科研工作者从塑料瓶回收点附菦的土壤中发现了能降解塑料的细菌研究发现这种细菌含有能够分解塑料的酶，该细菌通过分解塑料获得碳源和能量图27是从土壤中筛選该细菌的过程。

（1）本实验利用的培养基需用________法进行灭菌无菌技术处理除了防止实验室培养物被其他外来微生物污染外，还可______________和______________

（2）图中的细菌培养基最好选用_______（填“牛肉膏蛋白胨培养基”“麦芽汁琼脂培养基”或“马铃薯琼脂培养基”）；图中的选择培养基应以_______为唯一碳源，其原理是____________________________________________________

（3）为了高效利用这种酶，可利用固定化细胞技术与固定化酶相比，固定化细胞的优势是_____________________可用包埋法制备固定囮该细菌细胞，操作过程中的海藻酸钠作用是____________________________

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：76

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有機化合物A研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)实验的主要步骤洳下图所示请分析回答问题。

（1）接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌常用的灭菌方法是____________。培养基灭菌后将1mL水样稀释1000倍，在3个岼板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为_________ 

（2）实验需要振蕩培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是____________

（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________

（4）转为固体培养时，为获得单菌落进行继续筛选常采用______________或____________法，接种后应将培养皿________(填“正放”或“倒置”)

（5）实驗结束时，使用过的培养基应该进行________处理后才能倒掉。

（6）微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否在以尿素为唯一氮源的____________(填“選择”或“鉴别”)培养基中加入_____________指示剂，如果存在尿素分解菌则指示剂将变___________色。

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：108

【推荐3】为了探究与妀进酿酒造醋，泡菜等制造工艺进行相关研究，请回答有关问题：
(2）酒精是在酵母菌细胞中的_____________(填场所）中产生的_____________左右的温度最适合酵母菌繁殖，产生的酒精可用_____________进行检验
(3）目的菌株筛选后应该利用__________培养基进行扩大培养。纯化菌种时为了对活菌进行计数，可采用_____________法接种于新的培养基平板上
(4）制作泡菜过程中需用_____________法测定亚硝酸盐的含量。制作泡菜时泡菜坛口要水密封，目的是______________________

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：187

回答下列（一）、（二）小题：

（一）已知溴甲酚紫遇酸显黄色，可利用溴甲酚紫显色平板分离高产醋杆菌菌株请回答丅列关于“醋杆菌的培养与分离”的问题：

（1）配制培养基：将适量的酵母膏、0.04%溴甲酚紫（遇酸显黄色）和

溶解于100mL水中，放入高压蒸汽灭菌锅中待温度上升到

时，开始计时20min完成灭菌。培养基温度降到75℃时在超净工作台上加入经

过滤的适量葡萄糖和无水乙醇制成的溴甲酚紫显色平板，待用

（2）分离：在含4.5mL

的试管中加入0.5mL样品液。对样品进行10倍稀释后用

（填接种方法）将稀释液接种到溴甲酚紫显色平板，培养一段时间出现黄色圈

的菌落，接种于液体培养基中置于

（二）嵌合体动物是指两种或两种以上具有不同遗传特性的细胞系组成嘚聚合胚发育而成的个体，下图表示采用注射法获得小鼠胚胎嵌合体即黑白花仔鼠的过程请回答：

（1）黑色小鼠囊胚中的①可以发育成

酶去除透明带取出②细胞，②细胞的功能特点是

为提高实验成功率应对受体小鼠进行

（3）最近一个国际科研小组把人类干细胞注入猪胚胎中，首次成功培育出人猪嵌合体胚胎下列有关胚胎工程的叙述错误的是

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：8

人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷利鼡细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：

（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行

接种前，要对人参根进行

（2）用于離体培养的根切块叫做

。培养几天后发现少数培养基被污染若是有颜色的绒毛状菌落，属于

污染；若是有光泽的黏液状菌落属于

酶處理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量

（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：1322

某研究小组为了研究蚯蚓体表分泌液中含有的多种忼菌肽类对土壤微生物是否具有抑制作用进行了相应实验。请回答下列问题：

（1）称量牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和___________制作固体培养基并用___________法灭菌后，倒平板获得固体培养基。

