牛人告知下,杜蕾斯、杰士邦零感、艾‏战哪个好?艾‏战在市场上的评价如何?


【摘要】:
啤酒酵母自溶对啤酒风味稳定性、胶体稳定性和泡沫稳定性均有不利影响,因此在啤酒生产过程中,希望尽量减少酵母自溶的发生。目前,啤酒酵母自溶评价和机理方面的研究比较欠缺。本论文首先对啤酒酵母自溶过程中各物质变化情况和酵母自溶评价指标进行探索,其次通过比较转录组学和比较蛋白组学方法研究啤酒酵母自溶过程中mRNA表达差异和蛋白表达差异,探索酵母自溶过程细胞的生理状态及自溶调控机理,寻找与酵母自溶密切相关的基因和蛋白质,并选育啤酒酵母单倍体菌株,通过基因工程手段对其自溶关键基因进行改造,从而验证和修正实验推论,为传统育种选育抗自溶能力强的啤酒酵母菌株提供方向性指导。主要研究结果总结如下:
(1)在模拟自溶条件下跟踪测定啤酒酵母自溶过程中各物质的变化情况,发现α-氨基氮含量,甲醛氮含量,非α-氨基氮/α-氨基氮值,大、中、小分子蛋白质含量,长链脂肪酸含量等都无法直接作为判定酵母自溶情况的指标。(A260/A280)/死亡率随自溶程度的不同而呈现规律且一致的变化趋势,酵母菌株自溶程度越高,该比值越小。该方法综合性好、灵敏度高、操作简单,不仅可以用于判定同株酵母的自溶程度,还可用于比较不同菌株的自溶性能。
(2)利用基因芯片技术对两株自溶性能不同的啤酒酵母菌株青2和5-2在不同自溶阶段的基因转录情况进行分析,发现大部分参与能量产生/利用,蛋白质合成和压力应激反应的基因转录水平下调,参与细胞壁组织与合成,饥饿应激和DNA损伤应激的基因转录水平上调,表明自溶过程中细胞活力降低、细胞分裂速度减慢、胞内酶活也较低,但细胞努力进行自我维护和修复,以抵制自溶带来的细胞损伤。在自溶程度相同的情况下,自溶较慢的菌株代谢强度和细胞活力较强,而且抗自溶能力更好。推测TPS3,WSC2,RLM1,DFG5和KNH1等基因对啤酒酵母的自溶性能有较大影响。另外,采用实时定量PCR(qRT-PCR)技术对转录组芯片数据进行验证,证明芯片结果是可信的。
(3)利用蛋白组学技术对啤酒酵母青2在不同自溶阶段的表达谱进行分析,发现在自溶特殊的生理条件下,很多蛋白质在质上(蛋白的出现/消失)和量上(蛋白水平上调/下调)都发生变化。自溶过程中大量蛋白被降解,蛋白数目急剧减少。虽然自溶前后蛋白质种类有较大差异,但剩余蛋白与原有蛋白的匹配度很高。自溶过程中的48个抑制点经质谱鉴定为41种蛋白质,它们的表达调控可能导致能量和碳水化合物代谢,氨基酸代谢,细胞压力(如氧化压力、盐胁迫、渗透压等)应激,转录和翻译起始,蛋白质合成等过程受到抑制。11个诱导点经鉴定为8种蛋白质,它们的诱导表达可能导致细胞对饥饿和DNA损伤应激能力增强。另有8个点是自溶过程中新出现的,质谱鉴定为7种蛋白质,大部分为酸性、小分子量蛋白质。结合蛋白组学和蛋白功能分析结果,认为Pep4,Prc1,Ssb1,Hsp26,Ubc4,Sod1和Sod2等蛋白质可能与酵母自溶密切相关。对自溶应激蛋白和新出现蛋白的mRNA调控水平与蛋白质调控水平进行比较与分析,结果显示,其中大部分蛋白的mRNA水平与蛋白质水平相似,被视为转录水平调控。
(4)以啤酒酵母工业菌株青2为出发菌进行单倍体育种。选择流式细胞法进行产孢初筛,孔雀石绿-番红染色法作为子囊孢子染色法,改良McClary培养基作为产孢培养基,最终成功诱导青2产孢,孢子富集、分离后,得到4株单倍体预判菌,流式细胞法分析其DNA含量,发现均与单倍体标准菌W303-1B接近,经MAT-PCR和杂交实验对4株菌的配型进行检验,发现其中2株为MATa型,2株为MATα型。取一株DNA含量最低的菌株,采用PCR介导的基因置换法,用CUP1基因代替其HO基因,成功敲除HO基因。传代实验发现,该菌株DNA含量稳定,未发生倍性回复,可以进行后续基因操作。
(5)结合转录组学和蛋白组学结果,认为RLM1和UBC4基因可能对酵母自溶性能有较大影响,因此在啤酒酵母单倍体菌株中分别对两个基因进行了敲除和过表达,验证转录组学和蛋白组学数据正确性的同时,研究RLM1和UBC4基因对酵母自溶性能和抗逆性的影响,结果表明:RLM1过表达菌株H/rlm1中Rlm1表达量高,自溶性能差(自溶速度快),RLM1敲除菌株H-rlm1Δ中Rlm1无表达,自溶程度低,自溶性能好(自溶速度慢),表明RLM1基因在酵母自溶性能中起负面作用。同时,RLM1基因的表达对酵母的渗透压抗性、葡聚糖相关的细胞壁损伤的抗性、氮饥饿抗性、温度耐受性起积极作用,表明RLM1基因对酵母细胞抗逆性有益。经分析,RLM1基因对酵母自溶的影响可能是通过对其他基因及途径的调控实现,而非通过Rlm1的直接作用。UBC4敲除菌H-ubc4Δ中Ubc4无表达,自溶程度高,自溶性能差,UBC4过表达菌H/ubc4中Ubc4表达量高,自溶程度低,自溶性能好,表明UBC4基因在酵母自溶性能中起积极作用。同时,UBC4基因的高表达对酵母的渗透压抗性有益,低表达对几丁质相关的细胞壁损伤的抗性以及温度耐受性有益,细胞对葡聚糖相关的细胞壁损伤的抗性以及饥饿耐受性与UBC4基因的表达量相关性不大。

