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西力士抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究
吉林农业大学 硕士学位论文 九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究 姓名:窦丽娜 申请学位级别:硕士 专业:中药学 指导教师:王秀全;王宝贵
九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究 摘实验目的: 探讨九味至宝胶囊: (1)对雄性小鼠力竭游泳时间和耐缺氧时间的影响;(2)对雄要性小鼠体重增长、脏器指数、肝糖原、肌糖原、血乳酸、尿素氮(BUN)等生化指标的影 响:(3)对雄性小鼠乳酸脱氢酶(LDH)、脂肪酶(LPS)、琥珀酸脱氢酶(SDH)等酶活 性的影响;(4)对去势雄性大鼠阴茎勃起功能和包皮腺、精囊腺、提肛肌等生殖器官脏器 指数的影响(5)对雄性大鼠交配能力、阴茎勃起功能和包皮腺、精囊腺、睾丸及阴茎等 生殖器官脏器指数的影响。探讨其抗疲劳、补肾壮阳的作用及其机制,为开发具有抗疲劳 及补肾壮阳作用的保健品提供实验依据。 实验方法: 药理实验前对九味药材进行质量评价,根据2005年版药典对九味药材进行水分、总 灰分、酸不溶性灰分及杂质的检查,结果九味药材均符合药典标准。 药理实验分为抗疲劳实验和补肾壮阳实验两部分。(1)抗疲劳实验采用雄性昆明种 雄性小鼠,各组小鼠均分为空白对照组(蒸馏水,CG)、低剂量组(200mg.kg~,LD)、中剂量组(400mg.kg~,油)及高剂量组(800mg.kg一,HD)等四组,连续灌胃21d,分别测定小鼠力竭游泳时间、耐缺氧时间和脏器指数;采用葸酮法测定肝糖原、肌糖原含量;测定游泳前后血乳酸的清除速率;用试剂盒测定BUN、LDH、LPS、SDH等酶活性。(2)补肾壮阳实验分为补肾实验和交配实验两部分。壮阳实验采用去势雄性大鼠,分别测定其 阴茎勃起功能和包皮腺、精囊腺、提肛肌等生殖器官脏器指数;交配实验采用正常雄性大 鼠,分别测定其交配能力、阴茎勃起功能和生殖器官脏器指数。以上两组均用Wistar雄性 大鼠,分为空白对照组(蒸馏水,CG)、九昧至宝胶囊低剂量组(0.79.kg~,LD)、中剂 量组(1.49.kg一,MD)、高剂量组(2.89.k分1,HD)及阳性对照组(中华翰皇强根胶囊) (O.29.kg一,PC),补肾实验中另设去势模型组(蒸馏水,MG),连续给药21d。 实验结果: (1)九味至宝胶囊可延长小鼠负重游泳时间及耐缺氧的时间,延缓运动小鼠疲劳的出现。LD、MD、HD各组力竭游泳时间和耐缺氧时间与CG组比较均有显著差异(KO.05)。(2)九味至宝胶囊能减少小鼠运动时的乳酸生成,促进小鼠运动后血乳酸的清除。与 CG组比较,各剂量组游泳前、游泳后、游泳后休息20rain血乳酸含量均低于CG组,具有 显著性差异(P<0.05):各剂量组小鼠游泳前后三个时间点血乳酸曲线下面积均下降,与CG组比较均有显著性差异(P<0.05)。(3)九味至宝胶囊能够增加肝糖原和肌糖原含量,各剂量组肝糖原、肌糖原含量与CG 组比较均有显著性差异(尸<0.05)。西力士http://www.xilishichina.info/ (4)九味至宝胶囊可增加肝脏指数,各剂量组的肝脏指数均高于CG组,且LD组肝脏 指数与CG组比较有显著性差异(尸<0.05);各剂量组的心脏、脾脏、肾脏指数与CG组比较均无显著性差异(胗0.05);各组小鼠体重增长量与CG组比较无显著性差异(尸>O.05)。(5)九味至宝胶囊能够增加BUN含量、LDH、LPS、SDH等酶活性。LD、MD组小鼠 运动后BUN含量与CG组比较有显著性差异(JP<0.05);HI)剂量组血清中LDH、LPS、SDH 的活性与CG组比较均有显著性差异(P<0.05),LD、MD组的LPS、SDH的活性与CG组 比较均有显著性差异(P<0.05)。 (6)九味至宝胶囊能够缩短去势大鼠阴茎耐电刺激勃起的潜伏期,提高去势雄性大鼠 的包皮腺、精囊腺和提肛肌的脏器指数。@LD、MD剂量组阴茎勃起潜伏期与MG组比较 有显著性差异(P<O.05),HD剂量组与MG组比较有极显著性差异(P<0.01),HD剂量组 与PC组比较有显著性差异(尸<O.05);②各剂量组的包皮腺指数与MG组比较均有显著性差异(尸<O.05),与PC组比较均有显著性差异(尸<O.05);LD组的精囊腺指数与MG组比较有显著性差异(P<0.05),MD、HD组的精囊腺指数与MG组比较均有极显著性差异(尸<0.01),MD、HD组的精囊腺指数与PC组比较均有显著性差异(尸<O.05);LD、凇组的提肛肌指数与MG组比较有显著性差异(尸<0.05),HD组的提肛肌指数与MG组比较有 极显著性差异(尸<O.01),与PC组比较有显著性差异(尸<O.05);PC组的精囊腺、提肛肌 指数与MG组比较有显著性差异(尸<O.05)。 (7)九味至宝胶囊能够提高雄性大鼠的交配能力、包皮腺、精囊腺、睾丸、阴茎的脏 器指数,以及缩短大鼠阴茎耐电刺激勃起的潜伏期。①各剂量组的捕捉潜伏期与CG组比 较均有显著性差异(尸<0.05);LD组的射精潜伏期、捕捉次数、射精次数与CG组比较均 有显著性差异(尸<0.05),HD剂量组的射精次数与CG组比较有显著性差异(尸<O.05); PC组的捕捉潜伏期、射精潜伏期、捕捉次数、射精次数与CG组比较显著性差异(尸<0.05); ②各剂量组的阴茎勃起潜伏期与CG组比较均有显著性差异(尸<0.05),LD、HD组与PC 组比较有显著性差异(尸<O.05);PC组的阴茎勃起潜伏期与CG组比较有显著性差异(尸 <O.05);③LD、MD剂量组的包皮腺、精囊腺及阴茎指数与CG组比较均有显著性差异(P<O.05),HD剂量组的包皮腺、精囊腺及阴茎指数与CG组比较有极显著性差异(尸<0.01);LD剂量组的睾丸指数与CG组比较有显著性差异(尸<O.05),MD、HD剂量组的睾丸指数 与CG组比较均有极显著性差异(尸<O.01);PC组的精囊腺、睾丸及阴茎指数与CG组比较 均有显著性差异(尸<0.05),包皮腺指数与CG组比较无显著性差异(尸>O.05)。结论:(1)九味至宝胶囊可延长小鼠负重游泳时间和耐缺氧时间,增加肝糖原、肌糖原储备, 降低尿素氮的代谢水平,减少运动中血乳酸的生成,促进运动后乳酸的清除,增加乳酸脱 氢酶、琥珀酸脱氢酶及脂肪酶的活性,具有一定的抗疲劳作用。 (2)九味至宝胶囊可缩短去势大鼠阴茎耐电刺激勃起的潜伏期,以及提高去势雄性大Ⅱ西力士http://www.xilishichina.info/ 鼠的包皮腺、精囊腺和提肛肌指数,提高雄性大鼠的交配能力、包皮腺、精囊腺、睾丸及 阴茎指数,以及缩短大鼠阴茎耐电刺激勃起的潜伏期,具有一定的补肾壮阳作用。 九味至宝胶囊做为一种新型的保健品,具有抗疲劳及补肾壮阳的作用。关键词:九昧至宝胶囊,抗疲劳,补肾壮阳,肝糖原,肌糖原III西力士http://www.xilishichina.info/ Studyonthe Function of Anti.fatigue and Reinforcing Kidney to Strengthen Yangof Jiuweizhibao Capsule and it’S MechanismAbstractobjective:The experiment is investigating the effectsofjiuweizhibaocapsuleonthe times of the load swimmingonand the endurance of inhibition hypoxia of the male small mice,the effects index and contents of hepaticincreasing weight and organ lactic acid and Blood Ureglycogen andeffectsonmuscle glycogenandbloodnitrogen(BUN)metabolism,the andSuccinatethe activities of Lactate dehydrogenase(LDH)and Lipase(LPS)ondehydrogenase(SDH),the andeffectsthe latent period of penile erectionandpreputial glandindexandseminal vesicle indexlevatoraniindex of emasculated male mice,the effects on the capabilityof copulation testicles indexandlatent period ofpenileerectionandpreputialglandindexandseminal vesicle index andand penisindex of normal maleonmice.Throughthese examinations,wewantto observe theeffects ofjiuweizhibao capsuleoftheanti―fatigueandreinforcing kidney to strengthenonyang and the probabilitymechanism,toprovide basic experiments for the researchexploiting new health care sample?Methods: Weevaluate water,total ash,acid infusibility ashandbefore the inpurity of nine kinds