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SD胎鼠海马神经元
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SD胎鼠海马神经元
SHCFN-00001
取自18.5天SD胎鼠大脑海马组织，用SD胎鼠神经元细胞完全培养基贴壁培养，直接原代冻存。
细胞特性： 1、细胞活力 产品复苏率& 50% 培养两天就能清晰的看到轴突与树突，培养时间可长达13-16天 2、细胞纯度 70%以上细胞MAP2, &-tubulin III (神经元细胞标记物)阳性
质量控制： 本产品经过了细菌、真菌、支原体检测。
运输保存： 采用干冰保存运输 收到细胞时，若干冰已经完全融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按指定条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
产品承诺： SD大鼠胎鼠海马神经元细胞的体外培养周期有限。建议使用本公司配套的培养基和正确的培养方法来解冻、培养，以此保证细胞具备培养状态。
用途： 本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗等其他方面。标志物_百度文库
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&&&&影响神经干细胞定向分化因素的研究进展
&&&&方鑫 , 王芙蓉 , 姜亚平
&&&&【中图分类号 】R741 . 05
【文献标识码 】A
【文章编号 】 (752 02
&&&&基金项目: 国家自然科学基金资助项目 ()
&&&&作者单位: 430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医
&&&&院神经内科
&&&&通讯作者: 王芙蓉
&&&&神经干细胞 (NSC)具有自我更新和多分化潜能属性 ,可
&&&&分化产生神经元、 星形胶质细胞和少突胶质细胞 ,这使得 NSC
&&&&移植替代神经系统疾病中丢失的细胞成为可能。NSC在胚胎
&&&&和成体中枢神经系统均存在。NSC移植在体内环境下 (尤其
&&&&是非神经发生区域 )绝大多数分化成胶质细胞 (星形胶质细
&&&&胞 ) ,有可能会加重胶质瘢痕形成。在中枢神经系统疾病的
&&&&NSC细胞替代治疗策略中 , NSC分化成合适的细胞类型显得
&&&&格外重要。现就影响 NSC定向分化的因素作一综述。
影响 NSC向神经元分化的因素
&&&&1 . 1 Nurr1 Nurr1是一种细胞核受体 ,其对中脑多巴胺能神
&&&&经元发育是必需的。Sousa等[ 1 ]
&&&&研究发现原代培养的表达
&&&&Nurr1的 NSC,提高了中脑多巴胺能神经元存活 ,而且使其更
&&&&能对抗氧化应激。在发育中的多巴胺能神经元 ,Nurr1调控黏
&&&&蛋白 2 C基因表达。在离体和 Nurr1基因敲除小鼠观察到存在
&&&&低水平的黏蛋白 2 C mRNA。微点阵分析黏蛋白 2 C基因敲除小
&&&&鼠显示 Nurr1阳性细胞数目增加 ,在孕 11 . 5 d时形成酪氨酸
&&&&羟化酶 (TH) 阳性的多巴胺能神经元。这表明黏蛋白 2 C延缓
&&&&Nurr1阳性神经前体细胞分化为多巴胺能神经元。该实验表
&&&&明 Nurr1是 NSC向多巴胺能神经元分化和存活的关键调控因
&&&&子。Shi m等[ 2 ]
&&&&从成体大鼠脑室下区和白质分离出神经前体
&&&&细胞 ,用 Nurr1过表达后促进神经前体细胞分化产生有功能
&&&&的多巴胺能神经元。Ki m等[ 3 ]
&&&&详细分析在发育中的腹侧中
&&&&脑 ,显示多巴胺祖细胞区域有 Ngn2和 Mash1表达 ,它们是碱
