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&& Marker蛋白质分子量 的 详 细 说 明
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&行业目录导航：Protein Marker预染宽范围蛋白质分子量标准（19-117KD）/6条带
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Protein Marker预染宽范围蛋白质分子量标准（19-117KD）/6条带
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Protein Marker预染宽范围蛋白质分子量标准(19-117KD)/6条带，本公司长期供应免疫组化抗体、WB抗体、免疫组化试剂盒和抗体试验所需全部相关试剂、荧光标记抗体、elisa抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、各种标记的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研实验抗体，咨询订购电话 ： ，。
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Protein Marker预染宽范围蛋白质分子量标准(19-117KD)/6条带由瑞齐生物最专业竭诚供应，RICKY生物抗体应用于WB、IHC、IF、ELISA等实验中，品质保证，提供完善的售前、售中、售后服务！欢迎来电咨询或联系在线客服！我们将竭诚为您服务！在研晶，我们坚持对产品质量作不断的评估、创新和改善以确保您对我们产品的高度信任【产品名称】：Protein Marker预染宽范围蛋白质分子量标准(19-117KD)/6条带【规 格】：0.1ml/0.2ml 【浓 度】：1mg/1ml【抗体来源】：Mouse,Rabbit【克隆类型】：polyclonal or monoclonal【产品类型】：一抗【性 状】：Lyophilized or Liquid【亚 型】：IgG【纯化方法】：affinity purified by Protein A【储 存 液】：0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide【产品应用】：石蜡切片（冰冻切片）免疫组化实验，WB，免疫荧光IF,流式等。【保存条件】：Store at -20 &C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.Protein Marker预染宽范围蛋白质分子量标准(19-117KD)/6条带报价请咨询销售工程师，应用于WB实验时的操作方法：蛋白提样品制备1、 将培养液吸入至15 ml离心管中，于2500 rpm离心5 min。2、 弃上清，加入5 ml PBS并用枪轻轻吹打洗涤，然后2500 rpm离心5 min。弃上清后用PBS重复洗涤一次。3、 用枪吸干上清后，加100 &l裂解液（含PMSF）冰上裂解30 min，裂解过程中要经常弹一弹以使细胞充分裂解。4、将裂解液4℃、12000 rpm离心5 min，取上清分装于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。5、BCA法测蛋白浓度SDS－PAGE电泳1、 玻璃板对齐后放入夹中卡紧，然后垂直卡在架子上准备灌胶。2、按前面方法配10％分离胶，加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶时，可用10 ml枪吸取5 ml胶沿玻璃放出，待胶面升到绿带中间线高度时即可。然后胶上加一层水，液封后的胶凝的更快。（灌胶时开始可快一些，胶面快到所需高度时要放慢速度。操作时胶一定要沿玻璃板流下，这样胶中才不会有气泡。Protein Marker预染宽范围蛋白质分子量标准(19-117KD)/6条带报价相关产品：Anti-Midnolin isoform Protein 1/FITC??荧光素标记中脑核仁蛋白1抗体IgG RSF-1990R ?100ug/200ugAnti-Midnolin isoform Protein 2/FITC??荧光素标记中脑核仁蛋白2抗体IgG RSF-1824R ?100ug/200ugAnti-MIF /FITC??荧光素标记巨噬细胞移动抑制因子抗体IgG RSF-1849R ?100ug/200ugAnti-MITF/FITC??荧光素标记小眼相关转录因子抗体IgG RSF-1689R ?100ug/200ugAnti-Mitofilin/IMMT /FITC??荧光素标记线粒体内膜蛋白抗体IgG RSF-1851R ?100ug/200ugAnti-MK(Midkine)??荧光素标记中期因子/肝素结合生长因子抗体IgG RSF-1852R ?100ug/200ugAnti-MKK3/FITC??荧光素标记抗丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗体IgG RSF-1633R ?100ug/200ugAnti-MKP-1/DUSP1/FITC??荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体IgG RSF-0836R ?100ug/200ugAnti-MKP-2/DUSP4/FITC??荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体IgG RSF-0424R ?100ug/200ugAnti-MLCK/FITC??