主办单位：中国食品发酵工业研究所 全国食品与发酵工业信息中心主　　编：朱庆裴刊　　期：月刊开　　本：16开创刊时间：邮发代号：2-331
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单　　价：25.00定　　价：300.00国内统一刊号：11-1802/TS国际标准刊号：X获奖情况：1988年获轻工业部科技进步三等奖；1997年获轻工系统优秀科技期刊一等奖；中国期刊方阵“双效”期刊国外数据库收录：中国科学引文数据库《日本科学技术振兴机构中国文献数据库》《农业与生物科学研究中心文摘》食品科技文摘皇家化学学会系统列文摘北大2011版核心期刊《化学文摘（网络版）》中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）北大2004版核心期刊北大2008版核心期刊
食品与发酵工业
Food and Fermentation Industries
&核心期刊 |
期刊简介：本刊为食品工业专业性科技情报刊物。报道国内外食品与发酵工业领域最新科研成果、实用技术及发展趋势。主要有研究报告、生产与科研经验、综述与专题评论等栏目。读者对象为食品与发酵行业的有关人员。
2011年 第02期目录
研究报告(1) 董秀萍[1,2];朱蓓薇[1,2];祁立波[3];郑杰[2];张爽[1];姜丹[1]会讯(6) 研究报告(7) 谢银珠;沈微;王正祥会讯(10) 研究报告(11) 姚晶[1];任婧[2];吴正钧[2];王荫榆[2];郭本恒[1,2]信息窗(16) 研究报告(17) 龙祯;阮奇琚;孔祥珍;张彩猛;华欲飞;江波(21) 陈源源[1,2];石贵阳[1,2];王正祥[1,2](24) 靳蓉[1,2];顾正彪[1,2];洪雁[2];程力[2];李兆丰[2](31) 李海龙 付晓燕 陈鹏 Cherif I K Diop 谢笔钧 孙智达(37) 刘鹏飞;董海洲;侯汉学;刘传富;任洪廷信息窗(40) 研究报告(41) 温研;赵新淮(46) 胡静荣(50) 吴炜亮[1];杨恒[1];朱文亮[2];周勇[2];熊娟[1];郑建仙[1](57) 林日辉;许丽莉;农勉;张陆成(62) 姚兴存;蒋栋磊;盘赛昆;舒留泉(65) 赵习妲;李进才(70) 李志英;程丽丽生产与科研经验(73) 刘素稳;侍朋宝;李汉臣;李军;高海生(78) 刘欢;贺连斌;魏静;马中苏(82) 曾晓漫[1];刘倍毓[1];钟耕[1,2];彭佳莹[1];夏玉红[1]信息窗(86) 生产与科研经验(87) 刘晓菲;程春生;覃宇悦;孙莎;张智宏(91) 金红星;史建波;成文玉;莒晓艳(94) 周玉恒;陈海珊;蔡爱华;覃香香;张厚瑞(99) 齐香君;徐婷婷;张雯;冉登元信息窗(102) 生产与科研经验(103) 刘楠楠;陈雪峰;刘俊杰(107) (108) 石启龙;赵亚;杨晓丽;王锡海;郑亚琴(112) (113) 陈娟[1];阚建全[2];张荣[1];唐俊妮[1](120) 马荣山;卢媛;阎安婷综述与专题评论(125) 朱道辰[1];吕正凤[2];刘杏荣[2];王成福[3](130) 陈海桂[1];顾楠[1];刘美艳[1];赵国华[1,2](134) 刘美艳[1];宋会歌[1];陈海桂[1];赵国华[1,2]政策 法规 标准(138) 综述与专题评论(139) 齐士朋;徐尔尼;罗玉芬;巫小丹分析与检测(144) 江伟[1];兰玉倩[1,2];黄毅[3];薛洁[1];张五九[1](150) (151) 李芬芬;张本山(155) 陈荀;张晓利;刘书亮信息窗(159) 分析与检测(160) 孙晓霞;赵占民;刘道亮;张峻峰(165) 陈常颂;张应根;钟秋生;陈荣冰(172) 