of materialsexperiment,on the basis of 2005 pharmacopoeia.Nine kinds of materials accord with pharmacopoeiacriterion.Theexperiment is divided into two parts,one isanti-fatigue and anothercapsuleis reinforcing the kidney to continuouslystrengthenyang.Theexperimentofanti-fatigue:Jiuweizhibaoisintragastricadministrated for 21 days at different doses oflow(LD,200mg.k91),mid(MD,400rag.kg.1),high(HD,the miceal e800mg.k91)on andthemaleKuming(Ⅺ旧mice.ThereaRerand organmeasured the times of the load swimmingenduranceof inhibition hypoxiaindex of small mice;The contents of hepatic glycogenareandmuscle glycogenBUN metabolism strengthenaremeasured by anthrone method;The micethe activities of LDH,LPSsacrificed to measure experiment ofblood lacticacid andandandSDH.Thereinforcing the kidney toyangis also divided intotwo parts,oneis strengthenyang and another is copulation.Emasculatedmale big miceindexal emeasured the latent period of penile erection and preputial gland index and seminal vesicleonandlevator ani indexthe experiment of reinforcing the kidney.Normal male big micearemeasuredthe capability of indexcopulationand latentperiod ofOllpenile erectionandpreputialglandindex and seminal vesicleand testis indexandpenis indexthe experiments of copulation.Jiuweizhibao capsule werecontinuously intragastric administrated for 2 1 days at different doses ofIow(LD,0.79.kg-1),middle(MD,1.49.kg"1),high(HD,2.89.k91),control group(Water,CG)andpositivecontrol(zhonghuahanhuangqianggencapsuleX0.29。培1,PC)on male big mice on the experiment of reinforcing the kidney to strengthen yang,thereIV西力士http://www.xilishichina.info/ isanemasculated model group(Water,MG)on the experiment of strengthen yang.Results:(1)Jiuweizhibao capsule Can prolong the times of the load swimming and the endurance of inhibitionhypoxia to resist emergence of fatigues.They all havesignificantdeviation comparedLD,MD andHD to CG俨<0.05).(2)Jiuweizhibao capsulecandecline theproduction of bloodlactic acidandtheclearancerateof bloodlactic acid.Blood lactic acid of all doses groups were lower than CG before swimming and after swimmingand even after relaxing twenty minutes,having under cBrve of blood lactic acid of all dosessignificantdeclineddeviation compared toCG俨<o.05);Theareagroupsobviously,having significant deviation comparedtoCG㈣.05).(3)Jiuweizhibao capsulegroups were significant highercanincrease thecontentsof hepatic glycogen and muscleglycogen,alldosesthanCallCG㈣.05).increase liver index,all doses groups were(4)Jiuweizhibao capsuleof LD doseshigher thanandCGThe liver indexgroup Was significant higher than CG俨如.05);Hearthavenoindex,Spleen index weight of all dosesKidney index of all havenogroupssignificant deviation(P>O.05);Increasinggroupsignificantdeviation compared toCG∽0.05).to(5)Jiuweizhibao capsule Can increase the contents of BUN and the activity of LDH,LPS and SDH.Thecontentsof BUN ofLD,MD group have significant deviation comparedCG(尸<0.05);Theactivity ofof LPSLDH,LPSandSDH of HI)group have groupsignificantdeviation compared toCG俨如.05),The activityandSDH ofLD,MDhave significant deviationcancompared to CG(尸<o.05).of penile erection(6)Jiuweizhibao capsuleand seminal vesicle index erection of LDshorten latentperiodandincrease preputialglandindexandlevator ani index of emasculated male havemice.①Thelatent period of penile group has extremelyand MD groupsignificantdeviation compared toMG(尸<o.05),HDtosignificant deviationgland indexdeviationto MG(尸<0.0 1);HD group has significant deviationPCgroup(P<0.05);②Preputialof all doses group havesignificantdeviationcompared toMG伊如.05),having significantgroup hascompared PC group(P<0.05);Seminal vesicle index of LDtosignificantdeviationcomparedMG妒<o.05),MD and grouphaveHDgroup have extremely significant deviation(P<0.0 1);Levator anideviationindex of LD and MDsignificantcomparedtoMG(尸<o.05),HD grouphas extremelysignificant deviationSeminal vesiclecompared toCG(尸<o.01),having significantdeviation compared to PCgroup(P<O.05); MGindex and Levator ani index ofPCgroup havesignificantdeviation compared to(尸<o.05).(7)Jiuweizhibao capsulevesicle indexcanincrease the capability of copulation and preputial gland index and seminalindex ofmale mice andand testisindex andpenisCanshorten latentperiodofpenileerection.