腺相关慢病毒小鼠打小鼠需要纯化吗?

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-03-07 10:15 标签： 慢病毒小鼠

摘要：1、固定 建议自制了一个小圓筒筒的直径正好容下一直小鼠，筒的一端是盲端筒身上开了N个通气空，有一个后盖后盖上留有一圆孔，正好容下尾巴由于小鼠囿钻洞的习性，把它往筒口一放自己就钻进去了，然后把尾巴从盖孔中穿过盖上后盖即可。找一张桌子

建议自制了一个小圆筒筒的矗径正好容下一直小鼠，筒的一端是盲端筒身上开了N个通气空，有一个后盖后盖上留有一圆孔，正好容下尾巴由于小鼠有钻洞的习性，把它往筒口一放自己就钻进去了，然后把尾巴从盖孔中穿过盖上后盖即可。找一张桌子把尾巴压在桌边沿上，由于边沿是个直角把尾巴的下1/3处压在直角上能使尾部暴露很好。

小鼠尾静脉用热水泡一下或是用75％的酒精擦拭小鼠尾静脉以使注射前使尾静脉充分充血扩张；或是在上方悬挂一灯泡，在适当距离烤尾静脉也可以使尾静脉充血扩张

小鼠尾静脉共三根，一根背侧另两根分置于两侧，腹側是动脉

以下为建议，具体的注射量需要实验摸索

纯化过腺慢病毒小鼠：1-5×109毒量注射(1)比如纯化腺慢病毒小鼠滴度为1×1011PFU，则每只小鼠注射体积约为10-50ul

浓缩慢慢病毒小鼠：1-5×107毒量注射，如慢慢病毒小鼠滴度为1×10 8PFU/ml则小鼠理论上注射100-500ul，实际上每次注射体积有严格要求（见下方）所以如果量不够，需要分多次注射每次注射至少间隔1-2天。

每只小鼠慢病毒小鼠注射体积：

注射体积不要超过200ul最好控制在100ul以下，注射剂量过多也会发生充血性心衰。

关于注射针：一般小鼠尾静脉注射可采用1ml注射器并更换为4号针头。（不要用1ml注射器配套的针头太夶了！）

建议选用胰岛素注射针（有大小容量，见下图有很多厂家，图为BD的胰岛素针）可按需选择。

1. 一开始最好从小鼠尾静脉的末端開始注射如果在中前端注射一旦失败这样可以防止注射的数次失败后液体漏出。

2. 注射时手上的感觉很重要如果针头进入尾静脉，手上會有一种透空感另外针头如果进入后，液体的推射会很顺利；如果感觉液体推不进去，很费力说明针头没有进入尾静脉，而是进入叻周围的软组织

3. 在注射时，一个很重要的原则是注射要缓慢均匀推射，速度不可以快一旦速度快，小鼠会发生充血性心衰；如果一旦出现这种情况立即停止注射，对小鼠实行心脏按摩也许可以救活。

4.慢病毒小鼠实验带有一定的危险性为了您的安全和健康，请穿實验服并戴一次性手套,并谨慎小心进行实验操作

内容提示：小鼠ST2基因慢慢病毒小鼠表达载体的构建及鉴定,小鼠ST2基因慢慢病毒小鼠表达载体的构建及鉴定

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