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第3章_病毒的复制
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TCID50法病毒滴度计算公式
Reed & Muench Calculator1. Enter the starting dilution 2. Enter the dilution factor 3. Enter the volume tested per well This is your calculated dilution series: 4. Enter the total #
of wells examined per dilution 5. Enter the # of positive wells for each dilution These values are calculated automatically: initial dilution: dilution factor: ml: total wells: positive wells: negative wells: cum pos: cum neg: % infected: prop dist: TCID50: TCID50/ml: 0..009 1.00E-04 12 12 0 36 0 100.00 0Created November 20, 2004 by Brett D. Lindenbach, PhD Modified January 27, 20081.00E-05 12 12 0 24 0 100.00 06. This is your TCID50 7. This is your TCID50/ml1.00E-06 12 10 2 12 2 85.71 0.5 3.16E-07 3.51E+081.00E-07 12 2 10 2 12 14.29 -2.51.00E-08 12 0 12 0 24 0.00 01.00E-09 12 0 12 0 36 0.00 0This calculator may be freely distributed in an unmodified form. If you find it useful, have a suggestion, or would like to reference this calculator in your work, pleasesend me feedback.
半数组织培养感染剂量法测定淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒优势 分析连亨宁 成都军区...使用 Reed-Muench 公式计算病毒滴度为 1.47 X 107 TCID50/ml≈1.01 X 107 ...TCID50计算_建筑/土木_工程科技_专业资料。滴度实验 病毒TCID50 测定(组织半数...A 法为参考书上标准的操作方法 B 法参照书将液体量减少后的结果 病毒稀释液...PFUs=0.7×TCID50 的滴度 (二) 技术应用 蚀斑技术可以应用于分离病毒的克隆...℃二氧化碳培养箱培养,数天后分别统 计蚀斑数,用 Karber 法计算该血清的蚀斑...病毒滴度测定_生物学_自然科学_专业资料。病毒滴度测定有很多名词都用来描述病毒...TCID50 生物学方法 10 天 可变 2.5×1011 昆腾公司标准方法 以 VP 法测得的...l 可使 50%的细胞发生病变。 2、Karber 法 病毒液稀释度 10 -1 出现 CPE...TCID50 与 PFU 换算: PFUs=0.7×TCID50 的滴度 PFU:plaque forming unit,...病毒感染力的滴定( 的测定) 实验 病毒感染力的滴定(TCID50 的测定)滴度:在半...五、TCID50 的计算方法 1、Reed-Muench 两氏法 、 出现 CPE 孔数 8 8 7...10倍倍比稀释病毒原液(10-1,10-2…10-10等),根据病毒大致 的滴度确定稀释...计算方法 1) Spearman-Karber 法 LgCCID50 /0.2ml= - (X0 - d/2 + ...2、准备 96 孔板,但只用中间的 60 个孔,若病毒滴度高,则准备两块板。 5 ...病毒TCID50测定方案 暂无评价 4页 1下载券 使用TCID50法测定病毒滴... 暂无评...瓶或管感染的病毒稀释倍数,按计算出该病毒液的 TCID50 TCID50 是指组织培养物...] 说明:我们已经证实,TCID50 法测到的滴度 d=log10 值比标准空斑法高 0....因此建议也可使用 TCID50 法。 MOI :multiplicity of infection,感染复数。传统...根据形成 neo 基因抗性克隆的多少来计算病毒滴度,因此滴度的单位就用 cfu/ml ...