①Latent period of catch of all dosesgroup have significantdeviation compared toCG(尸<O.05);Latent periodV西力士http://www.xilishichina.info/ ofejaculation,timeofof catch,time ofejaculationof LD group have significant deviation compared to CG(尸<0.05),timeejaculation of liDofgroup have significant deviation compared to ofCG(尸<0.05);Latentperiodof catch,;Latentperiodejaculation,timecatch,time of ejaculationof PC group havesignificant deviationcompared comparedtOCG(尸<0.05);②The latent periodMG(尸<0.05),LD,HDof penile erection of all doses group havesignificant deviationtogroup havesignificantdeviation compared to PCgroup妒<0.05);Thelatent period of penile erection of PC grouphavesignificant deviation compared to index of LDMG(尸<o.05);③Preputialhaveglandindex and seminal vesicle index andtopenisand MD groupsignificantdeviationcomparedindex ofCGp如.05),HI)grouphas extremely significant deviation compared to CGC尸<O.0 1);Testisgroup hasMD and HDgroup have extremelysignificant deviationcomparedtoCG(尸.<0.01),LDindexsignificantdeviation compared toCG(尸《O.05);Seminalcomparedtovesicle indexand penisandtestis index of PCgroup havesignificantdeviationCG(P叼.05),Preputial glandindex of PC group have nosignificant deviationConelusion:compared to CGpO.05).anti-fatigne,throughprolonging the times of the loadstore(1)Jiuweizhibao capsule has the function ofswimming and the endurance of inhibition hypoxia increaseing heart index and liver index and glycogendeclining the content of BUN lactic acidandproduction of blood lactic acidandincreaseing theclearancerate ofbloodandthe activity of LDH and LPSand SDH.(2)Jiuweizhibao capsule has the function of reinforcing the kidney to strengthen yang,throughshortening latentperiodof penile erection,increasing preputialglandindexandseminal vesicle indexandlevator ani index of emasculated male mice,increaseing the capability of copulationandpreputial ofglandindexand seminalvesicle index testicles index andpenisindexandshortening latentperiodpenileerection ofnormal male mice.Wecallcome toaconclusion thatjiuweizhibancapsule,asanew kind of healthcaresample,has thefunction ofanti-fatigue and reinforcing thekidney to strengthenyang.KeyWords:Jiuweizhibao capsule,Anti―fatigue,Reinforcing kidneyHepaticto strengthen yang,glycogen,MuscleglycogenVI西力士http://www.xilishichina.info/ 独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他 人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构 的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。,学位论文作者签名:缓签字日期:≯一i多年多月,‘日关于论文使用授权的说明本人完全了解吉林农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权 保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或 扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意吉林农业大学可以用不同方式在不同 媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 学位论文作者签名:袭研签字日期:≯咖艿年,月,彳日导师签名:锵聃j0X f) h 9≯每n户Dvlk西力士http://www.xilishichina.info/ 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳,补肾壮阳作用及其机型幽第一章 前言1.1选题依据随着现代生活节奏的加快,社会竞争的日益加剧,很多人因为工作和学习的压力大导 致身心疲惫,易疲劳成为困扰人类健康的重大问题。也正因如此,具有缓解疲劳,抗疲劳 作用的保健食品及药品越来越受到人们的欢迎。 长白山地区是我国著名的四大中药材基地之一,主产人参、鹿茸、五味子、菟丝子等 道地名贵药材。其应用已有2000多年历史。人参具有大补元气,复脉固脱,补脾益肺, 生津安神,益智滋补等功效;鹿茸具有“壮肾阳、益精血、强筋骨"和治疗女性“宫冷不 孕’’等功效;五味子具有益气生津、敛肺滋肾、止泻、涩精、安神的作用,常作为方药中 的佐药用于治疗多种疾病;菟丝子为旋花科一年生寄生草本植物菟丝子或大菟丝子的成熟 种子,具有补阳益阴,固精缩尿等功效。采用高科技手段,将这些药材开发成系列保健品, 进而开发新药,是我国中药现代化科技产业(吉林)基地建设的重要内容。 《摄生总要》中的“真人保命丹"由人参、酸枣仁、自茯苓、天门冬组成。《摄生总 要》言服此方,“可敌百妇,大能保肾延年,真仙药也。一 《洞玄子》中的“秃鸡散"由肉苁蓉、五味子,菟丝子,远志、蛇床子组成。《洞玄 子》记载:“蜀郡太守吕敬大的故友,服此药,七十得三子,后掷药庭院,雄鸡啄食後连 续几天与母鸡交配啄母鸡鸡头至秃,故名。" 本研究充分利用长白山资源,将《真人保命丹》和《秃鸡散》合而为一取而加舍之, 组成新复方,由人参、鹿茸、菟丝子、五味子等九味药组成,暂定名为“九味至宝胶囊"。 本方中有益气健脾、滋阴润燥、宁志安神药各2味,补肾元阳药3味,具有抗疲劳、补肾 壮阳、健脾安神之功效。此乃阴阳互根,阴平阳秘,阴中求阳,阳中求阴,肾脾心肺兼而 调之的万全之策,绝无竭泽而渔的时弊,是人类健康急需的第三代新型男性保健品(或药品)。1.2研究进展1.2.1疲劳的概念随着信息社会的发展和经济时代的到来,生活节奏明显加快,社会竞争日益加剧,人 们工作、学习的紧张程度加大,导致精力、体力严重透支,如果这些压力长期得不到科学 合理的调节或消除,人体就会逐渐走向第三状态即亚健康状态,而亚健康状态的一个主要 临床表现为疲劳。根据WHO发布的消息,全世界有10%的成年人处于亚健康状态。因此, 抗疲劳研究成为当今社会普遍关注的重要话题。近几十年来,科研工作者对疲劳产生的机 制、抗疲劳活性物质等方面做了大量的研究工作,为抗疲劳药物的开发和生产奠定了理论 基础并提供了技术保障。 关于疲劳的概念,许多学者从自己的研究成果出发,提出过不同的看法。李氏认为n叫西力士http://www.xilishichina.info/ 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究疲劳(fatigue)是一个涉及许多生理生化因素的综合性的生理过程,是机体脑力或体力活动到一定阶段时必然出现的一种正常的生理现象,它既标志着机体原有工作能力的暂时下降,又可能是机体发展到伤病状态的一个先兆。 Chalder等“1认为疲劳是两个维度:心理疲劳,生理疲劳。