荧光素标记肌球蛋白轻链激酶抗体IgG RSF-0463R ?100ug/200ugAnti-MLH1/FITC??荧光素标记错配修复蛋白1抗体IgG RSF-0412R ?100ug/200ugAnti-MMP-1/FITC ??荧光素标记基质金属蛋白酶-1抗体IgG RSF-0413R ?100ug/200ugAnti-MMP-1/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-1抗体（小鼠）IgG RSF-0423R ?100ug/200ugAnti-MMP-2/FITC ??荧光素标记基质金属蛋白酶-2抗体IgG RSF-1913R ?100ug/200ugAnti-MMP-3/FITC ??荧光素标记基质金属蛋白酶-3抗体IgG RSF-0397R ?100ug/200ugAnti-MMP-7/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-7抗体IgG RSF-2099R ?100ug/200ugAnti-MMP-8/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-8抗体IgG RSF-1344R ?100ug/200ugAnti-MMP-9/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-9蛋白抗体IgG RSF-1853R ?100ug/200ugAnti-MMP-9/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-9抗体IgG RSF-1854R ?100ug/200ugAnti-MMP-10/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-10抗体IgG RSF-0575R ?100ug/200ugAnti-MMP-11/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-11抗体IgG RSF-0414R ?100ug/200ugAnti-MMP-12/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-12/巨噬细胞金属弹力蛋白酶抗体IgG RSF-1855R ?100ug/200ugAnti-MMP-13 /FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶13抗体IgG RSF-1856R ?100ug/200ugAnti-MMP-14/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-14抗体IgG RSF-1862R ?100ug/200ugAnti-MMP-15/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-15抗体IgG RSF-0985R ?100ug/200ugAnti-MMP-16/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-16抗体IgG RSF-1377R ?100ug/200ugAnti-MMP-17/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-17抗体IgG RSF-1802R ?100ug/200ugAnti-MMP-20/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶20抗体IgG RSF-0426R ?100ug/200ugAnti-MMP-26/FITC??荧光素标记基质金属蛋白酶-26抗体IgG RSF-0945M ?100ug/200ugAnti-Moesin/FITC??荧光素标记膜突蛋白抗体IgG RSF-0945R ?100ug/200ugAnti-MOG /FITC??荧光素标记髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白抗体IgG RSF-1265M ?100ug/200ugAnti-HAS/FITC??荧光素标记鼠抗人血清白蛋白抗体IgG RSF-0774R ?100ug/200ugAnti-HAS/FITC??荧光素标记兔抗人血清白蛋白抗体IgG RSF-1061R ?100ug/200ugMouse Anti-YERSINIA PESTIS Monoclonal Anti-body /FITC??荧光素标记鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原F1单克隆抗体IgG RSF-1850R ?100ug/200ugAnti-Mouse IgA/FITC??荧光素标记兔抗小鼠IgA抗体 RSF-1882R ?100ug/200ugAnti-MPO /FITC??荧光素标记髓过氧化物酶抗体IgG RSF-0657R ?100ug/200ugAnti-MR/FITC??荧光素标记盐皮质激素受体抗体IgG RSF-1092R ?100ug/200ugAnti-MRAS/Mras/FITC??荧光素标记原癌基因M-ras抗体IgG RSF-0656R ?100ug/200ugAnti-MRP1/FITC??荧光素标记多药耐药相关蛋白1抗体IgG RSF-1422R ?100ug/200ugAnti-MRP2/FITC??荧光素标记多药耐药相关蛋白2抗体 RSF-1437R ?100ug/200ugAnti-MRP3/FITC??荧光素标记多药耐药相关蛋白3抗体IgG RSF-0818R ?100ug/200ugAnti-MRP4/ABCC4 /FITC??