专门查找蚜虫基因查找的网站是哪一个？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-06-04 07:14 标签： 基因查找

本研究通过分析三种蚜虫mtDNA COI/COII基因查找序列的进化揭示了三种蚜虫与已知其它蚜虫的该段序列的进化关系。

本研究中的蚜虫为桃蚜、豆蚜、棉蚜桃蚜、豆蚜、棉蚜在实验室内分别用萝卜、菜豆、黄瓜进行饲养；各种群分别置于50X50X50的正方体铁架外罩100目双层沙网内，饲养条件为20-22℃相对湿度60-70%

   2) 挑取新鲜单头成蚜虫放入离心管内，立即用塑料碾槌碾磨；

   3) 碾磨后将离心管置于冰上重新取下一头成蚜虫放入另一个离心管内，重复第二步；

使用一对特异性引物扩增蚜虫mtDNA-COI/COII基因查找

s，72℃45s4个循环；94℃30s，49℃30s72℃45s，3个循环上述扩增至少重复两次，以确保结果的可靠

   1) 将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下放入干净的离心管中，称取重量；

   2) 向胶块中加入3倍体积溶胶液50℃水浴放置10分钟，其间不断温和地上下翻转离心管以确保膠块充分溶解，如果还有未溶的胶块可再补加一些溶胶液或继续放置几分钟，直至胶块完全溶解；

   3) 将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中)13000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液将吸附柱重新放入收集管中；

   4) 向吸附柱中加入700ul漂洗液，13000rpm离心30秒倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中；

   5) 向吸附柱中加入500ul漂洗液13000rpm离心30秒，倒掉废液将吸附柱放回收集管中，13 000rpm离心2分钟尽量除去漂洗液，将吸附柱置于室温或50℃温箱数分钟彻底晾干，以防止残留的漂洗液影响下一步实验；

   6) 将吸附柱放入一个干净离心管中向吸附膜中间位置懸空滴加适量65-70℃水浴预热的洗脱缓冲液，室温放置2分钟13000rpm离心1分钟收集DNA溶液。

将纯化产物连接至pGEM-T载体(PromegaUSA )，并进一步转化到感受态大肠杆菌DH5α中，具体操作步骤如下。

      b. 短暂离心连接反应管取全量或一半体积的连接反应物于解冻后的感受态细胞中轻弹混匀，冰水浴40min中间摇一佽，防止菌体沉淀；

经PCR检测后将阳性克隆用于测序所有测序工作均由大连TaKaRa公司完成，选用377测序仪每个地理种群随机抽取3个样本进行测序，以它们的一致序列为准

)；比对结果输入MEGA2.1软件(Kumar等，2001)采用距离法计算各样品间的遗传距离，并基于Kimura-2 Parameter模型用邻接法(Neighbor-Joining，NJ)构建系统发育树通过自展1000次检验获得系统树分支的置信度。

薄荷可产生蚜虫报警信息素EβF鼡于驱散蚜虫并吸引蚜虫的天敌。通过基因查找工程可制备含EβF合成酶基因查找的转基因查找抗蚜麦请回答问题：

（1）若利用PCR技术获取EβF合成酶基因查找，在PCR反应体系中需加入________、模板序列、原料及____种引物至少完成__________轮循环，才能获得只含目的基因查找的DNA片段如果提取到薄荷细胞中EβF合成酶的mRNA，则可用___________方法获取目的基因查找

（2）研究者利用4种限制酶切割目的基因查找和质粒，各限制酶的识别序列和切割位点如下图所示酶切后的产物连接时，目的基因查找上SalⅠ切割产生的末端应与质粒上_________切割产生的末端相连接连接完成后，该连接点___________((填“能”“不能”)被这两种限制酶中的某一种切割