周敏;燕廷;滕久委;唐书泽(176) 姚俊[1];孙荣斌[2];魏钦俊[1];曹新[1];鲁雅洁[1](179) 徐莉[1];潘丽[2];禢开智[1](182) 杨俊;王文辉;李翼;王齐;孙晓东;朱艳琴分离与提取(186) 王春霞[1];路福平[1];刘逸寒[1];杜连祥[1];李明润[2](191) 魏涛;何培新;封盛雪;魏东芝(195) 乔德亮[1,2];陈乃富[1,2];张莉[1,2];陈科[1,2]信息窗(199) 分离与提取(200) 刘齐;刘爱红;孙美玲;李孚杰(205) 孙兆远;侯会绒(210) 刘树兴[1];侯屹[1];李祥[2];刘禹呈[2]信息窗(213) 分离与提取(214) 王宏海;戴志远;翁丽萍;杨荣华;张燕平;卢延斌贮运与保鲜(218) 许丽[1];尹京苑[2];姚良辉[1];何惠霞[3];方毅[3];高海燕[1]扫扫二维码，随身浏览文档
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γ-聚谷氨酸发酵及提取工艺研究
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出门在外也不愁γ-聚谷氨酸作为药物载体的缓释性能及靶向修饰研究--《天津科技大学》2009年硕士论文
γ-聚谷氨酸作为药物载体的缓释性能及靶向修饰研究
【摘要】：
顺铂(Cis-dichlorodiammineplatinum,DDP)是临床上应用最为广泛的一种抗癌药物之一。由于顺铂在体内很快会和蛋白结合而失效,且铂半衰期很长,体内毒性大,存在严重肾毒性、因此临床应用受到限制。
本文介绍了制备γ-聚谷氨酸-D-半乳糖酯化衍生物-顺铂复合物[Pdy(γ-glutamicacid)-D-galactose esterifiable derivative-Cisplatin Complex Compound,γ-D~+-DDP]的方法,并考察其生物活性。通过生物发酵获得大分子γ-聚谷氨酸[Poly(γ-glutamic acid),γ-PGA]具有水溶性,生物可降解性,无毒性。利用酸降解得到可以作为药物载体的小分子γ-PGA,分子量为20Kda-70Kda。实验以γ-PGA作为药物载体,DDP作为模型药物,D-半乳糖作为靶向修饰剂。利用MTT法检测γ-D~+-DDP复合物体外抗肿瘤作用;利用HPLC检测其体外缓慢释放游离顺铂效果,同时,复合物的体内靶向分布实验在KM鼠以及建立的H_(22)荷瘤鼠模型中进行。利用乳酸脱氢酶试剂盒,HE组织切片染色,观察脏器受损伤情况;应用RT-PCR检测肾脏损伤情况。
制备的γ-D~+-DDP复合物,该复合物载药率达9.4%-9.8%;体外释放实验表明顺铂可以从γ-D~+-DDP复合物持续而缓慢的释放下来。在8h释放率达到了80%,12h后开始平缓。
MTT毒性分析和HE染色结果均表明γ-D~+-DDP复合物对人肝癌细胞BEL-7402有显著的抑制作用。对于正常的肝肾细胞,同等药物浓度情况下,比游离顺铂毒性要低。
γ-D~+-DDP复合物体内毒性分析与体内抗肿瘤活性结果均表明γ-D~+-DDP的体内毒性明显要比游离DDP低,且具有良好的抗肿瘤活性。荷瘤鼠通过γ-D~+-DDP复合物给药治疗后,平均成活时间延长。此外,当荷瘤鼠给药γ-D~+-DDP复合物7.5mg/kg治疗时,肿瘤被显著地抑制,其中约35%的荷瘤鼠肿瘤基本消失。
γ-D~+-DDP复合物体内靶向性分析结果表明:注射γ-D~+-DDP复合物后,小鼠肝脏中DDP浓度显著增加而肾脏中DDP分布明显减少,减少了肾毒性,肝靶向作用明显。而且通过检测乳酸脱氢酶和透明质酸释放情况,发现γ-D~+-DDP对于小鼠肝脏肾脏保护作用明显,未造成明显的损伤。