【摘要】:
融资担保企业在如今属于一个新兴的行业。21世纪以来,随着我国经济的高速发展,以及民营高新企业的迅速发展,金融担保产业也借助这个机会,得到了蓬勃的发展,特别是融资性的担保组织在中国的中型企业借贷中起到了极为重要的作用。但是,因为中国融资担保产业产生的时间较晚,因此其在各方面还没有完全发展成熟,很多地方还有所缺陷,同时很多融资担保组织在其内部还存在着职工体系不完善的问题,所以在整个行业的发展中存在着很大的风险隐患。由于担保行业存在着较高的风险,并且收益较低,所以担保业是一种典型的“高风险、低收益”的行业,想要降低风险,担保业务的风险控制对于一个担保机构来说就十分重要。与担保业发达的国家相比,我国的担保行业起步晚、经验少,并且致命的是风险控制能力弱,这些原因制约了目前整个担保行业的发展。另外,如今经济增速出现了明显的下降,中小型主体的发展遭遇瓶颈,这致使与息息相关的融资产业也出现了发展停滞的现象,整个产业进入了“严冬”阶段。这个时候,有些担保公司的潜存问题被激发出来,很多融资效能低、管理不科学的担保企业被动的出现了亏损。要保证担保公司的稳健发展的,并且更好地为中小企业进行金融服务,提高整个担保行业的风险控制能力成为了如今亟待解决的问题。本论文对云南RLM国有融资担保公司的担保业务的内在风险进行相关研究,并依据研究提出担保业务的风险防范方法,以促进云南RLM国有融资担保公司担保业务风险进行系统风险防范并提出了一些参考意见。本文从云南RLM国有融资担保公司的现状出发,结合理论分析和实际应用,阐述了云南RLM国有融资担保公司在经营中面临的内外部风险,重点阐述了风险防范对策。梳理和借鉴了相关的先进风险对策理论,完善了企业风险防范对策。笔者通过以往几年在融资担保企业的工作经验,对担保业务运营中的风险防范对策进行了改进,并据此提出了更科学的RLM国有融资担保业务的风险防范对策,可以更有效地识别和评价金融风险程度。并且企业能更及时地采取一定的对策来预防风险,对建立融资担保业务的安全体系具有些许的借鉴和参考价值。

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