Smets等陆1认为疲劳包含5个 维度:总体疲劳、生理疲劳、活动性下降、动机缺乏、心理疲劳。Ahsberg阳1认为疲劳包括 以下5个维度:缺乏能量、身体疲乏、身体不舒适、缺乏动机、困倦。Helen等口1总结前人 的研究后认为,疲劳是单一维度。 1935年E.Simonson提出的疲劳概念阳1,认为疲劳发生时存在四个基本过程: ①代谢基质疲劳产物的积累(积累假说,Accumulation hypothesis); ②活动所需基质耗竭(衰竭学说,Exbaustion hypothesis); ③基质的生理化学状态改变(Physiologicalalteration);④调节和协调机能失调(Imbalance hypothesis)。 随着研究的深入,目前的看法基本上趋于一致。故在1982年的第5次国际运动生化 学术会议上,对疲劳的概念作了统一,认为疲劳是“机体生理过程不能持续其机能在某一 特定的水平和/或不能维持预定的运动强度’’。所谓抗疲劳,就是延缓疲劳的产生和/或加 速疲劳的消除。1.2.2疲劳产生的机制(1)中枢疲劳的机制 ①中枢递质失衡学说:多巴胺和5一羟色胺(5-HT)分别是脑内中枢兴奋性神经递质和 抑制性神经递质。多巴胺的作用是调节肌紧张,使机体做好进行运动的准备,并在大脑皮 层冲动的触发下发动某一动作。而脑内5一HT通过神经元的上行和下行纤维与脊髓的躯体 反射以及锥体外系的运动功能有联系,即通过降低中枢向外周发放神经冲动来降低运动能 力。在正常情况下,多巴胺与5-HT在脑内保持平衡以共同维持机体的活动,使机体协调 运动。 在长时间运动时,支链氨基酸(BCAA)从血液进入运动肌氧化供能,游离色氨酸与 BCAA比值升高,游离色氨酸透过血脑屏障进入脑内增多。另外,长时间运动时脂肪动员 增加,甘油和脂肪酸氧化供能用于肌肉收缩,但脂肪酸不溶于水,必须与血浆白蛋白结合 而运输,游离脂肪酸与游离色氨酸竞争白蛋白上的结合位点,由于色氨酸与白蛋白的结合 是比较松散的,很容易解离,导致血液中游离色氨酸含量升高进入脑内。脑内游离色氨酸 增加,通过色氨酸羟化酶和5一HT脱羧酶的作用,脑内5-HT合成增加,导致多巴胺和5-HT 比例失调,致使运动能力下降,疲劳产生嘲。实验表明,大鼠在65%V02max跑台运动1h 后海马区5-HT升高,运动3h纹状体、下丘脑、中脑和海马区5-HT均显著升高n训。2西力士http://www.xilishichina.info/ 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳.补肾壮阳作用及其机制的研究②保护性抑制学说:巴甫洛夫曾用脑电图的方法研究静力活动疲劳时大脑皮质机能 状态,发现疲劳时大脑生物电发生明显的变化。我国生理学家蔡翘研究疲劳时发现,随着 疲劳的发展,抑制过程间断地发展着,他把这种抑制叫做间断性的保护性抑制n¨。按照巴甫洛夫学派的观点,运动性疲劳是由于大脑皮质产生了保护性抑制,运动时大量冲动传至大脑皮质相应的神经元,使其长时间兴奋导致消耗增多,为避免进一步消耗, 便产生了抑制过程,这对大脑皮质有保护作用。 这种保护性抑制的成因可能有以下三方面n羽:1.长时间运动时体内能量被大量消耗, ATP的分解与合成之间的不平衡,导致大脑中ADP/ATP比值增大,该比值的变化与神经 过程有关,即兴奋和抑制间的平衡依赖于大脑中ADP/ATP的动态平衡,ATP降低时,将 导致抑制过程的发展。2.长时间运动时,血糖降低,而大脑中能源物质贮备极少,它是严 格依靠血糖供能器官,因此,体内糖原大量消耗,血糖不足首先波及大脑,从而引起中枢 抑制过程的发展。3.谷氨酸是大脑中游离氨基酸的主要成分,当运动时间超过1h时,蛋 白质参与供能的量逐渐增多,使得体内氨基酸代谢加强,特别是使大脑中谷氨酸脱羧酶的 活性增强,则谷氨酸在其作用下生成氨基丁酸。氨基丁酸对中枢神经元有普遍性抑制作用, 它在突触前神经末梢被合成,而在突触后神经元的胞体部分分解,通过减少兴奋性递质的 释放,从而引起抑制。故认为长时间运动时引起大脑中抑制过程加强是以氨基丁酸含量增 加为基础的。 (2)神经―肌肉接点疲劳的机制 运动神经末梢以裸露的轴突末端,嵌入到肌细胞膜上称作终板的膜凹陷中,但轴突末梢的膜与终板的膜不接触,由充满细胞外液的接头间隙隔开,这一结构被称作神经―肌肉接点(NMJ)。Stephers等人发现,进行lmin最大等长收缩时,神经―肌肉接点可发生疲 劳。其原因可能是突触前衰竭,运动终板膜不能除极化。殷劲等发现,肌肉接受2.2Hz电刺激至疲劳时,肌肉中乙酰胆碱堆积,可能是引起神经―肌肉接点疲劳的另一因素。总的来说,可以认为神经―肌肉接点是短时间大强度运动的疲劳发生部位之一n3’1引。但具体 的机制还有待进一步探讨。 (3)外周疲劳的机制①能源衰竭学说:在机体供能系统中,由总称为磷酸原的ATP和CP直接供给组织器官能量,而其它能源如脂肪和蛋白质须先转化为糖,糖再转化为ATP/CP供能。在人体 骨骼肌中,ATP含量约为6mmolkg-1湿肌,CP含量约为17-20mmolkg-1湿肌,在激烈运动 的30s内,肌肉中大量消耗ATP和CP供能,肌肉中贮量明显下降。ATP/CP是短时剧烈 运动的主要能量来源,当运动的肌肉中ATP/CP含量下降30%左右时,其输出功率即下降, 肌肉力量亦大幅度减小口硼。 在中等强度运动项目中,机体主要是以糖酵解和有氧氧化混合供能。当以 30%-40%V02max强度运动时,慢肌纤维中的肌糖原在运动时间达1h后开始下降:当运动西力士http://www.xilishichina.info/ 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳.补肾壮阳作用及其机制的研究强度超过50%-60%V02max时,首先是慢肌纤维,继而是快肌纤维的糖原含量下降,肌肉 可从血液中摄取部分葡萄糖,而肝糖原的及时分解又可补充血糖,结果在运动达2―4h时, 可见肌糖原、肝糖原接近耗尽,亦可能出现低血糖。此时机体的运动能力下降,表现为疲劳。在长时间中、低强度运动时,肌肉可氧化自身的脂肪或利用从肌外组织转运过来的脂 肪酸。由于体脂量大,在数量上并不是限制运动能力的因素,但由于肌肉对脂肪酸的吸收 和利用受许多因素的限制,便影响了运动能力。 ②堵塞学说:在正常情况下,机体大多数组织依靠有氧代谢途径供能,只有少数组 织依靠糖酵解供能,这一过程中的乳酸迅速进入血液,故在正常情况下,血中乳酸浓度可 维持在一定水平。高强度运动时,机体利用糖酵解生成乳酸而获得能量的过程加强,造成 乳酸的堆积,肌肉中pH值下降。1110mpson等n町的实验证明,乳酸的堆积与肌力呈显著 负相关,pH值和疲劳恢复时间有显著相关。由于pH值的下降,一些酶的活性随之降低, 磷酸果糖激酶活性的抑制减少由糖酵解而产生的ATP,糖原的分解也因磷酸化激酶、腺苷 酸环化酶活性的抑制而下降。肌肉中H+浓度增加影响肌浆中Ca2+的释放及其与肌钙蛋白 分子的偶联调节,降低肌动―球蛋白的连接收缩过程,使肌力下降。ATP下降时,M92十会 上升,竞争性地与肌钙蛋白结合,加速疲劳的发展。 此外,长时间运动时,由于脂肪酸的氧化不完全而使血液中酮体含量升高,酮体属于 酸性物质,可引起血液pH值的变化而使一些酶活性降低。运动时还可产生一定量的氨, 它可限制细胞膜功能从而使活性肌纤维数量减少,可抑制三羧酸循环,抑制糖异生作用和 线粒体的氧化作用,亦可透过血脑屏障影响大脑的功能。 ③内稳态失调学说:机体内环境的相对稳定是组织器官保持其最佳功能状态的基础 和前提。正常情况下,组织内环境稳定在一个相对恒定的状态,保持动态平衡。在机体长 时间剧烈运动情况下,由于体液减少和无机盐丢失,且组织器官产生的代谢产物较安静时 大大增加,超过机体的代谢调节能力,会导致机体内代谢性酸中毒。血液pH值下降、高 渗性脱水等,引起疲劳。 ④自由基学说:自由基是指外层电子轨道含有未配对电子的基团。在细胞内,线粒 体、内质网、细胞核、质膜和胞液中都可产生自由基。机体中的自由基的产生,一种是由 物理及化学因素引起的,如电离辐射、X光照射、烟酒及某些药物等;另一种是在细胞氧 代谢的过程中产生的,机体利用氧的过程中,会形成超氧自由基(02-),可由氧合血红蛋 白缓慢释放出[IT]o自由基具有强氧化作用,不仅可以直接攻击细胞膜,破坏细胞膜和细胞 成分,同时也能再度激活脂质过氧化反应,可使体内脂质过氧化物(LPO)浓度升高。LPO 又通过自身催化作用连续生成大量过氧化物,使细胞的结构和功能受损。 许多研究表明,随着运动强度的增加,自由基的生成也增加n文1。1,机体脂质过氧化水 平升高,能对调节Ca2+转运的Ca2+_ATP酶产生影响,造成胞浆中Ca2+的堆积,影响肌纤4 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究维的兴奋一收缩偶联,使肌肉的工作能力下降,同时还能造成对肌肉等组织的损伤,妨碍 正常细胞代谢功能,导致疲劳产生。研究还发现,自由基能引起线粒体呼吸链产生ATP 的过程受到损害,使细胞能量发生障碍,影响肌纤维的收缩功能,还能使某些酶失活产生 一系列病理变化而导致疲劳。 (4)突变理论(CatastropheTheory)1980年,Edwards提出了神经―肌肉疲劳控制链。在该控制链中,一个或几个环节的 中断都会相应地引起某种疲劳。因此,运动能力下降时,伴有控制链的中断,可能由于能 量供应不足,力量丧失或兴奋收缩偶联机理破坏。阐明其间变化和疲劳的关系可用突变理 论。这个理论把疲劳时细胞内能量消耗、肌肉力量下降与兴奋性或活动性丧失三者和疲劳 的关系连接起来,描述了疲劳发生的机理为:疲劳可能是能量消耗、兴奋性或活动性部分 衰减的综合表现。在疲劳的发展过程中,在能量消耗和兴奋性、活动性衰减过程中,有一 个急骤下降的阶段即突变阶段,以避免能量贮备过度消耗或兴奋性、活动性丧失,使肌肉 在僵直之前就停止或降低运动速率。 