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122例艾滋病患者合并乙肝病毒 丙肝病毒感染的临床流行病学研究
&&&&&&&&&　　近期，安徽省濉溪县人民医院感染疾病科研究人员发表论文，旨在研究在抗逆转录病毒药物治疗（HAART）状态下HIV/AIDS患者合并乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）的流行状况以及相关血清生化和病毒学特征。研究指出，HIV感染者HBsAg阳性率低于普通人群，HIV/HCV合并感染的比例显著高于普通人群。HIV/HCV合并感染与单纯HCV感染者血清生化及病毒学改变相似。该文发表在2015年第0
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　　近期，安徽省濉溪县人民医院感染疾病科研究人员发表论文，旨在研究在抗逆转录病毒药物治疗（HAART）状态下HIV/AIDS患者合并乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）的流行状况以及相关血清生化和病毒学特征。研究指出，HIV感染者HBs&Ag阳性率低于普通人群，HIV/HCV合并感染的比例显著高于普通人群。HIV/HCV合并感染与单纯HCV感染者血清生化及病毒学改变相似。该文发表在2015年第05期《安徽医学》杂志上。
　　对122例正在接受HAART治疗的HIV/AIDS患者采集血标本，使用酶免法（MEIA）检测乙肝五项指标（HBs&Ag、抗-HBs、HBe&Ag、抗-HBe、抗-HBc）、肝功能，应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗体，运用RT-PCR法对丙肝病毒抗体阳性标本以及表面抗原和/或核心抗体阳性标本分别进行HCV-RNA以及HBV-DNA测定。以43名单纯HCV感染者作为对照组进行研究。
　　122名HIV/AIDS患者，乙肝五项指标全阴性97例（78.86%），表面抗原阳性3例（2.46%），表面抗体阳性者总计19例（15.57%），单纯核心抗体阳性者3例（2.46%）。HCV抗体阳性84例（68.85%），84例HCV抗体阳性标本中HCV-RNA阳性58例（69.05%），HIV/HCV/HBV合并感染者为0。HIV/HCV合并感染组HCV-RNA水平与感染者性别，CD4+细胞数水平无明显差异（P&0.05）；HIV/HCV合并感染组与单纯HCV感染组HCV-RNA水平、肝功能异常率无明显差异（P&0.05）。
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邮&&&&箱：乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒快速检测的方法研究--《武汉工业学院》2012年硕士论文
乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒快速检测的方法研究
【摘要】：目的针对乙肝病毒(HBV)不同亚型，及丙型肝炎病毒(HCV)分别建立环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,简称LAMP)方法，实现对HBV的快速检测及基因分型，对HCV的快速检测。
方法分别设计HBV B、C、D三亚型基因组特征序列的LAMP引物，优化反应条件，建立特异灵敏的HBV亚型LAMP检测方法，并与Real-time PCR方法进行临床样本检测结果比对。设计HCV病毒基因组特征保守序列的LAMP引物，优化反应条件，建立特异灵敏的HCV LAMP检测方法，并与临床使用方法进行临床样本检测结果比对。
结果LAMP法在数十分钟内有效地检测出HBV的B、C、D三亚型；其中，HBV-B亚型的检出限为17拷贝；C亚型的检出限为25拷贝；D亚型的检出限为10拷贝。与Real-time PCR法相比，灵敏度提高1000倍左右。同时，LAMP法可以有效地在两小时左右快速检测出血清中的HCV病毒信息；其灵敏度为180拷贝数/mol。
结论LAMP法可实现HBV的快速检测及分型及HCV的快速检测，具有高特异度和高灵敏度，完善后可用于临床检测诊断。
【关键词】：
【学位授予单位】：武汉工业学院【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2012【分类号】：R440【目录】：
摘要4-5ABSTRACT5-9第1章 绪论9-21 1.1 肝炎病毒总论9 1.2 DNA 肝炎病毒9-12
1.2.1 乙肝病毒基因结构及致病机理9-10
1.2.2 乙肝病毒基因分型及临床意义10
1.2.3 乙肝病毒现有鉴定方法简介10-12 1.3 ＲＮＡ肝炎病毒12-14
1.3.1 丙型肝炎病毒一般结构12-13
1.3.2 鉴定丙型肝炎病毒临床意义13
1.3.3 丙型肝炎病毒现有鉴定方法简介13-14 1.4 环介导等温扩增方法14-19
1.4.1 LAMP 引物的设计14-15
1.4.2 LAMP 法的基本原理15-19 1.5 环介导等温扩增的优点19 1.6 环介导等温扩增的应用前景19-20 1.7 研究目的20-21第2章 肝炎病毒目的基因筛选及引物的设计21-35 2.1 乙肝病毒的基因序列比对及目的基因的选择21-26
2.1.1 亚型共同序列选择23-24
2.1.2 亚型序列特异性的选择24-26 2.2 乙肝病毒三亚型 LAMP 引物的设计26-29 2.3 丙肝病毒基因序列的比对及目的基因的选择29-30 2.4 丙肝病毒 LAMP 引物的设计30-33 2.5 讨论33-35第3章 乙肝病毒分型检测及鉴定35-48 3.1 材料35-36
3.1.1 带病毒血清35
3.1.2 主要试剂35
3.1.3 主要仪器35-36 3.2 方法36-39
3.2.1 DNA 模板的提取36-37
3.2.2 模板检测及条件优化37-38
3.2.3 HBV 各亚型 LAMP 引物间比较特异性检测38
3.2.4 HBV 各亚型 LAMP 法灵敏度检测38
3.2.5 HBV 临床样本的 LAMP 法检测38-39
3.2.6 LAMP 产物的荧光染色肉眼观察39 3.3 结果39-46
3.3.1 ＤＮＡ模板的提取结果39
3.3.2 LAMP 反应条件的优化39-40
3.3.3 LAMP 特异性40-41
3.3.4 LAMP 的灵敏度41-44
3.3.5 HBV 病毒临床样本 LAMP 检测44-45
3.3.6 LAMP 产物的荧光染色45-46 3.4 讨论46-48第4章 丙肝病毒检测及鉴定48-57 4.1 材料48-49
4.1.1 带病毒血清及菌株材料：48
4.1.2 主要试剂48
4.1.3 主要仪器48-49 4.2 方法49-52
4.2.1 cDNA 模板的制备49-50
4.2.2 LAMP 反应及条件优化50-51
4.2.3 特异性试验51
4.2.4 灵敏度试验51-52
4.2.5 HCV 临床样本的 LAMP 法检测52
4.2.6 染色肉眼检测试验52 4.3 试验结果52-56
4.3.1 LAMP 法条件的优化52-53
4.3.2 LAMP 法扩增的特异性检测结果53-54
4.3.3 LAMP 法灵敏度的检测结果54-55
4.3.4 与临床诊断结果进行比较55
4.3.5 肉眼检测结果55-56 4.4 讨论56-57第5章 结论和建议57-59 5.1 结论57 5.2 建议57-59参考文献59-63致谢63-64攻读学位期间的研究成果64
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