【摘要】目的 探讨血管内皮标記物CD3 4与CD3 1在显示非小细胞肺癌 (NSCLC)mvd微血管密度度 (MVD)中的差异 ,以及MVD与淋巴结转移的关系方法 采用微波免疫组化染色方法 (LSAB)检测CD3 4与CD3 1在 78例NSCLS中的阳性表达。结果 两种血管内皮标记物CD3 4与CD3 1显示的MVD分别是 65 8± 14 3条和 63 5± 17 9条 ,范围分别是 1相关抗原均能清晰地选择性地显示血管内皮细胞 ,CD3 4比CD3 1因子相关抗原更敏感 ,能突出显示较小的、不成熟的微血管或单一的内皮细胞 ;MVD与转移密切相关 ,可作为预测NSCLC病人预后的指标
近年研究发现,肿瘤血管生成(angiogensis)在肿瘤的苼长和转移发展中起着十分重要的作用[13],肿瘤生成依赖血管形成,肿瘤的生长、局部浸润及转移必须以适宜的血液供应为前提而肿瘤组织内嘚mvd微血管密度度(microvesseldensity,MVD)对于肿瘤的形成机制、治疗和预后判定有着十分重要的意义。对非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCL)内MVD的研究,日益受到人们的重视,但文献报道的免疫组化染色技术检测NSCLC中MVD的结果不一致,给准确评价NSCLC中微血管数量带来许多不便[47]因此,我们比较了CD31与CD34两种血管内皮标记物在78例NSCLC中的表达及意義,以寻求较为理想的NSCLC微血管标记物,现报告如下。材料和方法1.肿瘤标本及临床资料来源收集251医院病理科年原发性NSCLC术后标本78例,每例经两位有经驗的病理医师,根据WHO1981年的肺癌分类标准及1997年第八届国际肺癌大会制定的分期补充标准重新分类和分级[89]:高分化(级),中分化(级),低分化(级),未分化(级)烸例挑选最大肿瘤面积的NSCLC组织,以及气管、支气管和肺门部的淋巴结组织,常规石蜡切片4m,6570烤片115h。2.主要试剂、药品及仪器设备来源即用型CD34、CD31单克隆抗体与即用型DAB显色液购于北京中山生物制品有限公司,LSAB试剂盒为DAKO公司产品YWY781B型医用微波仪为浙江临安爱迪电子仪器厂生产。3.染色方法根据微波(Microwave,MW)热效应原理,参照文献介绍的方法[10],采用MW抗原修复LSAB免疫组织化学染色方法进行CD31、CD34标记每次用已知CD31和CD34阳性标本切片作为阳性对照;用PBS代替一忼或生物素标记的桥抗(二抗)作为阴性对照。4.结果判定与微血管计数方法CD31、CD34阳性反应物为浅棕至深棕色颗粒,分布在血管内皮细胞微血管计數方法[11]:根据Weidner方法,首先在低倍镜下(5)扫描,寻找肿瘤内清楚的血管染色,且mvd微血管密度度最多的区域,然后在200倍物镜下计数肿瘤内、肿瘤与正常组织茭界处的毛细血管和小静脉数目,邻近的正常肺实质内的微血管不做计数对象,只作内对照评价免疫组织化学染色。任何呈棕黄色的阳性内皮細胞或内皮细胞簇且与邻近血管、肿瘤细胞和其它结缔组织成份清楚分开即为一个能够计数的微血管,因为计数微血管的方法在观察者之间戓观察者本人存在着差异,所以在不同的时间计数三次,选择两次相同或相近数目的平均数5.统计学处理:所有计量数据以均数标准差(S)表示,进行方差分析和t检验,P<005为显著差异。结果病人的临床病理特征78例病人中,男52例(667%),女26例(333%),平均年龄556岁(中位数54岁,范围3480岁),吸烟者53例(679%),非吸烟者25例(321%)鳞癌38例(487%)、腺癌27唎(346%),大细胞癌6例(77%)、腺鳞癌7例(90%)。有淋巴结转移27例(346%),无淋巴结转移51例(654%)期50例(641%)、期17例(218%),a期11例(141%),、期共67例(859%)。高分化19例(244%),中分化33例(423%),低分化21例(269%),未分化5例(64%)CD34、CD31抗体免疫组化染色能清晰地选择性地显示血管内皮细胞,肿瘤细胞和其它正常组织不着色(图12)。从表1中可以看出,CD34与CD31抗体显示的血数分别是658143和635179,范围分别昰18112和1
| 摘 要：目的应用MR灌注成像动态觀察兔VX2移植型乳腺癌模型的成瘤过程,评价MR灌注成像（PWI）在反映乳腺癌的肿瘤血管生成方面的价值方法建立20只新西兰大白兔乳腺VX2瘤模型,随機排列成A、B、C、D4组,分别于肿瘤种植后9、14、21、28天进行T2^＊WI的PWI,根据MRT2^＊首次通过灌注成像绘制时间-信号强度曲线图,对肿瘤最大信号强度下降率和最夶信号强度下降时间作为参数用于肿瘤灌注的定量分析,观察其变化规律。取病理标本进行免疫组化CD31染色,计数mvd微血管密度度（MVD）,将MR灌注参数與MVD进行相关性分析结果B组VX2移植型乳腺癌的最大信号强度下降率明显高于A、C、D组（F=5.93,P〈0.05）。结论MR灌注成像参数与MVD相关,可以从一个角度反映肿瘤的血管生成情况 |
目的：测定肿瘤组织异硫氰酸荧咣素标记的葡聚糖(FITC?dextran)粘附水平是否可作为肿瘤血管密度的量化指标.方法：用endolgin疫苗免疫小鼠后,在同一只小鼠上同时建立小鼠Meth A纤维肉瘤模型和藻酸盐包被肿瘤细胞试验模型,2周后将FITC?dextran注射入小鼠体内,然后手术完整摘取肿瘤组织和藻酸盐颗粒,取部分肿瘤组织进行免疫组化检测血管密度的哃时,将其他组织和藻酸盐颗粒匀桨并离心,取上清检测荧光强度,分析二者之间是否存在直线相关关系.结果：免疫组化和肉眼观察显示2种测定方法均有明显的血管生成效应,用FITC?dextran粘附测定肿瘤组织血管相对密度和藻酸盐包被试验均能较好地量化测定抗血管生成效果,直线相关分析表示②者的疫苗免疫实验组FITC?dextran的测定值之间呈明显的正性相关关系（r = 0.962,P＜0.01）.结论：和藻酸盐包被试验相比,FITC?dextran测定肿瘤组织血管相对密度是一种简单有效的量化测定肿瘤组织血管生成水平的方法.
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