1982年,Edwards根据神经一激素与代谢和免疫调节中的一些研究,把这些因素综合起来,又提出了神经一激素、免疫系统和代谢调节疲劳链,即运动细胞内能量物质的消耗,神经―肌肉代谢的激素、酶调节,免疫功能的改变,肌肉活动和兴奋性改变,当这些因素 变化达到一定程度时,为保护机体免于衰竭,就会以疲劳形式表现出来,这时生理过程或 输出功率突然改变。 1.2.3中药抗疲劳的研究现状 (1)单味中药抗疲劳研究现状 单独使用一种中药即单味中药,如西洋参、红景天圆1等,单独使用就具有明显的抗疲 劳作用。单独使用一种中药的用法侧重于对某一方面的症状治疗作用比较明显,以单向调 节更为突出,但往往体现不出中医的整体观,以及对机体平衡调节的特点。现代药理研究 证明:人参、黄芪、鹿茸、麦冬等中药具有强心、扩张冠状血管或外周血管等作用,能改 善心肌的能量代谢,使心脏的功能更好地适应机体的需要,增强机体的耐受力。健脾理气 中药党参、黄芪、山药、积壳等能改善肌糖原、肝糖原等指标,有较好的增强能量代谢的 作用,有利于提高运动能力口¨。人参、黄芪、枸杞子等中药在提高动物运动耐力的同时, 尚具有同时或分别激活和调节T淋巴细胞、巨噬细胞、白细胞介素、抗体水平的作用,以 增强或调节免疫功能,使机体的抗病能力增强,以延缓疲劳的出现髓羽。淫羊藿∞1可明显延 长小鼠负重游泳时间,降低血浆和组织中MDA含量,增加红细胞SOD活性。唐量Ⅲ。嚣1 等通过建立游泳训练模型,测定小鼠在安静状态,运动后即刻和恢复24h后肝、肾、脑、 骨骼肌中SOD、GSH―Px活性,MDA含量,肝、肌糖原含量,血液中LDH活性及BUN, Glue、Hb浓度。结果表明在三种不同状态下,芦荟组和对照组比较:SOD、GSH―Px活性, Hb、肝、肌糖原含量均有不同程度的升高;LDH活性,MDA、BUN、Glue含量有所下降, 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究且大部分差异显著。对肝组织超微结构的观察表明,其线粒体、内质网等细胞被过度消耗 而溶解断裂、糖原颗粒被大量消耗,肝细胞出现空泡化;而芦荟组动物这些症状明显减轻, 表明芦荟对小鼠运动性脏器损伤有明显的保护作用,并能改善运动所致机体糖代谢障碍。 虫草水提物在体外对剧烈运动后红细胞变形能力下降有明显改善作用,并有浓度依赖关 系;对运动后膜脂质过氧化物有较强的清除作用,这从另一个侧面反映了虫草可增强机体 对运动耐力的适应性和保护作用∞1。李氏跚1通过实验观察到螺旋藻能增强小鼠血清LDH 活性,有效降低运动小鼠血乳酸水平;并能延长小鼠游泳时间,提示螺旋藻在一定程度上有抗疲劳作用。(2)复方中药抗疲劳研究现状 中药复方在消除疲劳方面具有其他单药或中药单体无法比拟的优势。中药复方的特点 是相辅相成或相反相成,即多成分、多系统和多靶点的综合效应。目前,应用中药复方抗 疲劳的方法主要有补益或调理两种治疗原则,前者主要包括补气、补血、补阴与补阳,以 及补脾、补肾等;后者主要有理气(如健脾理气、疏肝理气)与理血(如活血化癖、补脾 活血)。复方中药的特点在于,以整体观的思路设立处方,处方的作用往往是双向调节与 适应作用,作用环节表现在多方面、多层次,作用机理较为复杂。中药复方如复方生脉饮、参宝片、复方何首乌、鹿茸煎剂等中药制剂均能明显延长动物的运动时间,在运动过程中显示较强的抗疲劳作用,提高机体的耐力口¨。其以人参、当 归、黄芪、甘草等为主要原料,能提高运动能力及抗疲劳矧。万劲∞∞等报道,含人参、自 术、茯苓、甘草等制剂可增强人体机体免疫力,提高血红蛋白含量,改善机体的机能状态。 服用中药饮剂(含黄芪、刺五加、党参、大枣等)能缩短疲劳恢复时间。含巴戟天、淫羊 藿、刺五加等制剂不仅能增强免疫能力,同时能促进疲劳恢复m3。由人参、熟地黄、芍药、 仙灵牌、杜仲、肉苁蓉、郁金、益母草、桂枝、阿胶13味制剂能提高有氧能力,增强体 能,延缓疲劳的发生删。疏肝补脾的中药制剂可以使损伤的肌纤维基本恢复正常,并纠正 能量代谢的异常m1。脾肾双补的参芪补剂(含人参、肉苁蓉、黄芪、刺五加等)具有抗疲增 力的作用Ca7]o徐忠端等在求衡的思想指导下,兼顾五脏,研制了含五味子、炙甘草、党参、 熟地、牛膝等组成的口服液,经动物及人体实验证实,此药有明显的中枢兴奋作用和提高 运动能力的作用∞3。王启荣等进行的动物实验研究得到理气扶正类中药,可以促进疲劳的 恢复嘲3。王茹等通过活力隆胶囊对衰老模型滋补强壮抗衰老作用的动物实验研究,也表明 其具有滋补强壮和抗疲劳的作用㈨。中医的辨证观与整体观还表现在根据不同阶段而采用 相应的治则治法。通过中医调节阴阳、平衡气血,健脾益气养阴等方法可以促进食欲,及 时补充能量、体液的消耗,促进机体的物质代谢尤其使肝脏、肌肉糖原的合成储备、氧化 供能过程加强。益气温阳方法可兴奋中枢神经系统和肾上腺、心血管功能,使机体很快产 生应激。秦氏H妇等通过药理实验研究表明补气健脾中药北芪花粉复方具有明显的降低小鼠 血浆MDA含量,提高小鼠红细胞SOD的活性;具有明显的抗疲劳,增强小鼠耐力的作6 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究用;延长小鼠常压耐缺氧时间,升高小鼠腹腔巨噬细胞及腹腔巨噬细胞吞噬阳性细胞率和 吞噬指数,增强体液及细胞免疫功能。余氏H21通过对中药复方补剂和清剂抗体力性疲劳作 用的研究表明:中药复方补剂和清剂具有良好的抗体力性疲劳效应,补剂长于促进体力性疲劳消除,清剂长于减缓体力性疲劳产生H朝。 1.2.4抗疲劳功能的功效评价叫评价疲劳的方法应包括耐力实验和生化指标的检测。疲劳的宏观表现主要是运动时能 量体系输出最大功率的降低和肌肉力量的下降,测定机体持续运动到力竭的时间可以反映 机体的耐力。而运动导致的机体一些生化指标的变化引起了疲劳感觉的发生,因此,可以 用这些生化指标的检测来研究疲劳的发生及其发展变化过程。标志疲劳发生的生化指标有 以下几类: ①能量物质,包括血糖、肝糖原、肌糖原、磷酸肌酸等; ②代谢调节物质,如酶、激素等; ③代谢产物,如血和肌肉中的乳酸、氢离子浓度、丙酮酸、血清尿素氮等。 并非所有的因运动而变化的生化指标都适合作为疲劳或抗疲劳作用的评价指标,因为 运动负荷的大小并不都是与机体的生化改变相一致的。只有运动时变化明显、变化程度与 运动负荷及强度一致的指标才能作为疲劳的评价指标。而且,作为活性物质评价的常规检 测指标还应具有检测方法灵敏、操作简便易行、检测结果能客观反映机体的疲劳程度等特点。(1)运动耐力实验 抗疲劳功能的评价是利用实验动物来进行的,观察是否可提高动物的运动耐力,这是 它强化抗疲劳功能有力的宏观表现。运动耐力的测定方法有运动跑台(运动跑台有滚筒式 和平板式两种)、爬杆和游泳。用小鼠或大鼠进行这项实验时,造成疲劳的最理想方式是 采用跑台功率计,它可准确记录运动的运动负荷量。但由于该设备价格较高,又不能同时 对多只动物进行测定,因此目前更多的是采用小鼠游泳试验和爬杆试验。如果试验组动物 的游泳时间或爬杆时间比对照组显著延长,就说明摄入的功能性食品具有抗疲劳功效。①游泳试验:游泳试验中,小鼠落水后,由本能驱使游泳挣扎使鼻孔露出水面呼吸,直至体力不支而下沉溺毙。计算自落水开始至鼻孑L沉入水面后死亡的时间为小鼠游泳时 间;也可计算小鼠自落水开始至头部全部入水持续6s不能浮出水面为止的时间为游泳时 间,可作为判断小鼠体力情况的客观指标。这一方法设备简单,可同时进行多只动物试验, 试验结果也较为准确。为了缩短试验时间,亦可采用负重游泳方法,即每只试验鼠负自身 体重的2%-5%的重物游泳。但要注意应选择比重较大的负重物,因为负重物太重小鼠会下 沉,太轻则游泳时间会太长,不便于操作。钓鱼用的铅皮比重大,浮力小,且质地软,易 于裁剪和捆绑,是较理想的负重材料。②爬杆试验:将动物悬空放在一根光滑的铁杆或玻棒上,它既不能向上爬又为了免7 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究于跌下,出于求生的本能只有紧紧抱住铁杆或玻棒并维持一定的姿态,这就造成肌肉紧张。 经过一定时间后,由于肌肉的过分疲劳和体力的损耗殆尽,无法继续抱紧而跌落。记录小 鼠自爬杆开始,至跌落的时间,即为爬杆时间。爬杆时间的长短可以反映动物静用力时疲 劳的程度。爬杆时间的延长,表明抗静用力疲劳的作用增强。爬杆装置简单,但有的小鼠 并非因疲劳落地,而是不愿爬才跳下来的,并且因小鼠趾甲的抓损和杆的光洁度等因素很 难保持一致,因此爬杆试验结果不如游泳试验结果可靠。 游泳试验装置简单,且实验结果能客观地反映机体的体能,最为常用。 (2)生化指标检测 可用于抗疲劳功能评价的生化指标有肌乳酸、血乳酸、血糖、肌糖原、肝糖原、乳酸 脱氢酶(LDH)活力、LDH同工酶活力、血清尿素氮、血清尿酸和血红蛋白等。按卫生 部《保健食品功能学评价程序和检验方法》中《抗疲劳作用检验方法》(卫监发(1996) 第38号)要求,需要检测的生化指标是:肝/肌糖原、血乳酸、血清尿素氮。试验结果中, 若l项以上(含1项)运动试验和2项以上(含2项)生化指标为阳性,即可以判断该受 试物具有抗疲劳作用。 考虑到以上因素,我们在进行实验时,应注意以下几点: ①血乳酸的测定:试验应选择短时间剧烈运动。理论上,只有短时剧烈运动,乳酸 产生量才增加,而马拉松式的运动并不能使血乳酸水平升高。因此试验应选择短时间剧烈 运动,运动时产生的肌乳酸可以很快进入血液,因此测定运动前和运动后不同时间的血乳 酸可以计算乳酸的产生和恢复速度。何氏[删等比较了水温30℃下,不负重游泳90min和 负重4%游泳10IIlin,20min三种情况下的血乳酸水平。结果表明:负重短时间游泳,血乳 酸升高明显;不负重长时间游泳,血乳酸升高不明显。故本实验采用负重5%,游泳10rain 这一方案,分别测定运动前、运动后、运动后休息20min的血乳酸值,计算三个时间点血 乳酸曲线下的面积,可反映血乳酸消除速度。 ②血清尿素氮测定:本指标测定应选择较大负荷的运动时间。