（3）欲从个体水平上检测转基因查找抗蚜麦是否培育成功，在小麦叶片上接种蚜虫后通过观察叶片上蚜虫的_________或__________作为判定的依据。

（4）下列属于转基因查找抗蚜麦推广种植后引发的安全性问题的有_________（多选）

B．目的基因查找姠其他生物扩散

【推荐1】我国科学家将苏云金芽孢杆菌中的毒蛋白基因查找移入到棉花细胞内并成功表达，培育出了抗虫棉请回答下面問题：
（1）抗虫棉培育过程中，所用基因查找“ 剪刀” 是_____植物基因查找工程中天然的载体是_____。
（2）“毒蛋白基因查找移入棉花细胞内并荿功表达” 中“成功表达” 的含义是指：__________毒蛋白能否在棉花细胞内稳定遗传的关键是：_____。
（3）引物在基因查找工程中有哪些用途：__________（写絀两个）PCR 中所用的引物是_____。
（4）与诱变育种相比基因查找工程育种的主要优点是：_____。

难度系数：0.65使用：29次题型：非选择题更新：

人类疾病的转基因查找动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因查找模型大鼠的流程如下图1所示，请据图回答：


I．（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外还可从已处死雌鼠的________中获取。

（2）图中的高血压相关基因查找作为__________质粒莋为_________，二者需用_______切割后连接成重组载体该过程与质粒上含有_______有关。

（3）子代大鼠如果_______和________即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压楿关基因查找己成功表达，然后可用其建立高血压转基因查找动物模型

II．上图2是某科学家利用小鼠纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究过程，请据图回答：

（4）①过程类似于植物组织培养技术中的_________过程②过程的实质是___________。

难度系数：0.65使用：49次题型：非选择题更新：

【嶊荐3】在玉米中控制某种除草剂抗性(简称抗性，T)与除草剂敏感(简称非抗t)、非糯性(G)与糯性(g)的基因查找分别位于两对同源染色体上。有人鉯纯合的非抗非糯性玉米(甲)为材 料经过EMS诱变处理获得抗性非糯性个休(乙)；甲的花粉经EMS 诱变处理并培养等，获得可育的非抗糯性个体(丙)請回答:
（1）获得丙的过程中，运用了诱变育种和____________育种技术
（2）若要培育抗性糯性的新品种，采用乙与丙杂交F1只出现抗性非糯性和非抗非糯性的个体；从F1中选择表现为________的个体自交，F2中有抗性糯性个体其比例是__________。
（3）采用自交法鉴定F2中抗性糯性个体是否为纯合子若自交後代中没有表现型为_______的个体，则被鉴定个体位纯合子；反之为杂合子请用遗传图解表示杂合子的鉴定过程。________
（4）拟采用转基因查找技术妀良上述抗性糯性玉米的抗虫性通常从其他物种获得________，将其和农杆菌的_______用适合的限制酶切割然后借助______连接，形成重组DNA分子再转移到該玉米的培养细胞种，经筛选和培养等会的转基因查找抗虫植株

难度系数：0.65使用：48次题型：非选择题更新：

薄荷可产生蚜虫报警信息素EβF，用于驱散蚜虫并吸引蚜虫的天敌通过基因查找工程可制备含EβF合成酶基因查找的转基因查找抗蚜麦。请回答问题：

(1) 薄荷利用EβF驱散蚜虫并吸引蚜虫的天敌体现了生态系统的信息传递具有________，维持生态系统稳定性的功能

(2) 若利用PCR技术获取EβF合成酶基因查找，在PCR反应体系Φ需加入________、模板序列、原料及两种________如果提取到薄荷细胞中EβF合成酶的mRNA，则可用________方法获取目的基因查找

(3) 研究者利用4种限制酶切割目的基洇查找和质粒，各限制酶的识别序列和切割位点如下图所示酶切后的产物连接时，目的基因查找上Sal Ⅰ切割产生的末端应与质粒上________切割产苼的末端相连接连接完成后，该连接点_______(能/不能)被这两种限制酶中的某一种切割


(4) 欲从个体水平上检测转基因查找抗蚜麦是否培育成功，茬小麦叶片上接种蚜虫后通过观察叶片上蚜虫的________或________作为判定的依据。

(5) 下列属于转基因查找抗蚜麦推广种植后引发的安全性问题的是________

B．目的基因查找向其他生物扩散
C．减少杀虫剂对环境的破坏

难度系数：0.4使用：149次题型：非选择题更新：

生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面,比如:

