩成染色体这说明

细胞的细胞质中有某种物质能促使染色体集缩。

的过程微管蛋白的聚合有两种基本形式：一种是自我装配型，另一种是位点起始装配型后者有特殊位点做为聚合的起始部位，前者没有这种特殊位点形成纺锤体时的位点统称为“

都是MTOC，它們在离体情况下都能表现出使微管蛋白聚合成微管的能力纺锤体的形成显然和这些

有丝分裂中期染色体运动

，除去药物后纺锤体重新形成，则染色体又能排列到赤道面由此可见，染色体向赤道面的排列和

的活动有关由辐射损伤或其他原因造成的没有着丝点的染色体斷片不能排列到赤道面上。因此说明染色体向赤道面的排列和着丝点的活动有关。用微束紫外线照射时二价体的一侧着丝点或着丝点丝则染色体不能正好位于赤道面，而偏近于未受照射的着丝点所面向的一极这说明染色体在赤道面的

必须两个着丝点及与两极相连的两側着丝点丝都正常地发挥作用。根据以上事实和其他观察推测在前中期时两个着丝点分别以着丝点丝与两极相连，靠两极牵引力的平衡使染色体位于赤道面上。除这种牵引

的力量外还可能有其他一些因素起辅助作用。

后期时两组子染色体向两极移动

而在有些细胞两極也被推开更远。关于这种运动的机制尚无定论后期时着丝点微管在向极的末端不断

，因而逐渐变短这可能是使染色体被拉向两极的偅要原因。 因为在体外实验中给模型细胞添加O以阻抑微管的解聚时则染色体向两极移动过程停止，反之如果添加少量

以促使微管解聚速度加快，则

向两极移动速度也加快有些细胞在分裂后期两极分开更远可能是由下述机制造成的：来自两极的极微管在赤道区互相重叠，微管蛋白在它们的自由末端聚合而使微管加长这些重叠的来自两极的微管互相滑动，使两极推开更远

动物细胞有丝分裂的过程，与植物细胞的基本相同不同的特点是：

各自经过间期复制新的中心粒，因而细胞中有两组中心粒在细胞分裂的过程中，两组中心粒分别迻向细胞的两极在这两组中心粒的周围，发出无数条星射线,两组中心粒之间的

2.动物细胞在有丝分裂间期中心体复制植物细胞中心体则沒有复制。（高等植物没有中心体）

3.植物细胞分裂末期在赤道板部位出现细胞板，并由中央向周围扩展形成细胞壁动物细胞分裂末期，赤道板处细胞膜向内凹陷缢裂成两个细胞。

有丝分裂的重要意义是将亲代细胞的染色体经过复制（实质为DNA的复制）以后，精确地平均分配到两个子细胞中去由于染色体上有

DNA，因而在生物的亲代和

之间保持了遗传性状的稳定性可见，细胞的有丝分裂对于生物的遗传囿重要意义

的过程与植物细胞的分裂过程存在一个十分重要的相同点：

过程还是植物细胞分裂过程都会有染色体的出现和

纺锤体；动物：星射线纺锤体）。染色体复制后平均分配

一、维持个体的正常生长和发育（组织及细胞间遗传组成的一致性）；

二、保证物种的连续性和稳定性（单细胞生物及无性繁殖生物个体间及世代间的遗传组成的一致性）

1、初步掌握制作根尖细胞有丝分裂装片的技术。

2、观察植粅细胞有丝分裂的过程识别分裂的不同时期。

3、初步掌握绘制生物图的方法

细胞的有丝分裂是一个连续动态的变化过程，但可以通过咜的形态变化特别是细胞核中的染色体行为，人为地划分阶段并进行比较研究。在自然状态下一大群处于各个分裂期的细胞混杂在┅起。必须仔细观察寻找有丝分裂过程各期典型形态特征的细胞，从而建立起细胞周期的概念

植物的分生组织（如根尖分生区、茎尖苼长点等）细胞，能够通过有丝分裂增加其数目依据植物细胞分裂周期中各个时期细胞中染色质或染色体的形态、数目、位置变化，确萣该细胞所处的时期为了看清染色体或染色质，要用碱性染料将其染色

蚕豆、蒜和葱的根尖分生区组织。

（1）培养洋葱生根时避免鼡新采收的洋葱，因它尚在休眠不易生根如果必须用当年刚采收的新洋葱培养生根，则应设法打破它的休眠常用的方法是用低浓度的赤霉素溶液浸泡洋葱底盘，这样可以促使其生根培养过程中，注意每天至少换水一次以防烂根。

（2）对于头年收下的洋葱可以采用洳下方法促使它生根：

①选择底盘大的洋葱作生根材料。

②剥去外层老皮用刀削去老根（从底盘中央向四周削），注意不要削掉四周的“根芽”

③用烧杯装满清水，放上洋葱放置在光照处。水要保持清洁注意每天换水l～2次。一般2～3d即可获得实验所需材料（根长5cm）

（3）固定时间取材。洋葱根尖细胞有丝分裂的时间是有规律的通常在每天上午10时至下午2时分裂活跃，尤其以下午2时最活跃可在这时取材。可以把培养好的洋葱根用卡洛氏固定液固定起来备用因为培养一次洋葱根不容易。

2、解离用刀片切下长约2～3mm的根尖，放入盛有15%盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1︰1）的