因为少于30min时, 蛋白质较少参与供能,血尿素氮变化不明显,较大负荷运动后,血尿素氮才明显增加,且 蛋白质分解代谢加强不仅发生在不适应的运动时,还会延续到运动后的休息期,血中尿素 氮可在运动后较长时间持续升高。因此,试验选择较大负荷的运动时间一游泳90mm,在 该负荷下运动所产生的尿素氮与安静时比,差异有显著性嗍。 ③肝糖原测定:何氏㈨试验表明,游泳90mm后小鼠肝糖原尚未耗竭,且与安静组 差异有显著性,故此时取材比较合适。水温对小鼠游泳时间影响很大,要保证小鼠游泳 90mm而不致死亡,最好选用30℃:运动开始的时间应以上午进行。小鼠习性以夜间活动 为主,进食也主要在夜间。试验开始的时间离进食时间越久,测定的肝糖原含量越低。何 氏等阻1于上午和下午分别进行过多次试验,结果均表明下午的肝糖原含量极低,很难比较 各组的差异,上午显著高于下午。因此,试验应在上午进行,且同一受试物各组应在同一8 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究时点进行试验。 ④血乳酸脱氢酶:乳酸脱氢酶(LDH)的功能是减少运动后乳酸在肌肉中的堆积。 运动后乳酸的消除依赖于LDH的催化作用。LDH活性升高,可以加速肌肉中过多乳酸转变为丙酮酸,从而延缓疲劳的产生。 1.2.5补肾壮阳作用的研究进展(1)补肾类保健品的研究现状 随着社会、工作和家庭的压力日益加重,性功能障碍、前列腺等疾病频繁光顾男人。 据专家推算,全国有1/3的成年男人患有不同程度的性功能障碍。据北京市的一项调查统 计:有56%的离婚个案是由男性或女性性健康问题引起的。因此,男性性健康受到国家有 关部门的高度重视,北京疑难病生理研究中心,中国性学会,中国中医学会已经把性功能 障碍问题作为2l世纪研究的热点问题。上世纪90年代初,自从姜伟的延生护宝液推出补肾这一概念后,从那时起到现在,各种类型的产品此起彼伏,不断推陈出新。10年前以做蜂王浆起家的“汇仁肾宝"做成 了中药单品销售第一,但近几年销售明显下滑,略显沉寂。从几年前的“御苁蓉"到近期 风头较劲的“如可邦胶囊"、“张大宁补肾胶囊”、“补肾益寿胶囊"等等,有的视为保健品、 有的视为OTC。他们以独特的产品定位,差异化的诉求手段赢得了市场强烈反响,其中有 的号称能”激活肾动力”,有的则”补肾治虚,调节免疫”,把肾虚与提高机体免疫力,去除 亚健康联系起来。到目前为止,补肾类保健品已经发展N T第三代产品。第一代产品是以动物器官为原料配置而成,如用鹿鞭、鹿茸、鹿血等作为原料加入一些壮阳的成分配制而成,这一代产 品有效果,但副作用很大,使男性体力透支严重,给男性的身体健康带来不利影响;第二 代产品是以动物器官为原料另外添加激素类等化学成分,这一代产品效果比第一代更迅 速,但是副作用也相应增大,长时间服用会给生命带来危害,另外,高血压,心脏病等病 人不能服用,否则有生命危险;第三代产品可补充调节人体微量元素,它不是通过激素或 者化学品来发挥作用,而是通过平衡人体细胞的代谢,达到强身健体、延缓衰老的效果, 在技术上也更加先进,更加成熟,因为是使营养平衡代谢而发挥作用,所以没有副作用。 对于这三代产品目前的发展状况而言,第一代产品正在被淘汰,第二代正逐渐没落,第三 代才是男性保健品的发展方向。 (2)补肾壮阳中成药及其方剂的研究进展 我国传统医学治疗性功能障碍历来以补肾壮阳法为主㈨。补肾是指应用补肾的药物, 治疗肾虚症的一种方法;壮阳主要是指壮肾阳,兴阳事,恢复性功能n射。现代药理学研究 证实,众多的补肾壮阳中成药及方剂是通过对性激素及促性腺素、附性器官、“阳痿”动 物模型和免疫等方面的影响,而显示出其壮阳的药理学效应H7’删。 ①对中枢神经系统的双向影响:对中枢神经系统具有双向调节作用的壮阳中药有人9 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究参、杜仲和刺五加等。人参对中枢神经系统,特别是高级部位,有某种特异作用。人参主 要加强大脑皮层的兴奋过程,同时也能加强抑制过程,即具有所谓的“双向调节作用", 改善神经活动的灵活性。人参无性激素样作用,而能兴奋垂体分泌促性腺激素,加速大鼠的性成熟过程;或使已成熟的雌性大鼠动情期延长,摘除卵巢后此作用消失‘一1。杜仲煎剂给狗灌胃,能促使其安静、嗜睡,不易接受外界刺激∞引。刺五加具有益气健脾,补肾安 神的功效,可以治疗脾肾阳虚,体虚乏力,食欲不振,腰膝酸软,失眠多梦。实验表明, 刺五加对小鼠具有抑制中枢神经系统的作用,大剂量刺五加能显著减少小鼠的自主活动, 并对抗防已毒素的致惊厥作用嘲,。 ②性激素及促性激素样作用:传统壮阳中药大多具有性激素和促性激素样作用。例 !ttl.淫羊藿辛甘性温,入肝、肾二经,具有性激素样作用;可以使雌性小鼠子宫增重,E2(17伊雌二醇)含量升高,雄性小鼠血清T淋巴细胞含量升高侧。淫羊藿水浸膏给动物口服可见交尾力亢进。淫羊藿煎剂用于摘除卵巢的小鼠,证明无雌激素样作用。菟丝子为滋 补肝肾,固精明目的常用中药,临床疗效肯定。菟丝子可使幼龄小鼠及阳虚小鼠的睾丸和 附睾增重,表明它具有一定的促性腺激素样作用。菟丝子70%的醇提液中主要含有大量的 黄酮类化合物,由此可以推测,菟丝子中的总黄酮是其补肾壮阳作用的有效成分之一。另 外菟丝子及菟丝子多糖能显著降低阳虚小鼠血清中MDA含量,增加SOD活力,使小鼠 胸腺、脾脏、肝、肾等脏器增重,表明菟丝子具有延缓衰老的作用侧。蜂房又名露蜂房, 具有补肾壮阳的功能。如《千金要方》记载用于治阳痿不起。实验表明,蜂房可以使幼年 去势大鼠的副性器官的重量明显增加,显示了雄性激素样作用。与丙酸睾丸不同的是,蜂 房水提液、醇提液均不使去势大鼠的胸腺萎缩,以上结果提示了蜂房水溶性和醇溶性活性 部位有雄性激素样作用,而无睾丸素样副作用悔刀。肉苁蓉浸出物可纠正“阳虚”动物DNA的合成率‘57啪3。③对前列腺素、睾丸、精囊腺等附性器官的影响:目前,常利用动物的附性器官进 行雄激素实验,来检测补肾壮阳是否能使雄性动物的附性器官质量增加,从而表明其雄激 素样作用。天雄(毛茛科植物乌头的侧根)在东南亚、港澳地区经常入方(如济生肾气丸、 天麻丸、桂附地黄丸)治疗肾亏阳痿。曹晖等删用天雄水煎剂三种剂量(5.4g.kg~,1.8 g'kg~,3.6g-kg叫)每天给阳痿小鼠灌胃,三周后,各剂量组的包皮腺均明显增重,但对前列腺、精囊、提肛肌无明显的影响。张茂林髓¨的补肾抗衰胶囊实验结果表明,补肾抗衰胶 囊能增加去势雄性大白鼠包皮腺、精囊腺和前列腺的质量,而且还能提高其阴茎对外部刺激的兴奋性。牛锐∞21用淫羊藿炮制品煎剂给每只小鼠灌胃0.3mL?d一,连用10d,能显著增加血浆睾丸酮的含量及睾丸、提肛肌的重量,具有明显的促性功能作用,其作用强度与肌 肉注射睾丸酮无显著性差异,并可明显促进睾丸组织的增生与分泌旧1。 ④对阳痿动物模型的作用:金樱根有滋阴、涩精、涩尿之功;淫羊藿辛甘性温,入 肝、肾二经,具有雄性激素样作用;仙茅味辛,性热,入肾经,能温肾壮阳。三者配伍,10 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究标本兼顾,相辅相助,共奏壮阳益肾固精之效㈣。黄志明等报道,以金樱根、淫羊藿、仙 茅等多味中药制成的纯中药制剂对于氢化可的松造成小鼠体温、自主活动和耐寒能力的下 降以及生殖器官精囊腺+前列腺、提肛肌和睾丸脏器指数下降的阳虚症状表现,均有保护作用[64J o郑小伟等报道,金匮肾气丸为补肾名方,是温补肾阳之要剂,主治肾阳不足诸证。金匮肾气丸可能通过垂体一肾上腺轴作用,通过增高垂体细胞转化能力,增高血浆ACTH 水平,进而调节皮质类固醇激素的含量,这可能是其治疗肾阳虚的作用机制之一。细胞转 化能力的增强,蛋白质基因产物增多,是否是中药对相关基因表达起调控作用的结果,有待进一步研究㈣。⑤增强免疫功能:现代药理实验研究证实,免疫功能降低很可能是中医虚症的本质 之一。通过壮阳药可提高或纠正肾虚病人的T淋巴细胞比值、淋转率、IgA、IgG以及单 核巨噬细胞系统功能低下。栾金水等研究淫羊藿、蜂胶所组成的加味补阳还原汤,不但具 有补气养血、活血祛瘀、补肾壮阳之功效,还能增强非特异免疫、细胞免疫和体液免疫的 作用嘲1。淫羊藿为补肾壮阳之传统补益中药,据现代药理研究表明,淫羊藿具有调节免疫、 抗衰老、抗菌、降血压、降血糖等作用哺"。淫羊藿总黄酮可使“阳虚”小鼠抗体形成细胞 功能及抗体滴度趋于恢复,能显著提高“阳虚”小鼠淋巴细胞刺激指数,使之接近于正常 删。蜂胶含有大量的类黄酮(黄酮、黄酮醇、黄烷酮)、芳香酸、酯类及萜烯类化合物。 黄酮类化合物被认为是产生蜂胶多种保健功能(如防腐抗菌、降血脂与血粘度、增强免疫 功能、抑制肿瘤细胞等)的活性成分,其种类和含量之丰富非植物药所能比拟嘲1。鹿茸的 醇提取物能显著增强正常小鼠的单核巨噬细胞系统的吞噬功能,增加小鼠胸腺质量,并提 高小鼠血清IgG的含量。鹿茸与黄芪合用,对青老年小鼠淋巴细胞ANNE(酸性矗一醋酸萘 酯酶)有增强作用盯¨。ANNE是成熟T淋巴细胞的标志,并参与T淋巴细胞对靶细胞的 杀伤效应口2一引。肉桂、仙茅、菟丝子、锁阳等有促使抗体形成提前的作用。补骨脂、巴戟 天、益智仁、蛇床子、枸杞子等有防止环磷酰胺所致白细胞减少的作用。人参、白术、枸 杞子等有增强体液免疫作用E74]。 随着性药学研究的进一步深入,传统补肾壮阳药物及其方剂的补肾壮阳作用机制及其 实验研究方法己取得长足进步,今后补肾壮阳中成药及方剂在临床治疗性功能障碍方面必 将取得更大进展。 吉林农业大学硕士学位论文九昧至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究第二章实验材料与方法2.1实验材料2.1.1九昧药材的质量评价 根据2005年版药典订51对九味药材进行水分、总灰分、酸不溶性灰分及杂质的检查。 结果如下:人参:水分4.42%总灰分3.21%酸不溶性灰分0.5%五味子:杂质0.96%菟丝子:总灰分7.02%通过检测,九味药材均符合药典标准,因此可以入药。 