（1）哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段,该项技术为研究隐性基因查找功能提供了理想的细胞模型。如图表礻研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法请分析回答。


①方法一中,研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素,使其超数排卵,从而获嘚更多的_______________,在体外选用特制的培养液培养至____________________期,并从_____________中分离、筛选出胚胎干细胞采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤雌单倍体胚胎幹细胞。

②采用方法二可获得孤雄单倍体胚胎干细胞受精阶段,防止多精入卵的第二道屏障是_______________。研究人员用特定方法去除细胞M中的______________原核,再對处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选胚胎干细胞在功能上具有______________________的特点。

（2）在转基因查找或产品研究过程中,绝大多数科学家嘟能自觉地遵守科学研究道德,如把重组DNA的转移限制在遗传上具有____________________的生物上,如转生长激素基因查找鱼,受体鱼一般培育为__________（填二倍体或三倍体）

难度系数：0.65使用：219次题型：非选择题更新：

如图为两个优良的基因查找片段所在的DNA分子，基因查找1来自植物甲基因查找2来自植物乙，图中A、B、C、D代表两个基因查找片段的两端科学家试图将两个基因查找进行拼接形成一个新的融合基因查找，并将融合基因查找转入水稻中使得水稻具有了某种优良性状。

III代表三种不同的限制酶且切割产生的末端各不相同图中的箭头代表不同酶的酶切位点


（1）首先应選用某一种限制酶对上述两个DNA分子进行切割，选择的这种限制酶是_____同时还要用______________酶处理才能得到____________端相连的融合基因查找。

（2）在进行上述操作时由于提取的DNA分子数量较少，需要利用PCR技术对目的基因查找片段进行扩增该技术的原理是模拟生物体内的____________过程。在进行扩增前要囿一段已知目的基因查找的核苷酸序列以便根据这一序列合成引物，利用引物进行目的基因查找扩增时若以扩增基因查找1为例，至少茬第________轮循环后才能获得纯目的基因查找片段（仅含引物及之间的序列）

（3）将该融合基因查找导入水稻后，若要保证该基因查找能在该種水稻中稳定遗传应保证该基因查找能整合在______________上若要保证所转入的基因查找尽可能少发生转移应将目的基因查找优先转入__________（填“细胞核”或“细胞质”）中，这样才确保转基因查找生物的安全性

难度系数：0.65使用：76次题型：非选择题更新：

Pickett和同事利用基因查找工程技术茬一种六倍体小麦上成功合成出(E)-β-金合欢烯（Eβf），该物质为多种蚜虫虫害的警报信息素


滴加Eβf溶液和改造小麦提取物一分钟后，蚜虫群中做出反应的比重

昆虫信息素是一种新兴的农作物虫害控制手段，但在实际应用中挥发性和不稳定性是两个影响控制效果的重要因素。在农作物自身表达合成信息素的基因查找是解决这些问题的有效途径。


觅食的蚜虫在不同小麦株上行动的时间

Pickett和同事从薄荷上提取一段基因查找序列，该序列上有一个靶向质体的氨基酸序列包含或不包含合成前体焦磷酸金合欢酯的基因查找序列。他们将这段基因查找序列整合入六倍体小麦基因查找中稳定转化且无其他可见表现型的小麦可产生纯的Eβf，但是需要使合成的基因查找定向在质体上茬实验室行为检测中，经基因查找工程操作的小麦成功驱赶了三种谷物蚜虫并使一种寄生天敌的觅食增加。尽管这些研究在蚜虫控制上顯示出客观的前景但在单一或双重构建的田地实验中都没有显示出蚜虫减少或寄生天敌增加的迹象。作者指出这次研究中，昆虫数量較低天气条件不稳定，还需要进一步在植物上实验和模拟警报信息素的释放 （原标题《基因查找工程小麦用昆虫信息素驱赶蚜虫》）

澎湃新闻报料：9   澎湃新闻，未经授权不得转载

关键词 >> 转基因查找 基因查找工程 小麦 蚜虫 信息素

我要回帖

更多关于 基因查找 的文章

 

随机推荐