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腺相关病毒AAV简介及应用
腺相关病毒AAV简介及应用
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一、腺相关病毒简介腺相关病毒（Adreno-Associated Virus, AAV）是微小病毒科（Parvoviridae）家族的成员之一。这一家族成员是一类微小、无被膜及具有二十面体结构的病毒。病毒颗粒的直径在20～26nm之间，含有大小在4.7~6kb之间的线状单链DNA基因组。它的复制和增殖依赖于辅助病毒的存在。作为一种基因导入系统，AAV病毒载体具有安全性好，免疫原性低，能感染分裂细胞和非分裂细胞，能介导基因的长期稳定表达等优点，因此在神经系统的体内和体外研究中，受到越来越多的关注和重视。不同病毒的生物特性比较见图1。
图1 不同病毒的生物学特性比较纽恩生物常用的AAV血清型有AAV1，2，5，6，7，8，9，rh10等，其中AAV2型是用的最早也是最广泛的类型（见表1），不过因为感染范围较窄，目前已逐渐被其他血清所替代。在这些血清型中，感染体内啮齿类动物神经元效果最好的是AAV8和AAV9型。
表1 不同血清型AAV的组织嗜亲性
胞外吸附分子
肌肉，心脏，神经
体外，神经
硫酸乙酰肝素蛋白多糖
肺，眼睛，神经
肌肉，肝脏
肝脏，肌肉，眼睛
肺,肝脏，肌肉，心脏
肋膜，神经
二、AAV在神经系统中的应用
AAV病毒载体在神经系统的体内应用具有安全、高效和毒性低等优势，非常适用于神经环路的研究。对神经环路的结构、功能和调控机制的研究是当前神经科学领域最活跃的焦点方向之一，它为深入理解神经精神疾病的发病机制，发现新的预防、诊断和治疗手段提供了科学依据。神经环路研究的关键是精确地调控某一神经环路中特定神经元，并且还面临着感兴趣的转基因或Floxed小鼠难以获得，条件性基因敲除小鼠制备过程中的成本高、耗时费力。因此，利用立体定位注射技术将携带特定基因的AAV病毒载体注射到神经系统的特定核团，已成为神经环路研究中被广泛应用的方法。
对于体外培养的神经元，无论是钙转、脂质体转染还是电转，都会有效率低、毒性大、必须对非成熟神经元操作以及导入的基因保持时间短等特点。以往主要用慢病毒（Lentivirus）载体向体外培养的神经元操作以及导入外源基因，但由于慢病毒载体的安全性和不能纯化等缺陷，近年来，越来越多的实验室开始尝试AAV病毒载体感染体外培养的神经元，并发现部分类型的AAV病毒载体可以高效地感染体外培养的各阶段的神经元并且毒性很低。
不管是在神经系统体内还是体外应用，AAV病毒载体既可以导入内源或外源基因的表达，又可以导入某内源基因的RNAi，干扰其表达。或者在Floxed 小鼠神经系统利用AAV病毒载体表达Cre重组酶，实现在病毒感染的细胞中敲除Floxed gene的表达。并且，在要表达的目标基因或RNAi 前面加上神经系统各种特异性的启动子，就可以实现目标基因或RNAi在特异性神经元中的表达。特别在近年来，随着光基因组学的快速发展，越来越多的实验室利用AAV病毒载体向特定神经环路的神经元导入光敏感通道ChR2（Channelrho- dopsin2）、NpHR（Halorhodopsin from Natronomonas pharaonis）等，控制神经元的兴奋或抑制状态，从而研究神经环路的结构、功能和调控机制。
三、AAV应用案例介绍
案例一：AAV介导shRNA定位注射在外侧缰核
结果表明：利用RNA干扰特异性地在外侧缰核降低βCaMKII分子的表达可以逆转天生抑郁大鼠模型的抑郁行为表型。 参考来源：Li K, et al Science 30 August 2013: Vol. 341 no. 6149 pp.
DOI: 10.1126/science.1240729
rAAV局部注射大脑皮层基因敲减实验
参考来源：Cao et al. Nature Medicine, published online 5 May 2013; doi:10.1038/nm.3162
rAAV玻璃体腔注射表达光遗传工具
实验结果表明：AAV2/9型对心肌感染能力最强，成年鼠的骨骼肌易感性比幼鼠更强。利用AAV转导GAA（酸性葡糖苷酶）到缺陷型小鼠，ECG检查发现PR缩短。 参考来源：Zhang et al. Proc. of SPIE , 2013. July, Vol. -1
相关实验方法
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日前，国际知名安全软件评测机构AV-Test发布了2016年5月份手机安全软件测试结果，腾讯手机管家在病毒查杀、误判率等严苛测试中，凭借出色的病毒查杀能力实现常规病毒查杀率100%和实时病毒查杀率100%，并以满分和零误报的出色成绩获得了AV-Test认证。[1]
AV-TEST总部位于德国马德堡，成立至已有近20年历史，AV-Test测试是世界权威的第三方独立测试之一，一直以海量病毒库检测、独立客观的检测过程和严格的标准著称，是业界公认的世界级杀软的对决平台。AV-TEST测试完全基于病毒样本库自动进行，最大限度的减少了人为因素对测试结果的影响，其测试结果被国际安全业界公认为独立客观。[2]
AV-Test在反病毒研究领域有超过15年经验。AV-TEST研究所是一个IT安全和反病毒研究领域上国际领先和独立的服务提供者。世界三大著名杀毒软件测试机构AV-Comparatives、AV-TEST以及Virus Bulletin周四发表联合声明，一致谴责安全厂商奇虎360(NYSE:QIHU)，原因是奇虎360提交给测试机构用于比较和认证测试的产品与该公司提供给用户和客户的产品在行为表现上有重大差异。[3]
声明称，三大测试机构将撤销今年目前为止授予奇虎360产品的所有认证和评级，在今后的测试中将坚持更为开放和公平的原则，以确保用户获得最为准确的信息。[3]
AV-Test反病毒测试有限责任公司（The AV-Test GmbH）由安德烈亚斯·马克思（Andreas Marx），奥利弗·马克思（Oliver Marx）和吉多·哈比希特（Guido Habicht）2004年在马格德堡创立。