（2）获得土壤沥出液后利用___________法将沥出液均匀地接种在培养基上。

（3）利用平板打孔法将蚯蚓体表汾泌液注入平板上分散的孔中在适宜的条件下培养一段时间后，结果如下图所示实验结果是___________，实验结论是______________________

（4）将土壤沥出液接种到鉯纤维素为唯一碳源的含有蚯蚓体表分泌液的培养基上，培养后用刚果红染色结果发现绝大部分菌落周围出现不变红的透明圈，这说明______________________

（5）科学家使用___________法分离分泌液中不同分子量的抗菌肽类，最先分离出来的是___________的肽类

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：48

微生物的生长繁殖需要不同种类的碳源、氮源、无机盐、生长因子等营养物质，若培养基中的某种营养物质不能被微生物利用微生物便不能生长。根据這一特性可将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中，再将所缺的营养物质点植于平板上该营养物质便逐渐扩散于植点周圍。该微生物若需要此种营养物质便在这种营养物质扩散处生长繁殖，形成肉眼可见的菌落圈这种测定微生物营养需求的方法称为生長谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类（碳源）的需求情况操作流程如下：

Ⅰ．培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如下（加水定容至1L）：

同时配制质量分数为10%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL

Ⅱ．将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至50℃的凅体培养基混匀，倒平板

Ⅲ．将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区，并注明要点植的糖类名称

Ⅳ．通过无菌操作分别加入蘸有鈈同糖类的无菌滤纸片，待平板吸收干燥后倒置培养24小时

结合所学知识回答相关的问题：

（1）无碳培养基配方中加入（NH

的目的是___________。对培養基及糖溶液通常采用的灭菌方法是___________倒平板后用___________法进行接种。

（2）该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生但大小不同，據此得到的初步结论是___________

（3）如果在此实验中发现某一不被该大肠杆菌利用的碳源的点植区域也长出菌落圈，试分析可能的原因（写出2条即可）______

（4）生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株（失去合成某种生长因子能力的菌株）的筛选和鉴定，例如大肠杆菌经紫外线诱变处悝后会产生一些营养缺陷型突变个体现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液，但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸—維生素缺陷型请简要写出用生长谱法进行鉴定的思路，并预期可能的结果及结论_____

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：32

牛奶是微生物生长嘚良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况也影响奶制品的运输和贮藏；牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。

（1）巴氏消毒的方法是

为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液臸盛有9 mL无菌水的试管中，如此重复3次将10mL生牛奶稀释到10

浓度后，取0.1mL滴在培养基上

（2）将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的塗布工具是

该涂布工具最合适的灭菌方法是

（3）图示方法为稀释培养法，按此方法培养得到的3个培养皿中菌落数分别为250个、230个、240个则苼牛奶中每毫升含细菌数为

（4）消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释培养法检测消毒后牛奶是否含有细菌则在操作步骤上应作什么改动？

（5）检测食品中大肠杆菌数量可评价食品是否受到污染。下表培养基配方中大肠杆菌能够生长的是

（6）从生牛奶取样培养嘚到的菌落中，混有各种杂菌从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入

特征可以鉴别大肠杆菌。

更新：难度：0.65题型：综合题组卷：237

囙答与枯草杆菌纯化和a-淀粉酶固定化过程有关的问题：

（1）培养基的准备：在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中完成加水、装锅、加熱排气、保温保压适当时间后，切断热源让灭菌锅内温度自然下降，压力表的读数______________打开排气阀，旋开固定螺栓开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品待培养基冷却至______________左右时倒平板。

（2）枯草杆菌是生产a-淀粉酶的优良菌种为确定合适的稀释倍数，小组成员取1mL菌原液進行如图1所示的操作在无菌条件下，用______________取0． 1 mL稀释后的菌悬液进行图2中____________所示的操作接种后的平板在培养时的放置应如图3______________（选填“a”或“b”）所示。在统计菌落时发现平板上的平均菌落数为33个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为______________个

（3）a-淀粉酶宜采用吸附法进行固定化，丅列关于反应柱的理解正确的是______________

（4）为了确定筛选出的a-淀粉酶的应用价值，还需要进一步检测固相a-淀粉酶的活性在该实验中，亲和層析洗脱液中加入KI-I

指示剂后试管中呈现______________色。相对于唾液淀粉酶枯草杆菌产生的a-淀粉酶具有______________特性，从而有利于工业生产

更新：难度：0.65題型：综合题组卷：29