荧光素标记多药耐药相关蛋白4抗体IgG RSF-1848R ?100ug/200ugAnti-MRP5/ABCC5/FITC??荧光素标记多药耐药相关蛋白5抗体IgG RSF-0758R ?100ug/200ug96T/48T YJ-12589B 猪生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12590B 猪雌激素(E)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12591B 猪地塞米松(Dex)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12592B 猪D二聚体(D2D)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12593B 猪髓过氧化物酶(MPO)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12594B 猪超氧化物歧化酶(SOD)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12595B 猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12596B 猪黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12597B 猪可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12598B 猪去甲肾上腺素(NE)ELISAkit现货供应，优质低价96T/48T YJ-12599B
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中分子量蛋白Marker
海基生产的中分子量蛋白Marker是由7种纯化好的不同分子量的重组蛋白组成，分子量整齐易读，而且更接近理论计算估计的蛋白分子量值。该制品已经添加Loading Buffer成分，无需再添加Loading Buffer，直接使用即可。分子量依次为：100 KDa、80 KDa、50 KDa、40 KDa、30 KDa、20 KDa、15 KDa。经SDS-PAGE电泳后用考马斯亮蓝R-250染色可得清晰的7条带，其中40 KDa的蛋白带量加倍，为参照带。
每条带约50 ng/μl。
SDS-PAGE上蛋白分子量准确定量。
-20°C保存，避免反复冻融。
Email:&&&&&&Fax:0&&&&Tel:0&&&&北国海基生物科技有限公司&&&&黑ICP备号预染蛋白Marker&SM0671
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ALT="预染蛋白Marker&SM0671"
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PageRuler Prestained Protein
Ladder是一种三色分子量标准，含有10种蛋白，分子量范围为10-170kDa。该分子量标准含有两条参考条带，分别为70kDa的橙色参考条带和10kDa的绿色参考条带。
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*即用型-与上样缓冲液预先混合，可直接凝胶上样。
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【求助】９５ｋｂ蛋白ＷＢ有Ｍａｒｋｅｒ没目的条带
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电泳：ｍａｒｋｅｒ跑的很漂亮，平齐，散开。
转膜：用的０.２２的膜，电流原来用１００ＭＡ，２ｈ，没有条带，ｍａｒｋｅｒ明显。
电流用３００ＭＡ，９０ｍｉｎ，结果一样，也没条带！
一抗４°过夜。二抗是红外二抗，湿转。
背景很淡，就是没条带。
胶做过考马斯染色，条带也是很清晰。
我个人觉得：１.蛋白有问题？
２．转膜问题最大？
３.膜应换成０.４５？
查看完整版本请点击这里：
49888 ( 10:33:36)
问题出在膜上，0.22的膜只用于20KD以下的蛋白。否则都是用0.45的膜。另外，电流是不超过0.85mA/cm2，半干转不超过2h。
yonger ( 10:36:16)
问题出在膜上，0.22的膜只用于20KD以下的蛋白。否则都是用0.45的膜。另外，电流是不超过0.85mA/cm2，半干转不超过2h。
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错。。022膜比0.45的膜截留的蛋白更多，包括你的95KD的蛋白。
几点意见仅供参考和排除
1）抗体质量如何？--换另外公司抗体试一下
2）目的蛋白是否存在细胞特异性表达？--换几种不同细胞试一下
3）蛋白提取问题？--是否对照例如actin，出条带
4)转膜问题？丽春红染一下
qianqin1977 ( 10:37:00)
1.抗体是用的进口抗体，单抗或者多抗，封闭时是否不同，我拿的牛奶封闭的。
2.我提取的是组织的蛋白
3.我跑了两块胶，一块考马斯染色，条带很漂亮，脱色后很清晰，另一块接着孵抗体，什么也没。
4.我的内参是actin，买了，但是还没做。
5.我想知道转膜条件有什么需要改善的吗？
yonger ( 10:37:31)
QUOTE:原帖由 qianqin1977 于
10:37 发表
1.抗体是用的进口抗体，单抗或者多抗，封闭时是否不同，我拿的牛奶封闭的。
2.我提取的是组织的蛋白
3.我跑了两块胶，一块考马斯染色，条带很漂亮，脱色后很清晰，另一块接着孵抗体，什么也没。
