小肠上皮内淋巴细胞在抵抗鼠伤寒沙门氏菌感染中的作用及机制探讨--《山东大学》2011年硕士论文
小肠上皮内淋巴细胞在抵抗鼠伤寒沙门氏菌感染中的作用及机制探讨
【摘要】：目的
肠道免疫系统对于维持肠道粘膜的稳态发挥着重要作用,它既要保护机体免受病原菌的入侵,又要对肠道中的共生菌保持耐受,其区分共生菌群和致病微生物的机制至今仍未得到阐明。肠道上皮内淋巴细胞(iIELs)镶嵌在肠道上皮细胞间,对粘膜免疫应答的调节起着重要作用。iIELs被认为是一群高度活化的大颗粒淋巴细胞,可以迅速地对早期感染产生免疫应答。
本研究选用一种肠道致病菌鼠伤寒沙门氏菌,观察小鼠经口感染后其iIELs不同亚群的表型变化,并以肠道共生菌之一大肠杆菌为对照,探究在致病菌感染过程中发挥主要抵抗作用的iIELs亚群,并探讨其抗感染的机制,以便于进一步研究在肠道感染过程中免疫应答及免疫病理的发生机制,进而为肠道感染及肿瘤等疾病的治疗提供新的策略和思路。
1.小鼠灌胃感染鼠伤寒沙门氏菌,建立肠道感染模型,HE染色检测伤寒感染后小肠粘膜形态变化。
2.MTT法检测伤寒感染后iIELs对鼠T淋巴瘤细胞系YAC-1、鼠结直肠癌细胞系MCA-38及鼠小肠上皮细胞(IECs)杀伤能力的变化。
3. RT-PCR检测伤寒感染后iIELs杀伤相关分子基因水平的表达变化；Real-TimePCR检测伤寒感染后小肠上皮细胞Qa-1及NKG2D相关配体基因水平表达的变化。
4.小鼠体内阻断NKG2D后检测小肠组织中伤寒菌的负载量。
5.流式细胞术检测伤寒感染后iIELs各亚群及IECs的表型变化。
6.免疫磁珠法分选CD8+TCRγδ+iIELs亚群,检测伤寒感染后该亚群的表型和杀伤功能的变化。
7.小鼠体内清除γδT细胞后检测肝、脾、小肠及派氏结中伤寒菌的负载量。
1.鼠伤寒沙门氏菌经口感染可引起小鼠肠炎；
2.鼠伤寒沙门氏菌感染时CD8+TCRγδ+ilELs亚群的比例增加,iIELs对肿瘤细胞及感染的肠上皮细胞杀伤活性增强；
3.鼠伤寒沙门氏菌感染可致CD8+TCRγδ+iIELs亚群表面NKG2D的表达增强；
4.鼠伤寒沙门氏菌感染可致IECs表面MULT1表达增强；
5.体内阻断NKG2D增加了伤寒菌在小肠中的负载量；
6.体内清除γδT细胞加剧了伤寒菌对机体的侵袭；
7.鼠伤寒沙门氏菌感染降低了IECs表面Qa-1b的表达水平；
8.小鼠iIELs对共生菌经口感染保持耐受状态；
9.Nodl可能参与IECs对伤寒菌的识别。
1. iIELs,尤其是CD8+TCRγδ+iIELs亚群,在小肠抵抗鼠伤寒沙门氏菌感染中发挥重要作用；
2.伤寒感染时CD8+TCRγδ+iIELs亚群表面NKG2D表达增强,肠上皮细胞NKG2D配体MULT-1表达增强,而抑制性配体Qa-1b表达下降,导致活化性信号和抑制性信号平衡的失调；
3.NKG2D及其配体的相互识别参与了CD8+TCRy8+iIELs亚群对伤寒感染的肠上皮细胞的清除；
4.肠上皮细胞Qa-1 b高表达可能是其免受iIELs攻击,保持对肠道共生菌耐受的机制之一。
【关键词】：
【学位授予单位】：山东大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2011【分类号】：R392【目录】：