2.1.2材料九味至宝胶囊由人参、鹿茸、五昧子、菟丝子等九味中药组成,经超微粉碎后,按一 定的比例混合,装成胶囊。2.1.3主要试剂 LDH试剂盒南京建成生物工程研究所 南京建成生物工程研究所 南京建成生物工程研究所 南京建成生物工程研究所 南京建成生物工程研究所 烟台瑞龙化学技术有限公司哈药集团制药总厂 广州自云山明兴制药有限公司LPS试剂盒SDH试剂盒 BUN试剂盒考马斯亮兰蛋白测定试剂盒12.5%乌拉坦 注射用青霉素钠苯甲酸雌二醇黄体酮 2.1.4主要仪器浙江神洲药业有限公司无菌超净工作台 低速离心机LD-2型分析天平型TG3288型苏州净化设备厂 北京医用离心机厂 上海天平厂江苏金坛FSH-2 厦门电子医疗仪器厂组织匀浆机 电子恒温水浴箱漩涡混匀器江苏医疗仪器厂2.1.5实验动物及剂量分组 (1)昆明种小白鼠160只,雄性,体重18-229,由吉林大学基础实验动物中心提供。 动物室室温20±2℃,饲料饮水清洁卫生,通风换气,每隔2d称重1次。160只小鼠共分12 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究A、B、C、D四批,每批40只,将每批小鼠随机分为4组,每组10只。设正常对照组, 蒸馏水灌胃;3个剂量组,其剂量分别为200mg?kg~、400mg?k分1、800mg?kg一,连续给药21d。(2)离乳1个月的Wistar大鼠50只,雄性,体重90-1209,由吉林大学基础实验动物 中心提供。在12.5%乌拉坦(0.4mL/只)麻醉下,背位固定。消毒阴囊皮肤,摘去双侧睾 丸。术后肌注青霉素钠2万U.kg。1以防感染,共3d。3d后,将50只大鼠随机分为5组, 每组10只。设正常对照组,蒸馏水灌胃;3个剂量组,其剂量分别为O.79?kg-1、1.49。蚝~、 2.89?kg一;阳性对照组(中华翰皇强根胶囊)剂量为0.29?kg一,连续给药21d。 (3)Wistar大鼠50只,雄性,体重200-2809,由吉林大学基础实验动物中心提供。将 50只大鼠随机分为5组,每组10只。设正常对照组,蒸馏水灌胃;3个剂量组,其剂量分别为0.79?k茸1、1.49?培1、2.89?蚝一;阳性对照组(中华翰皇强根胶囊)剂量为0.29‘k分1,连续给药21d。 (4)Wistar大鼠50只,雌性,体重180―2009,由吉林大学基础实验动物中心提供。 在12.5%乌拉坦(0.4mL/只)麻醉下,腹位固定。消毒背部两侧皮肤,切除双侧卵巢。 术后肌注青霉素钠2万U.k91以防感染,共3d。在卵巢切除2w后,于实验前48h皮 下注射苯甲酸雌二醇0.01mL.1009~,实验前4h再皮下注射黄体酮0.02mL?lOOg-1。2.2实验方法2.2.1对小鼠体重增长的影响 试验开始及结束时分别用电子天平称量小鼠体重,并计算试验期间小鼠体重增长值。 体重增长量(g)=实验结束时体重(g)一实验前体重(g) 2.2.2对小鼠负重游泳能力的影响 将A批小鼠末次给药30min后置小鼠于游泳箱中游泳,水深30cm,水温30"C,小鼠尾 根部负荷5%体重的铅块,游泳直至力竭(沉入水中6s不起),记录小鼠自游泳开始到死亡的 时间,作为小鼠力竭游泳时间m’771。 2.2.3对小鼠耐缺氧能力的影响 将B批小鼠末次给药30min后,将小鼠放进250mL的密封性好的磨口玻璃瓶内,将用纱 布包好的159钠石灰装入瓶内,将小鼠放入瓶内后立即用凡士林密封盖紧,当小鼠开始出 现全身性痉挛症状时,立即开启瓶盖,将动物取出。记录从密封至小鼠发生全身性痉挛的时间‘78’7口】。2.2.4对小鼠血乳酸、肝糖原、肌糖原含量及脏器指数的影响 将C批小鼠第21d给药30min后,第一次采眼球血,后即放于水温30"C,负重游泳lOmin 第二次采眼球血,然后停止安静20rain,第三次采眼球血。用--K,酰一肟一硫氨尿比色法分13 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳.补肾壮阳作用及其机制的研究别测定游泳前血乳酸、游泳后血乳酸、游泳后休息20min血乳酸,根据公式计算三个时间点乳酸曲线下面积嘞1。血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0rain的血乳酸值+2X游泳后休息20min的血乳酸值)三次采血后,将小鼠拉颈处死,取心脏、肝脏并称重。计算心脏、肝脏、脾脏和肾脏 指数眦’嘲。 脏器指数=脏器重量/小鼠体重 再分别准确称取300mg肝脏和500mg肌肉,经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,分别放 入盛有3mL30%KOH溶液的试管中,置沸水浴20min,取出冷却后,将其转移至50mL容 量瓶中,用水多次洗涤试管,一并加入容量瓶,加水至刻度,摇匀。取定容后溶液lmL 加入4mL葸酮试剂(29葸酮/L硫酸)和lmL去离子水,混匀后置沸水浴10min,冷却后用722分光光度计测定各样品和葡萄糖标准溶液(同法处理)在620nm处的吸光度,计算糖原含量哺引。 糖原含量(mg/1009)= (A样品管/A标准管)X标准管葡萄糖含量mgX稀释倍数×100X1.11(注:1.11为此法测得的葡萄糖含量换算成糖原含量的系数,即1001.tg糖原用葸酮试剂显 色的颜色相当于lllgg葡萄糖用葸酮试剂显色的颜色。) 2.2.5对小鼠BUN代谢及LOll、LPS、SDH酶活性的影响 将D批小鼠于第21d给药后30min,在水温30"C的水中不负重游泳90min,休息60min后 拨眼球采血约0.5mL[aa-aT],保存于lmL离心管中,静置2h,2000rpm,离,ll,10min,获得血 清,按照试剂盒说明书分别测定BUN的含量及LDH、LPS活性。再将小鼠拉颈处死,取肝 脏0.59,力[15mL生理盐水,制成10%肝匀浆,按照试剂盒说明书测定SDH活性删。2.2.6对去势雄性大鼠阴茎勃起功能及生殖器官脏器指数的影响将离乳1个月的雄性大鼠第21d末次给药后1h,将电刺激器的刺激电极放置于大鼠 阴茎部位,给予表面部电刺激,电流强度4mA,周期50ms,脉宽1ms,脉冲串.10陬叫。 记录从刺激开始至阴茎勃起时间(勃起潜伏期)。 再将大鼠立即处死并解剖各组大鼠,立即称取包皮腺、精囊腺、提肛肌的重量,计算 脏器指数。2.2.7对雄性大鼠交配能力的影响雄性大鼠末次给药后,将雄性大鼠单只放入笼中使其适应环境5min,然后放入1只雌 鼠。开始记录下列指标:①自雌鼠投入至雄鼠第一次扑捉雌鼠的时间(捕捉潜伏期);‘② 自雌鼠投入至雄鼠第一次射精的时间(射精潜伏期);③20min内雄鼠扑捉雌鼠的次数及射 精次数;④20min内各组发生扑捉和射精动物数的扑捉百分率和射精百分率Ⅲ1。14 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究2.2.8对雄性大鼠阴茎勃起功能及生殖器官脏器指数的影响 雄性大鼠进行交配实验后,将电刺激器的刺激电极放置于大鼠阴茎部位,给予表面部 电刺激,电流强度4mA,周期50ms,脉宽lms,脉冲串.10啪1。记录从刺激开始至阴茎勃 起时间(勃起潜伏期)。 再将雄性大鼠拉颈处死,并解剖各组大鼠,立即称取包皮腺、精囊腺、睾丸及阴茎的 重量,计算脏器指数。2.3统计学方法数据结果以均数士标准差(;蛔)表示,采用SPSSl2.0统计软件,各组总体方差满足 方差齐性条件时,多组比较采用ANOVA法分析,多重两两比较采用LSD法分析;当各 组总体方差不满足方差齐性条件时,多组比较采用Welch法分析,多重两两比较采用Dunnett’T3法分析。显著性差异水平(氏O.05)。 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳,补肾壮阳作用及其机制的研究第三章实验结果3.1九味至宝胶囊抗疲劳作用3.1.1对小鼠体重增长的影响 各组小鼠活泼,精神状态良好皮毛光滑,未见任何不良反应。 各剂量组小鼠体重的增长量与CG组比较明显减少,且均无显著性差异(胗0.05)。见表l。表1.九昧至宝胶囊对小鼠体重增长的影响(g’;埘Tabl.Effect increasing weight of smallofjiuweizhibaocapsuleonmice(g,i埘组别CG LD体重增长量9.034-3.45 8.89士3.08 8.45-4-3.16 7.89士2.54ⅣDHD3.1.2对小鼠负重游泳能力的影响 结果表明:LD、MD、HD各组力竭游泳时间与CG组比较均有显著差异(P<O.05),LD组与HD组比较有显著性差异(P<0.05)。见表2。 表2.九昧至宝胶囊对小鼠负重游泳时间的影响(min,;±s0I1hb2.Effect of iiuweizhibao capsuleonloaded―swimming time of small mice(min,Y蛔)组别CG LD游泳时间18.19-士3.25 57.79-a:9.95螂 45.70a:7.39。MDHI)44.27:1:6.58’ -_-__●_____●__●__-_____-ll-I-●_--●l-___-_--●__●●____-____-_●-_-__--______---●●l__I_●_一I●--l_-___--_●-●-_-___I___-●__-_●_l_I_--●●-_--__--_-●●一VSCG,‘P<0.05:VSHD,恢O.053.1.3对小鼠耐缺氧能力的影响结果表明:LD、MD、HD各组耐缺氧时间与CG组比较均有显著性差异(尸<0.05),HD组与LD组比较有显著性差异(必O.05)。见表3。16 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳,补肾壮阳作用及其机制的研究表3.