&&&&性螺旋 2 环 2 螺旋 ( bHLH)转录因子。过表达 Ngn2或 Mash1诱
&&&&导来源于中脑腹侧的神经祖细胞出现神经发生 (产生新的神
&&&&经元 )。但即使在分裂素存在的情况下 ,Ngn2抑制细胞分裂
&&&&及神经元产生。Mash1在保留神经发生潜力的同时 ,仍然允
&&&&许神经祖细胞分裂。过表达 Ngn2或 Mash1来源的新生神经
&&&&元没有表现出多巴胺神经元标记物 (如 TH)阳性 ,Nurr1过表
&&&&达以剂量依赖方式增加了 TH水平 (但亦包含神经元和胶质
&&&&细胞 ) ,提示 Nurr1是 TH神经元非特异性激活。同时转染
&&&&Nurr1及 Ngn2或 Mash1导致小部分 TH阳性神经元产生。该
&&&&实验得出结论:多种转录因子促使神经祖细胞首先向神经元
&&&&分化 ,然后再向多巴胺表型分化 ,然而可能需要更多的因子产
&&&&生完全有功能的多巴胺神经元。
垂体腺苷酸环化酶激活肽 ( PACAP)
已经有证据表明
&&&&PACAP在神经系统发育中起作用。Hir ose等[ 4 ]
&&&&研究发现
&&&&PACAP对神经干 /祖细胞分化有细胞系选择决定作用。通过
&&&&观察神经球 (NSC悬浮生长形成神经球 )的形成发现 , PACAP
&&&&抑制碱性成纤维成长因子 ( bFGF)诱导增殖 (自我更新 )。
&&&&PACAP增加了微管相关蛋白 2 (MAP2)阳性神经元数目 ,但没
&&&&有影响巢素 ( nestin,NSC标记物 )、 胶质纤维酸性蛋白 (GFAP,星形胶质细胞标记物 )及 CNP (少突胶质细胞标记物 )阳性细
&&&&胞数量。该实验表明 PACAP抑制神经祖细胞的自我更新能
&&&&力 ,而诱导其向早期神经元分化。
生长因子和神经营养因子
Tarasenko等[ 5 ]
&&&&研究不同的
&&&&生长因子单独或联合运用 [如表皮生长因子 ( EGF)、 白血病抑
&&&&制因子 (L IF)、 bFGF等 ]对人类 NSC分化的影响。发现层黏
&&&&连蛋白促进 NSC向神经元分化;在含有 EGF和 bFGF组或
&&&&EGF、 bFGF和 L IF组 NSC显著分化产生胆碱能神经元。该实
&&&&验结果提示人类 NSC有很高的可塑性 ,其增殖和分化依赖不
&&&&同的生长因子。Ren等[ 6 ]
&&&&研究不同的培养基如何影响 NSC分
&&&&化成胆碱能神经元。NSC在含有 bFGF和肝素的培养基中培
&&&&养 ,可以检测到胆碱乙酰基转移酶 (ChAT)阳性细胞 ,从而证
&&&&实 NSC分化为胆碱能神经元。当层黏连蛋白加入到含肝素
&&&&的培养基中 ,出现更多的 ChAT阳性细胞。该实验说明在培
&&&&养基中 bFGF和肝素对于 NSC分化为胆碱能神经元是必须
&&&&的 ,层黏连蛋白在此过程中是重要的积极因素。Calza等[ 7 ]
&&&&免疫毒素 192 I gG2 皂草素损毁大鼠基底前脑胆碱能系统 (制成
&&&&Alzhei mer病损毁动物模型 ) ,并由脑室给予 EGF或 bFGF,为
&&&&期 14 d。14 d后给予神经生长因子 (NGF) ,为期 14 d,同时由
&&&&饮食途径给予维甲酸 1个月。发现 EGF和 bFGF均能增加脑
&&&&室下区增殖细胞 (内源性 NSC)数目。经水迷宫测验显示大鼠
&&&&症状改善 ,海马胆碱乙酰转移酶活性增强。该实验表明分裂
&&&&素、 维甲酸、 NGF处理可以作用于内源性 NSC,达到胆碱能神
&&&&经元脑修复。 Ishii等[ 8 ]
&&&&发现在脊髓损伤中 ,用抗睫状神经营
&&&&养因子 (CNTF)抗体阻滞 CNTF可以减少移植的 NSC分化 ,产
&&&&生星形胶质细胞 ,促进皮质脊髓束纤维 (宿主轴索 )再生。
维甲酸信号途径
在发育中的脊髓 ,维甲酸信号调控有
&&&&丝分裂期后的运动神经元 ......
