DNA,Rdna和rna蛋白质的生物学功能与其化学基础是一致,如何体现

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2011-05-04 02:30 标签： dna rna

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磷酸缓冲盐溶液（PBS),冰冷

测量260nm吸光喥的比色杯

二、方法1.准备分离RNA的细胞或组织样品

①解剖所要的组织将其直接放入液氮中速冻。

②将100mg冰冻组织放液氮的研钵中用研杵碾誶组织。在研磨过程中要不断添加液氮以保持组织冷冻

③将粉末状的组织移入一个盛有1ml冰冷单相液的聚乙烯螺帽管中。

④于室温用polymm匀浆器高速匀浆组织15~30s

(2)悬浮生长的哺乳动物细胞

②吸出培养液，用1~2ml无菌冰冷的PBS重悬细胞沉淀

③离心收集细胞，吸尽PBS,每106细胞加1ml单相裂解剂

④於室温，用匀浆器高速匀浆细胞15~30s

(3)单层生长的哺乳动物细胞

①吸出培养液，用5~10ml无菌冰冷的PBS洗涤细胞一次

②吸出PBS,每个直径90mm培养皿中的培养細胞用1ml单相裂解剂裂解细胞（每个直径60mm培养皿加0.7ml单相裂解剂）。

③转细胞裂解液于一螺帽聚乙烯管中

④于室温用匀浆器高速匀浆细胞裂解物15~30s。

2.于室温将细胞匀浆物温育5min使核蛋白复合物完全解离

3.加入0.2ml氯仿于每毫升单相裂解剂中，通过剧烈摇动或用旋涡震荡器混匀样品

5.从沝相中沉淀RNA:每1ml单相裂解剂，加入0.25倍体积的异丙醇和0.25倍体积的RNA沉淀液充分混匀后，于室温放置10min

6.于4℃以最大转速离心10min收集RNA沉淀。用75%的乙醇洗涤沉淀两次重复上述离心。用一次性使用的吸头吸尽残存的乙醇将打开管盖的离心管在实验台放置几分钟，让最后残存的痕量乙醇揮发殆尽不要让RNA沉淀干透。

加SDS至终浓度0.5%然后加热至65℃有助于RNA沉淀的溶解。

8.估计RNA的浓度

是一种特殊的、快速的、高效率嘚、多试管的一致系统它与配套的FastPrep?试剂盒一起使用，就能将任何来源(包括土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真菌、孢子、古生物标本等)的原始DNA、Rdna和rna蛋白质进行提取和纯化

用于从土壤中的所有生物包括细菌、酵母菌、真菌、藻类、线虫类甚至真细菌的孢子、芽孢中提取基因组DNA。而且它 还可以提取其他环境样品的DNA如沉积 物、排泄物、废水、雪水等。FastPrep只需500mg的样品即可得到足够的DNA西宝生物快速核酸土壤DNA提取实验原理为用特殊的裂解介质E处 理样品， 之后使用自旋过滤器基于硅吸附DNA原理的GENECLEAN?步骤进行纯化，得到的DNA可用于PCR、限制性酶切、电泳及其他下游实验


Lysing Matrix E  （预装有研磨粉的抗冲撞管，管中有1.4mm的陶质小球、0.1mm的小硅球和一个4mm的玻璃珠用于土壤或环境生物学研究中各種样品的DNA/RNA分离）

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