4.我的内参是actin，买了，但是还没做 ... 由于你的考马成功，说明是从砖模开始的步骤之后又问题，砖模是否成功，一个简单的立春红染色就能区分好坏。如果进一步actin以及其他内参能够检测条带，说明你的抗体有问题或者该蛋白不在该组织表达。进一步可以在其他文献已经报道的阳性细胞或组织中检测，若仍然你的抗体不工作，说明该抗体有问题。95KD的蛋白属于很好检测的分子量范围。相比细胞，组织蛋白的提取容易降解。
从你目前提供的信息看，只能分析到此，你需要提供进一步的验证试验。更为简单的办法是，让有经验的实验室同行帮你做一次，就能判断是操作还是抗体带来的问题。
qianqin1977 ( 10:38:40)
QUOTE:原帖由 yonger 于
10:37 发表
由于你的考马成功，说明是从砖模开始的步骤之后又问题，砖模是否成功，一个简单的立春红染色就能区分好坏。如果进一步actin以及其他内参能够检测条带，说明你的抗体有问题或者该蛋白不在该组织表达。进一步可以在其他文献 ... 我转膜后，那转膜后的胶考马斯然后，什么也没有。组织蛋白保存条件怎么样比较好呢？
yonger ( 10:39:05)
QUOTE:原帖由 qianqin1977 于
10:38 发表
我转膜后，那转膜后的胶考马斯然后，什么也没有。组织蛋白保存条件怎么样比较好呢？ 如果两块胶是同时做的，而且转膜后的那块胶又进行靠马染色，染色显示没有蛋白，表明胶上的转过去了，是否过度转，穿过了膜的可能性有，不大，因为你给的转磨条件够用。总之一句化，简单点需要完成两件事，一个是检测内对照，然后看看丽春红染色。。若两者都没有问题，就是抗体问题，那个公司的抗体，不要告诉我是santa cruz的？是否提高了抗体的浓度？总之你看到的这个现象是一次结果还是多次试验？如果是一次，那不确定的因素更多。另外你做wb的经验多吗？我的意思是是否有检测其他蛋白成功的经历。在我看来WB的关键就是抗体的质量。
我的组织蛋白直接冻在-20度，很长时间-80度。。
daod ( 10:42:44)
我认为你可以用预染Marker一起来跑胶，这样在你转膜过程结束后，可以看胶上是否残留有预染Marker。若预染Marker已经转到膜上了，则胶残留很少的或者没有Marker了。这时你可以在膜上看到Marker。这样能够验证你转膜的条件是否合适，并根据转膜后观察到的结果来调整转膜参数。
至于你的抗体，我认为目前并不认为它有问题，毕竟商品化的东西，出问题的很少，除非你买来后，处置方面造成抗体出问题。
至于组织蛋白的保存条件，我认为，若你新提取的，直接拿来做WB就可以了，不用过于担心这方面问题。若蛋白提取出来，马上就不能用了，或者太过于娇气，需要多么复杂的条件来保存，那么做实验已经没有意义了。这样做出来的实验，结果经常会很不稳定。
换个人做或者让有经验的人用你现在的试剂做一下，我想也可能会发现你具体实验中的小问题。
至于膜的问题，我认为0.22微米的膜确实能留下更多的蛋白，分子量更大的蛋白。
jujuba ( 10:43:09)
我认为可能是上样的蛋白含量有些低，你上100微克每孔试试。MARKER转的好，说明相应的目的蛋白也应该差不多，蛋白应该存在问题，你不行重新体蛋白，用新提的上样试一下。
u234 ( 10:43:40)
1.抗体是用的进口抗体，单抗或者多抗，封闭时是否不同，我拿的牛奶封闭的。
2.我提取的是组织的蛋白
3.我跑了两块胶，一块考马斯染色，条带很漂亮，脱色后很清晰，另一块接着孵抗体，什么也没。
4.我的内参是actin，买了，但是还没做。
5.我想知道转膜条件有什么需要改善的吗？
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小小建议：
1.你封闭液的浓度是多少？如果是磷酸化的抗体，可以用3%BSA封闭试试。一般的可以用5%的脱脂奶粉封闭1个小时。
2.组织蛋白提取应该没问题，蛋白定量后可以增加上样量。
3.优化WB各个步骤后还是不出，很有可能是抗体的问题。Abcam的抗体还有遭投诉的呢（周围一起做实验的好几个人订的不出结果，后来投诉之后退货的），也别太迷信进口抗体。
4.做个actin吧，一般很好出。
5.我们实验室一般半干恒流转，按面积*0.8，时间根据分子量大小，一般我做的130kDa的转2个小时，70，80的转90分钟，转得还OK吧！
仅供参考！呵呵！
7437654 ( 10:45:10)
硕士时经常做WB实验，确实很郁闷 ，有时候找了好久也找不到解决办法，说说自己的心得呵：
1、胶做过考马斯染色，条带也是很清晰-----这说明你的组织蛋白没有问题，前面的问题就可以排除了，主要是转膜和孵育的问题；
2、95KD的蛋白属于很常用的蛋白分子量，对于这种分子量稍大的蛋白，一般我用0.45的膜半干转膜，时间为1h10min,电压为膜面积的2.5-3倍；分析楼主，可以用立春红检验下蛋白是否转膜转过去了，以便排除转膜的问题；
3、最好用已经确定无误的阴极，阳极液，这个也很重要，曾经我就出现了这种问题；
4、相对来说3%-5%的脱脂奶粉封闭1h效果不错（个人观点）；
5、仔细阅读抗体说明书，有时候抗体只能用BSA或是奶粉的一种来稀释；
还是得慢慢摸索，别人说的只是参考，希望你能早日找到症结所在，实验顺利啊！！！
u234 ( 10:46:33)
我做的是94kb大小的目的蛋白，用的是250MA，90MIN，跑出来的还可以，就是有杂带，你可以试试这个条件~
u234 ( 10:47:11)
1：用BSA封闭试试，我原来做过比较，用5%的脱脂奶粉封闭比用BSA背景干净，但也会使量少的蛋白不能显色，所以我会在寻求表达的时候用BSA，要背景干净结果好时用脱脂奶粉
2：丽春红染色可以证明你转膜是否成功
3:做了简单的ELISA证明你的抗体没问题
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