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【求助】关于MAP2
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这个帖子发布于9年零305天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位老师：想请教下，MAP2到底是否能作为神经元的标志物？跟神经元的分化和成熟有什么关系？请大家多多指教啊！谢谢
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1、神经元树突标志物：微管相关蛋白Microtubule-associated protein-2(MAP-2)：Neuron Dendrite-specific MAP; protein found specifically in dendritic branching of neuron 是组成神经元细胞骨架的重要组成成分，包括：MAP5、MAP1.2和MAP1三种不同类型。在神经系统发育、形成和再生过程的不同时期扮演着重要的角色。其中MAP5为早期微观相关蛋白，在胚胎期和新生动物大脑中有较高表达，并随大脑的逐渐成熟而退化，对神经元突起的生长具有重要的引导作用。MAP2包括三种亚型：MAP2a、MAP2b和MAP2c。其中MAP2b和MAP2c出现较早。随着年龄的增长MAP2被组织蛋白酶D所降解，在不同类型的神经元中表达量存在差异。2、神经元早期标志物：tubulin
：Neuron Important structura identifies differentiated neuron Nervous System微管蛋白为球形分子, 分为两种类型:a微管蛋白(a-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin), 这两种微管蛋白具有相似的三维结构, 能够紧密地结合成二聚体, 作为微管组装的亚基，能够聚合并且参与细胞分裂。a和β微管蛋白各有一个GTP结合位点, 位于a亚基上的GTP结合位点, 是不可逆的结合位点，结合上去的GTP不能被水解，也不能被GDP替换。位于β亚基上的GTP结合位点结合GTP后能够被水解成GDP，所以这个位点又称为可交换的位点(exchangeable site,E位点)。β-III Tubulin又名tubulin β-4，是原始神经上皮中所表达的最早的神经元标志物之一。其作为神经元特有标志物，被广泛应用于神经生物学研究；Noggin：
Neuron A neuron-specific gene expressed during the development of neurons；Neurosphere Embryoid body ： ES Cluster of primitive neural cells in culture of differentiating ES indicates presence of early neurons and glia。3、神经元标志物：Neurofilament(NF)： Neuron Important structura identifies differentiated neuron是神经元所特有的中间丝蛋白(10-12nm)，分为NF-L(68 kDa)、NF-M(160 kDa) 和NF-H (200 kDa)三种不同类型的蛋白。它们与其他中间丝蛋白相互聚合形成网络，是构成神经元骨架的主要成分。发育过程中，Neurofilaments上的一些不同的位点会出现磷酸化和糖基化，而这些改变对于其参与细胞内物质转运的生物学功能具有重要的意义；NeuN：成为识别神经元标准的免疫细胞化学标志物；NSE ：Neuronal specific enolase。4、突触标记物：Synaptophysin ：Neuron Neuronal protein indicates connections between neurons；synaptotagmins：是位于突触囊泡上的膜蛋白，在由Ca2+ 信号介导的突触囊泡转运和泡吐过程起着重要的作用。Ca2+ 与synaptotagmins结合引起突触囊泡中神经递质的释放。另外，有研究证实：Ca2+依靠的synaptotagmins与相关受体（如neurexins、syntaxinAP2）之间的相互作用会导致蛋白激酶C的激活。作为突触特异性标志物，synaptotagmins在科研中被广泛使用。
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wh2008 编辑于
丁香园荣誉版主
更多信息请参考本版精华：[原创]神经生物学研究中的常用标志物
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1、神经元树突标志物：微管相关蛋白Microtubule-associated protein-2(MAP-2)：Neuron Dendrite-specific MAP; protein found specifically in dendritic branching of neuron 是组成神经元细胞骨架的重要组成成分，包括：MAP5、MAP1.2和MAP1三种不同类型。在神经系统发育、形成和再生过程的不同时期扮演着重要的角色。其中MAP5为早期微观相关蛋白，在胚胎期和新生动物大脑中有较高表达，并随大脑的逐渐成熟而退化，对神经元突起的生长具有重要的引导作用。MAP2包括三种亚型：MAP2a、MAP2b和MAP2c。其中MAP2b和MAP2c出现较早。随着年龄的增长MAP2被组织蛋白酶D所降解，在不同类型的神经元中表达量存在差异。2、神经元早期标志物：tubulin
