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云芝糖肽介导活化的人外周血单个核细胞体外抗乙肝病毒作用
【摘要】:
研究目的:中药云芝糖肽(PSP)作为一种免疫调节剂,已经广泛应用于慢性乙型肝炎及肿瘤等免疫紊乱或免疫功能低下的疾病中。但对云芝糖肽免疫调节机制及作用原理的研究不充分;本实验采用PSP体外与健康者的外周血单个核细胞(PBMC)共培养,观察经PSP作用后的PBMC对HepG2.2.15细胞分泌HBV的影响,以探讨PSP体外对乙肝病毒的抑制作用的机制。
研究方法:无菌条件下采集健康人肝素抗凝外周静脉血,淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC),与10mg/ml的云芝糖肽10μl共培养,分为两组:PBMC组;PSP+PBMC组。培养72h之后,将经云芝糖肽体外处理的PBMC按1:1的比例与HepG2.2.15细胞一同孵育,分为4组:第1组:未处理组(未经PSP处理的PBMC+HepG2215细胞组);第2组:处理组(经PSP处理后的PBMC+HepG2215细胞组);第3组:PSP组(PSP+HepG2215细胞组);第4组:空白对照组(HepG2215细胞组)。4天之后收集培养上清,分装保存于-20℃备用,采用雅培化学发光微粒免疫分析(CMIA)定量检测上清中HBsAg、HBeAg的分泌,采用实时荧光定量PCR法检测培养上清中HBV-DNA载量。
结果:云芝糖肽与HepG2.2.15细胞共培养组的HBsAg、HBeAg、HBV-DNA抑制率与对照组无明显差异;云芝糖肽本身不能直接抑制HBV复制。而经云芝糖肽介导活化的PBMC却能显著减少HepG2.2.15细胞的HBsAg、HBeAg的分泌;其中对HBsAg的抑制作用处理组和未处理组的差异具有统计学意义,而对HBeAg的作用,处理组的抑制率高于未处理组,但无明显统计学差异。云芝糖肽介导活化的PBMC对HepG2.2.15的HBV-DNA无明显抑制作用。
结论:云芝糖肽在体外可通过活化外周血单个核细胞,显著的减少HepG2.2.15细胞对HBsAg、HBeAg的表达从而抑制HBV复制;但云芝糖肽对HepG2.2.15细胞HBVDNA的复制无明显抑制作用;
【学位授予单位】:南京中医药大学【学位级别】:硕士【学位授予年份】:2010【分类号】:R512.62
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云芝糖肽对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠Th1/Th2平衡的影响
【摘要】:目的:观察云芝糖肽(PSP)对环磷酰胺(Cy)所致免疫抑制小鼠Th1/Th2平衡的影响。方法:18只雄性Balb/c小鼠随机分为3组,每组6只。PSP组予以125 mg·kg-1·d-1的云芝糖肽溶液灌胃,正常对照组及模型组予以生理盐水灌胃作为对照,连续25 d。用药第17天和第21天除正常对照组外均予以腹腔注射环磷酰胺制备小鼠免疫抑制模型,观察小鼠脾组织IL-2、IL-4、T-bet、GATA-3 mRNA相对表达变化。结果:各组小鼠脾组织IL-2、T-bet mRNA相对表达水平之间无明显差异(P0.05);模型组小鼠IL-4、GATA-3 mRNA相对表达水平明显高于正常对照组及PSP组(P0.05);正常对照组与PSP组的IL-2/IL-4及T-bet/GATA-3水平相比无统计学差异(P0.05),但均明显高于模型组(P0.01)。结论:云芝糖肽可以纠正免疫抑制机体IL-2/IL-4、T-bet/GATA-3的偏移状态,促进机体Th1/Th2的平衡稳定状态,发挥免疫保护作用。
【作者单位】:
【基金】:
【分类号】:R965
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