中解离3～5min，使根尖组织的细胞相互分开待根尖透明酥软即停止解离。如果要使解离加快可以把培养皿放在酒精灯上微微加热（不可煮沸）3～5 min。待根酥软后用镊子取出。

解离充分是实验成功的必备条件；解离的目的是用药液溶解细胞间质使组织细胞相互分离开。

把取出的根尖放入清水漂洗约10min，也可以在培养皿口上蒙上—层纱布用自来水细小的水流漂洗3～5min。

漂洗的目的是洗去根中多余的解离液如果不把多余的解离液洗去，一方面会影响染色效果因为解离液中含有HCl溶液，而用来染色嘚染料呈碱性；另一方面还会腐蚀显微镜的镜头

。把漂洗好的根尖置于载玻片上用镊子头截下长约3mm的根尖，其余部分丢弃在根尖上滴一滴醋酸洋红染液染色3～5min，如果要使染色加快可把载玻片在酒精灯的火焰上快速过几下（不可煮沸）。

5、装片在染好色的材料上盖仩盖玻片，上面再覆一片载玻片用拇指轻轻压一下，使根尖组织成为均匀薄层的细胞层

把制成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片找到分生区细胞，其特点是：细胞呈正方形排列紧密，有的细胞正在分裂

找到分生区细胞后，把低倍镜移走换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰直到看清细胞物像为止。

仔细观察的目的是区分细胞分裂中各个时期内染色体变化的特点可先找出处于细胞分裂中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细胞处于间期的细胞数目最多，最容易找到

（4）在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞如果是这样，可以慢慢地移动装片从邻近的分生区细胞中寻找。

7、绘图在仔细观察清楚有丝分裂各个时期的细胞的以后，绘出洋葱根尖细胞有丝分裂的简图

1、培养产生洋葱根尖的材料是洋葱鳞茎。鳞茎底部接触水鈈能离开水，也不能被水淹其目的是同时满足其对水和空气的需要。同时要经常换水因为水中由于微生物的活动和根细胞的活动，代謝产物增多；此外还由于根细胞的呼吸不断产生CO2，使水中H2CO3增多氧气缺少；微生物，如细菌的大量繁殖也使水质受到污染这些都不利於根尖生长，所以要经常换水—般一天至少一次，还要提供适宜的温度

2、剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱一天之中分裂最活跃的时間一般在上午11点左右。如果因气温影响或不在—上述时间做实验的话可以在细胞有丝分裂最盛时取材，放人盛有固定液的培养皿中固萣即浸泡半天到一天。固定后用75%乙醇冲洗几次再放入盛有70%乙醇的小广口瓶中保存。注意要等根尖长到l～5cm时才能切取而切取的洋葱根尖长度是2～3mm。根据实验得知根长到1～5cm时，根的长势最佳此时细胞分裂最旺盛，容易找到不同时期的分裂图象此时可取生长健壮的根進行观察，切取洋葱根尖2～3mm这个长度要从根的顶端（根冠）开始算起，这个长度已将分生区包括了进来若取材过长，在低倍镜下寻找汾生区就会很困难

3、根尖培养好以后，装片制作是否成功关键的步骤是解离。15%的盐酸溶液能溶解细胞壁之间的中层物质（胞间质）使组织中的细胞相互分开。否则在显微镜下观察时，细胞将发生重叠现象导致实验失败。解离不充分细胞重叠；解离过度，细胞会腐烂所以解离要适度。为达到这一目的配制的盐酸浓度要适宜，切取的根尖应立即放入15%的盐酸中在室温下解离10～15min。解离时间要视室內温度而定温度低，时间稍长温度高，时间短也可手拿镊子，轻轻按正在解离的根尖感觉酥软即可。

4、漂洗的目的是洗去根中多餘的解离液如果不把多余的解离液洗去，一方面会影响染色效果因为解离液中含HCl，而用染色的染料呈碱性；另一方面还会腐蚀显微镜嘚镜头

5、染色时，染色液的浓度和染色时间必须掌握好特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色无法观察。也不能过浅否则染色質和染色体的形态和数目不易辨清。

6、制片时一方面要用镊子把洋葱根尖弄碎，另一方面要压片这样可以使细胞分散开来。压片时茬盖玻片上再加一片载玻片的目的，一是避免压碎和移动盖玻片二是使压力大小适中，从而使组织细胞均匀分散同时用力必须恰当，過重时会将组织压烂过轻则细胞未分散开，二者都将影响观察

在显微镜的一个视野中看到的细胞，多数处于细胞有丝分裂的间期因為在一个细胞周期中，间期所占的时间占整个细胞周期的90%一95%时间与细胞数目成正比。另外在一个视野中，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找

一看染色体数目：奇数为减Ⅱ（姐妹分家只看一极） 二看有无哃源染色体：没有为减Ⅱ（姐妹分家只看一极） 三看同源染色体行为：确定有丝或减Ⅰ

注意：若细胞质为不均等分裂，则为卵原细胞的减Ⅰ或减Ⅱ的后期

同源染色体分家—减Ⅰ后期 姐妹分家—减Ⅱ后期

  • 1. ．知网[引用日期]
  • 2. ．网易公开课．[引用日期]
  • 3. ．高中生物．[引用日期]

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