：Neuron Important structura identifies differentiated neuron Nervous System微管蛋白为球形分子, 分为两种类型:a微管蛋白(a-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin), 这两种微管蛋白具有相似的三维结构, 能够紧密地结合成二聚体, 作为微管组装的亚基，能够聚合并且参与细胞分裂。a和β微管蛋白各有一个GTP结合位点, 位于a亚基上的GTP结合位点, 是不可逆的结合位点，结合上去的GTP不能被水解，也不能被GDP替换。位于β亚基上的GTP结合位点结合GTP后能够被水解成GDP，所以这个位点又称为可交换的位点(exchangeable site,E位点)。β-III Tubulin又名tubulin β-4，是原始神经上皮中所表达的最早的神经元标志物之一。其作为神经元特有标志物，被广泛应用于神经生物学研究；Noggin：
Neuron A neuron-specific gene expressed during the development of neurons；Neurosphere Embryoid body ： ES Cluster of primitive neural cells in culture of differentiating ES indicates presence of early neurons and glia。3、神经元标志物：Neurofilament(NF)： Neuron Important structura identifies differentiated neuron是神经元所特有的中间丝蛋白(10-12nm)，分为NF-L(68 kDa)、NF-M(160 kDa) 和NF-H (200 kDa)三种不同类型的蛋白。它们与其他中间丝蛋白相互聚合形成网络，是构成神经元骨架的主要成分。发育过程中，Neurofilaments上的一些不同的位点会出现磷酸化和糖基化，而这些改变对于其参与细胞内物质转运的生物学功能具有重要的意义；NeuN：成为识别神经元标准的免疫细胞化学标志物；NSE ：Neuronal specific enolase。4、突触标记物：Synaptophysin ：Neuron Neuronal protein indicates connections between neurons；synaptotagmins：是位于突触囊泡上的膜蛋白，在由Ca2+ 信号介导的突触囊泡转运和泡吐过程起着重要的作用。Ca2+ 与synaptotagmins结合引起突触囊泡中神经递质的释放。另外，有研究证实：Ca2+依靠的synaptotagmins与相关受体（如neurexins、syntaxinAP2）之间的相互作用会导致蛋白激酶C的激活。作为突触特异性标志物，synaptotagmins在科研中被广泛使用。
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wh2008 编辑于
关于丁香园神经元标记物
神经元标记物
Patima Tanapat (patima dot tanapat at gmail dot com)
Princeton, New Jersey, United States
王秀英 (mary at labome dot com)
美国新泽西州普林斯顿合原研究有限责任公司 (Synatom Research)
//dx.doi.org/10.13070/mm.cn.3.196
更新 : ; 原始版 :
实验材料和方法
A comprehensive review of immunohistochemical markers for CNS neuronal cell types.
神经元是大脑的基本信号组件。因此，一切尝试从整体上了解大脑是如何工作的基本组成部分都要从研究功能不同的各类型神经细胞开始。为此，免疫组化标记已逐渐成为神经科学家最有价值的工具之一。利用各种细胞组分的抗体，研究者能够识别表达神经细胞表型的细胞，而且，就其形态特征和特定蛋白表达收集信息。在下面的章节中，将讨论可以区分不同神经元细胞类型的方法。此外，由于能够将神经元和其他类型脑细胞区分开来非常重要，也会简要描述这些其他类型细胞。最后，免疫组织化学作为一种工具用于检验神经元群也会有讨论，重点介绍最常用的标记，以及在选择一个标记为一个特定的研究对象时一些关键的考虑因素。大脑的细胞
神经元由四个不同形态的部分构成：细胞体（躯干）、树突、轴突和突触前末梢。这些高度特化的细胞结构使它们能够传播电信号或动作电位，是神经元之间通信的基础。细胞体是细胞代谢的中心。它包含含有细胞DNA的细胞核和其他细胞器。从细胞体延伸出两种突起。第一种类型，称为树突，接收传入的信号，而第二种类型，轴突，输出传出的信号。通常情况下，神经元有多个树突。每个树突反过来又都可以包含成千上万的棘状突起，是从其他神经元的轴突输入信号的节点。（应该指出的是轴突也可能突触于胞体或轴突上，尽管这种现象并不常见。）轴突从细胞体上叫做轴突丘的区域延伸出来，负责动作电位的传播。它最终会分为几个分支，终止于突触。尽管突触被说成是神经元之间的接触点，但细胞之间并不互相接触，而是由称为突触间隙的结构分隔开来。在每个轴突分支的末端是突触前末端，其中包含充满神经递质的囊泡。当一个动作电位到达终端，囊泡的内容物被释放到突触间隙从而与突触后细胞的进行化学通讯。神经胶质细胞
除了神经元，大脑也包含另一类称为神经胶质细胞的细胞。神经胶质细胞为神经