因此,γ-D~+-DDP复合物是一种有效的抗肿瘤药物,具有潜在的临床应用价值;生物发酵获得的γ-聚谷氨酸可用于药物载体,赋予药物新的特点。
【关键词】：
【学位授予单位】：天津科技大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2009【分类号】：R944【目录】：
ABSTRACT5-9
1 前言9-23
1.1 研究意义9
1.2 γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的性质与结构9-11
1.3 γ-PGA的应用11
1.4 γ-PGA的生产菌株11-12
1.5 γ-PGA的应用领域12-17
1.5.1 γ-PGA水溶胶12
1.5.2 γ-PGA在农业中的应用12
1.5.3 γ-PGA在食品工业中的应用12-13
1.5.4 γ-PGA在环保领域的应用13
1.5.5 γ-PGA在医药领域的应用13-15
1.5.6 肿瘤特异性靶向药物载体的研究进展肿瘤靶向治疗的涵义15-17
1.6 γ-PGA其他用途17-19
1.7 γ-PGA的生产方法19-21
1.7.1 化学合成法19
1.7.2 微生物的发酵法19-21
1.8 γ-PGA的提取与纯化21
1.8.1 有机溶剂沉淀法21
1.8.2 化学沉淀法21
1.8.3 膜分离法21
1.9 本课题的研究意义及研究内容21-23
2 材料与方法23-35
2.1 实验材料23-25
2.1.1 菌种与肿瘤细胞株23
2.1.2 主要药品23-24
2.1.3 仪器与设备24-25
2.1.4 主要培养基25
2.2 实验方法25-35
2.2.1 培养方法25
2.2.2 发酵产物的提取纯化25-26
2.2.3 发酵产物的结构鉴定26
2.2.4 小分子量γ-聚谷氨酸的制备26
2.2.5 酯化反应程度检测26
2.2.6 γ-聚谷氨酸-D-半乳糖酯化衍生物-顺铂复合物(γ-D+-DDP)载药量测定26
2.2.7 γ-D+-DDP复合物体外释放研究26-27
2.2.8 γ-D+-DDP复合物抗肿瘤活性研究(MTT)及凋亡形态学HE染色27-30
2.2.9 γ-D+-DDP复合物体内生物学实验30-34
2.2.10 小鼠肝细胞(肾细胞)的原代取材培养34-35
3 结果与讨论35-61
3.1 药物载体γ-PGA的制备35
3.2 用凝胶色谱柱检测小分子产物的分子量35-36
3.3 发酵产物的结构鉴定36-39
3.3.1 γ-PGA的紫外扫描光谱分析36-37
3.3.2 γ-PGA红外光谱分析37-38
3.3.3 γ-PGA核磁共振光谱分析38-39
3.4 γ-D+-DDP复合物的制备39-43
3.4.1 正交设计及结果39-41
3.4.2 γ-D+-DDP复合物载药量的测定41-42
3.4.3 γ-D+-DDP复合物体外释放研究42-43
3.5 γ-D+-DDP复合物体外生物学活性研究43-46
3.5.1 γ-D+-DDP复合物细胞毒性研究(MTT)43-45
3.5.2 HE染色结果45-46
3.6 γ-D+-DDP复合物复合物体内生物学活性46-61
3.6.1 γ-D+-DDP复合物体内抗肿瘤活性研究46-47
3.6.2 γ-D+-DDP复合物体内毒性分析47-49
3.6.3 γ-D+-DDP复合物体内靶向性分析49-61
4 结论61-63
5 展望63-64
6 参考文献64-71
7 攻读硕士学位期间论文发表情况71-72
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