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病毒滴度测定
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【求助】关于腺病毒MOI的请教
我想测定腺病毒Ad-lacZ对前列腺癌细胞LNCaP的最佳MOI,测定时以不同MOI(10:1,30:1,60:1,90:1,120:1),以上的比值不知道是指病毒颗粒数/细胞数，还是PFU/细胞数。我的腺病毒Ad-lacZ滴度以pfu/ml为单位的，如果MOI是指病毒颗粒数/细胞数,怎样换算（1pfu＝？病毒颗粒）。请哪位仁兄不吝赐教，谢谢！我也搞不清这个MOI的问题，说明书上是指病毒颗粒数/细胞数，那么病毒颗粒数与分光光度计上测得的滴度又是什么关系呢？要按说明书上MOI测定法，感染293细胞3天后细胞完全出现CPE的MOI植为10-20，那么MOI值只能是个大概值而不能精确吗？MOI是multiplicity of infection的缩写，中文译为感染复数，一般认为MOI是一个比值，没有单位，其隐含的意思是 pfu number/cell,即病毒颗粒数/细胞数。如果你的pfu/ml值为1*109（9次方），那么1毫升病毒液中有10的9次方 个病毒颗粒。如果你知道病毒滴度（pfu/ml）的值，那就简单些啦（因为病毒滴度（pfu/ml）的值得出是比较麻烦的），MOI=（pfu/ml的值）乘（取的病毒液体积）再除以你要转染的细胞数。通常对于一种细胞的最佳MOI是需要自己摸索得出的，这就是为什么要将已知病毒滴度来稀释成各个不同的浓度来转染，目的只是为了得出一个最合适的MOI，通常范围以100-400为多，当然也各有差异。建议你认真看看下面文章中的MOI相关解释，就会彻底明白。
重组AAV病毒的转染方法.pdf (169.1k)MOI不能用病毒颗粒来计算，因为病毒颗粒（viral particle）这个指标中包括了无活性的病毒，比如无基因组的空壳，还有纤突脱落的病毒，这些无活性的病毒在整个病毒液中占绝大多数。MOI必须用病毒的活性单位来计算，比如IU或者pfu。我们一般用IU，因为IU的测定比较稳定，而pfu的测定重复性太差，中检所就是以IU作为腺病毒活性滴度的官方单位。MOI 是multiplicity of infection的缩写，中文译为感染复数。一般认为MOI是一个比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfu number/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中，含义是感染时病毒与细胞数量的比值。 然而，由于病毒的数量单位有不同的表示方式，从而使MOI产生了不同的含义。A ,能产生细胞裂解效应的病毒例如腺病毒、单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu表示病毒数量，因此其MOI的含义与传统的概念相同。B ,对于某些病毒如AAV病毒，无法用pfu表示病毒的数量，而是采用TU、IU、病毒颗粒（viral particles, v.p）或基因组数量（vector genome,v.g.）来表示病毒数量。采用TU或IU，MOI的含义便是TU number/cell 或IU number/cell。采用v.p.，MOI的含义便是v.p. number/cell 。采用v.g，MOI的含义便是v.g. number/cell。 可以将上述不同的MOI 表示方式分为2种： 1） 以活性单位表示病毒数量，如pfu, TU, IU。这时MOI的含义是指平均每个细胞感染病毒的活性单位数。 2） 以病毒颗粒或基因组数表示病毒数量，如v.p. 或v.g. 。这时MOI的含义是指平均每个细胞感染病毒的病毒颗粒或基因组数。 值得一提的是，上述2种不同的MOI 表示方式在含义和数值上都有所不同。前一种是传统意义上的MOI，后一种MOI表示方式的含义更为简化和直观，也逐步被一些研究者采用。 MOI的测定: 其原理是基于病毒感染细胞是一种随机事件，遵循Poisson分布规律，可计算出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数（MOI）。其公式为： P = 1- P(0) ,P(0) = e-m 或m = -InP（0）。 其中： P 为被感染细胞的百分率 P(0)为未被感染细胞的百分率 m为MOI值 例如，如果要感染培养皿中99%的培养细胞，则：P(0) = 1% = 0.01m = -In(0.01)= 4.6 pfu/cell。由此可以看出，由于病毒特性和研究者习惯的不同，MOI的单位由原来约定俗成的pfu number/cell变成多种表示单位。在阅读文献和写作论文时，应注意MOI的具体含义和单位。什么是ＩＵ?什么是ＩＵ?受益不少，谢谢！IU infection unit的缩写，感染单位TU transduction unit的缩写，转导单位
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