在这之前，AV-Test只是马格德堡大学的一个科研项目。AV-Test在反病毒研究和数据安全领域已经有15年的历史经验。
AV-Test提供反病毒产品测试、技术含量测试以及跟踪监测计算机安全产品的长期检测率。
杀毒测试正日趋复杂，为了让测试更有意义，测试必须客观的执行。大量恶意软件样本的存放必须要力求安全和保险。AV-Test已经处理了140TB的庞大测试数据。
欧洲、美国、加拿大、澳大利亚和亚洲的杀毒厂商和一些国际性的杂志，定期的将他们的杀毒产品测试交给AV-Test公司进行测试。安德烈亚斯·马克思（Andreas Marx）作为流行病毒清单组织(WildList)的报告人，他的调研和测试为云安全和其他杀毒公司的发展提供了真实性的检测。
AV-Test在反病毒评测领域有超过15年历史，一直以海量病毒库检测、独立客观的检测过程和严格的标准著称。包括、、在内的国外知名杀毒，
长期以来一直参加该项测试，AV-Test也因此被业界公认为世界级杀软的对决平台，到日止国内的和以及都参加过AV-Test评测。
AV-TEST评测包括防护、性能和易用性三个项目，每个项目满分6分，总分为18分。[4]
“易用性”是衡量软件核心竞争力的重要标准，直接反映用户体验的舒适度。一般说来，易用性可分为有效性、效率和满意度三个维度。其中“有效性”是指杀毒软件在帮助用户完成特定任务过程中，能准确执行并达到较高的完整程度;“效率”是指杀毒软件在执行特定命令过程中，正确执行数量和完成程度与所使用资源(如时间)之间的比率;“满意度”是指用户在使用杀毒软件过程中所感受到的主观满意和接受程度。
日，国际权威评测机构AV-TEST发布2015年2月份最新评测报告，360公司自主研发的QVM人工智能引擎以18分满分夺冠。这是亚洲杀毒软件首次在国际级别的评测中获得满分。[5]
腾讯电脑管家TAV自主引擎版本和多引擎版本均顺利通过测试。[6]
AV-Test评测选取了国内外21款最新版本的产品软件，充分展示了参评产品的病毒查杀能力和防护能力，其中腾讯手机管家（WeSecure）在内的6款国内产品参与评测。[7]
．Techweb．[引用日期]
．中国新闻网．[引用日期]
．凤凰科技．日[引用日期]
．中国新闻网．[引用日期]
．科技日报[引用日期]
．pchome．[引用日期]
．TechWeb．[引用日期]只需一步，快速开始
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电脑已多次蓝屏，无论换多少种都会发生程序错误。用旧版专杀时杀出过Abnormal service.但是重启后还在。新版的多次专杀得出的病毒结果都一样，明明该病毒上次已经杀掉了呀。现在专杀，都用不了，程序错误，重装也不行。都是0x7fffffff。还有，经常出现Explorer.EXE应用程序错误。现在，电脑时不时就冒出一些程序错误的窗口。
以下是System Repair Engineer 的扫描结果，请有经验的朋友帮忙寻找病毒在哪？如何正确处理病毒。我有兵刃，暂时没被破坏，初学者不敢随便使用。再不行只能重装电脑了。
21:52 上传
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& &在这个网页下载金山AV终结者2011专杀
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日志并没看出明显异常啊。
蓝屏的话，建议提供dump文件。请在蓝屏时按两次scroll lock键（听人说的，不知有没有用），重启后到windows\minidump下找有没有文件。
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呵呵，保密~~~~~
本帖最后由 mumu1 于
23:06 编辑
这是前几次杀毒重复杀出的数据，他说删除了，但是后来杀了几次都在，给予参考。
2,0110607,,c:\program files\stormii\codec\ff_libmpeg2.dll,,删除成
功,,16,,4a20c4fb4dceb3,,
2,0110607,,c:\program files\stormii\codec\ff_unrar.dll,,删除成
功,,16,,3b8fc8d69fe,,
2,0110607,,c:\program files\stormii\codec\ff_vfw.dll,,删除成
功,,16,,fa32e31ee852df3df57c3620
2,0110607,,c:\program files\stormii\codec\ff_wmv9.dll,,删除成
功,,16,,3fe3fc15e463aeba4e42c4,,
2,0110607,,c:\program files\stormii\codec\mkzlib.dll,,删除成
功,,16,,a5ee4284dff89d897aa08898afc0dec8,,
2,0110607,,c:\program files\ati technologies\ati.ace\graphics-previews
-common\ticker.ax,,删除成
功,,16,,faa2cc7d37d,,
2,0110609,,D:\Keniu Shadu\Ave\kavesd.dll,,重启删
除,,16,,eba421f61cf7,,
2,0110609,,D:\Keniu Shadu\Ave\kavessi.dll,,重启删
除,,16,,586cbc463e51be67a853f2bbe86b9b8a,,
2,0110609,,D:\Keniu Shadu\Ave\kavesd460500.tmp,,重启删
除,,16,,eba421f61cf7,,
2,0110609,,D:\Keniu Shadu\Ave\kavessi460796.tmp,,重启删
除,,16,,586cbc463e51be67a853f2bbe86b9b8a,,
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