中文摘要6-8Abstract8-11主要符号说明11-12文献综述12-31 1. IELs的异质性12-14 2. IELs独特的功能特点14-18 3. IELs与肠道疾病18-21 4. IELs与天然免疫和获得性免疫21-22 5. 结语22-31前言31-34材料和方法34-48 一 主要实验材料34-37 二 主要仪器设备37-38 三 主要实验方法38-48实验结果48-72 一 鼠伤寒沙门氏菌肠道感染模型建立48-52 二 鼠伤寒沙门氏菌感染后iIELs表型变化分析52-57 三 iIELs清除伤寒感染IECs的机制探讨57-71 四 IECs识别鼠伤寒沙门氏菌入侵机制初探71-72讨论72-76总结76文章创新点及意义76-77参考文献77-83致谢83-84攻读学位期间取得的研究成果84-85待发表SCI论文85-114学位论文评阅及答辩情况表114
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硕士学位论文
一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶在不同鼠伤寒沙门氏菌感染模
型中的变化及意义
姓名：张佳玲
申请学位级别：硕士
专业：儿科学（感染）
指导教师：万朝敏
座机电话号码
一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶在不同鼠伤寒
沙门氏菌感染模型中的变化及意义
师万朝敏教授
硕士研究生张佳玲
目的：研究小鼠在不同状态下感染鼠伤寒沙门氏菌时一氧化氮
NO 、诱导型一氧化氮台酶 iNOS 的变化及意义．
方法：以昆Nd,鼠为试验对象，分为四组：以硫酸链霉素灌胃建
立小鼠肠道菌群失调组，用氢化可的松腹腔注射建立免疫抑制组，单
纯鼠伤寒沙门氏菌感染组及『F常对照组。前三组经口感染鼠伤寒沙门
氏菌，然后分别在经口感染鼠伤寒沙门氏菌后1、2、4，6、12、24、
48、72小时8个时点以化学方法测量NO含量和iNOS活力，并与正
常对照组比较。采用随机区组设计方差分析的方法对结果进行分析。
结果：经口感染鼠伤寒沙门氏菌的三组小鼠肠壁组织的NO含量
和iNOS活力都升高，对照组小鼠肠壁组织无变化；肠道菌群失调组和
免疫抑制组NO含量和iNOS活性低于单纯感染组。
结’沦：小鼠经口感染鼠伤寒沙门氏菌后肠壁组织No含量和iNOS
活力升高，免疫抑制和菌群失调降低肠壁组织NO含量和iNOS活性。
关键词：鼠伤寒沙门氏菌免疫抑制菌群失调一氧化氮 No
诱导型一氧化
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一起鼠伤寒沙门菌暴发疫情快速诊断和溯源分析
【摘要】：2013年6月四川省眉山市发生一起以发热、乏力、头痛、腹泻为主要症状的暴发疫情。为快速诊断致病因子,查找污染来源,控制疫情,结合流行病学调查,采集患者、食堂员工相关样本和食堂留样食品进行检测分析,从6份病例样本检出鼠伤寒沙门菌,2份食品样本检出鼠伤寒沙门菌;来自患者和食品的鼠伤寒沙门菌菌株经XbaⅠ酶切后脉冲场凝胶电泳图谱完全一致,快速准确诊断疫情,为及时有效的控制疫情发展提供技术支持。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R155.3【正文快照】：
-15日,四川省眉山市某学校发生了一起发热、头痛、乏力、腹痛、腹泻、咽痛等症状的暴发疫情,经流行病学调查和实验室检测分析,证实为一起由鼠伤寒沙门菌污染食品引起的食源性疾病暴发疫情。鼠伤寒沙门菌是食品污染、食物中毒、水源性腹泻暴发及医院感染的常见病原
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1株藏猪源鼠伤寒沙门菌的分离与鉴定
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