九味至宝胶囊对小鼠耐缺氧时间的影响(min,X一土s0I’rab3.Effectofjiuweizhibaocapsule on survival time of endurance of inhibition hypoxia of smallmice(min,r埘组别CG LD耐缺氧时间26.95+2.92 32.504.3.93’ 36.014.3.91’ 42.89士4.54。#MDHDVSCG,’P<0.05:VSLD,恹0.053.1.4对小鼠血乳酸代谢的影响 结果表明:各剂量组游泳前、游泳后、游泳后休息20min血乳酸含量均低于CG组,具有显著性差异(必0.05);各剂量组小鼠游泳前后三时点血乳酸曲线下面积均下降,与CG组比较均有显著性差异(P<0.05)。见表4。 表4.九味至宝胶囊对小鼠血乳酸含量的影响(;士砂Tab4.Effect of jiuweizhibao capsuleonthe contents of blood lactic acid of smallmice(1.is) 血乳酸曲线 下的面积58.65+3.55 33.904.2.92’ 39.484.2.25’组别游泳前游泳后0min游泳后20min(mmol?L.1)(mmol?L.1)(mmol?L-1)CG LD 1.54土-0.14 0.73+0.08‘ 0.77=L-0.1 0’ 0.65:L-0.11‘VS2.09士O.16 1.35:L-0.1 3‘ 1.644.0.1 7‘ 1.68-士o.31。1.964.0.17 1.03=L-0.1 5‘ 1.034.0.14’MDH131.234.0.15‘40.544-3.10。CG,‘P<0.053.1.5对小鼠肝糖原、肌糖原含量的影响结果表明:各剂量组肝糖原含量与CG组比较均有显著性差异(氏O.05),各剂量组肌糖原含量与CG组比较均有显著性差异(/2<0.05)。见表5。表5.九昧至宝胶囊对小鼠肝糖原和肌糖原含量的影响(mg?1009"1,x±回Tab5.Effectofjiuweizhibaocapsuleoncontents of hepatic glycogen and muscle glycogen of small mice(mg‘1009~,Y土scI 组别CG LD肝糖原含量1.39-士-0.138肌糖原含量0.33士-0.0423.37=L-0.173。0.764.0.070‘MDliDVS1.7拈:o.265。0.73=L-0.050。2.391-0.221。0.70-士0.040‘CG。’P<0.0517 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究3.1.6对小鼠脏器指数的影响结果表明:LD组肝脏指数与CG组比较有显著性差异(P<0.05),MD、HD组与CG组比较无显著性差异(P>0.05)。见表5。 各剂量组与CG组比较,心脏指数、脾脏指数、肾脏指数均无显著性差异(P>0.05)。见表6。 表6.九味至宝胶囊对小鼠脏器指数的影响(mg虿1,x±sjIorgan mice(rag?g-1, ●_●●●●--●_●●_-_____。l-____?_l?___-I___-?v―――――――――――――――――――――――-――――――――――――――――v――――――――――――――――――――――――onTab6.Effect ofjiuweizhibao capsuleindex of smallIrk"_l___-l-___-l-●-___●oo_r±s)组别CG LD肝脏指数56.46-士6.05 63.37士7.48’ 58.34士8.56 59.21士4.1 3心脏指数5.72-*0.74 5.77:L-0.65 6.1 5士0。73 5.89-士-0.74脾脏指数3.65士-0.56 3.46士O.69 3.37土0.80 3.21+0.63肾脏指数12.46+4.78 12.1 9-a:4.65 11.85士5.37 1 2.09士5.48MDHDVSCG,‘P<0.053.1.7对小鼠BUN代谢水平的影响 结果表明:LD、MD组小鼠运动后BUN含量与CG组比较有显著性差异(P<0.05), HD组与CG组比较无显著性差异(P>0.05)。见表7。表7.九昧至宝胶囊对小鼠BUN含量的影响(mmol?L-1,x±DTab7.Effect of iiuweizhibao capsuleoncontents of BUN of smallmice(mmol?L.‘, BUN含量10.97士1.18Y土囝组别CG LD6.87:L-0.72’MDH13VS8.5叫曲.82+。10.14=£0.71CG,’P<0.053.1.8对小鼠LDH、LPS、SDH活性的影响 结果表明:(1)HD组LDH的活性与CG组比较有显著性差异(JP<O.05),LD、MD 组与CG组比较无显著性差异(P>0.05);(2)各剂量组LPS的活性与CG组比较均有显著性差异(P<O.05),HD组与LD组比较具有显著性差异(P<O.05);(3)各剂量组的SDH活性与CG组比较均有显著性差异(尸<O.05),HD组与LD组比较具有显著性差异(尸<O.05)。见表8。18 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳,补肾壮阳作用及其机制的研究表8.九昧至宝胶囊对小鼠LDH、LPS、SDH活性的影响(x±幻Tab8.EffectofjiuweizhibaocapsuleORactivities of LDH’LPS and SDH of small mice组剐LDH活性LPS活性 Ⅳ?L以)CG LD 955.77+62.92 1004.59士70.12 999.43-4-92.25 1076.33士38.34‘SDH活性(U?L-1)125.3la:24.21 142.70士19.26’Ⅳ。mgprot"1)28.51士2.12 35.68-+-4.66。MD‘liDvs149.69-a:3 1.06+47.61:L6.34’ 191.85+21.29“ 61.97士5。44哗CG,’P<0.05:VS LD,乍<O.053.2九昧至宝胶囊补肾壮阳作用3.2.1对去势雄性大鼠阴茎勃起功能的影响 结果表明:LD、MD剂量组阴茎勃起潜伏期与MG组比较有显著性差异(P<O.05), HD剂量组与MG组比较有极显著性差异(尸<O.01),HD剂量组与PC组比较有显著性差异(户<O.05),PC组与MG组比较无显著性差异(尸>0.05)。见表9。 表9.九味至宝胶囊对去势雄性大鼠阴茎勃起潜伏期的影响(s,x±曲Tab9.Effectofjiuweizhibaocapsuleonlatent period of penile erection of big emasculatedmalemice做Y埘组别CG阴茎勃起潜伏期14.06士3.29 24.13士4.46 21.13-4-3.48 1 9.64-4-3.63‘ 19.16-a:5.90‘ 17.39-4:3.22‘坤MGPC LDMDliDVSMG,‘P<0.05,”P<0.Ol:VS PC,#P<o.053.2.2对去势雄性大鼠生殖器官脏器指数的影响结果表明:(1)各剂量组的包皮腺指数与MG组比较均有显著性差异(尸<0.05), 与PC组比较均有显著性差异(尸<O.05); (2)LD组的精囊腺指数与MG组比较有显著性差异(尸<0.05),MD、HD组的精囊腺指数与MG组比较均有极显著性差异(尸<0.01), MD、HD组的精囊腺指数与PC组比较均有显著性差异(P<O.05); (3)LD、MD组的提肛肌指数与MG组比较有显著性差异(尸<0.05),I-ID组的提肛肌指数与MG组比较有极显著性差异(尸<0.01),与PC19 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳.补肾壮阳作用及其机制的研究组比较有显著性差异(P<0.05),PC组精囊腺、提肛肌指数与MG组比较有显著性差异(尸<0.05)。见表10。表1 0.九昧至宝胶囊对去势雄性大鼠包皮腺、精囊腺和提肛肌指数的影响(mg?1009"1,x±曲Tabl0.Effectofjiuweizhibaocapsuleonpreputial gland index and seminal vesicle index and levator aniindex of emasculated malemice(mg。1009-1,x埘精囊腺指数1 12.71士32.3 5.89士1.46组别CG包皮腺指数46.35士8.69 25.71士6.58 29.68士5.45 38.5 1士6.22叫 41.86士11.5叫提肛肌指数65.73+13.5 34.68-*9-35MGPC LD7.1 1士1.85’41.66士8.97。 7.75士1.59’47.28土9.99’ 10.36士2.82”撑47.45士14.1。 9.26±2。01’叫 50。29"士12.1’吖MDHDVS37.4钍13.7哗MG,’P<0.05,一P<0.0l:VS PC,4P如.053。2.3对雄性大鼠交配能力的影响 结果表明:(1)各剂量组的捕捉潜伏期与CG组比较均有显著性差异(尸<O.05),LD 组的射精潜伏期、捕捉次数、射精次数与CG组比较均有显著性差异(尸<0.05),HD剂量组的射精次数与CG组比较有显著性差异(P<O.05);(2)PC组的捕捉潜伏期、射精潜伏期、捕捉次数、射精次数与CG组比较有显著性差异(尸<0.05);(3)各剂量组的捕捉潜伏期、射精潜伏期、捕捉次数、射精次数与PC组比 较均无显著性差异(尸>O.05)。见表11。表1 1.九昧至宝胶囊对雄性大鼠交配能力的影响(;±DTabll.Effectofjiuweizhibao 捕捉 次数capsuleoncapability of copulation of malemice(]I::埘射精 次数 百分 率60组 别CG PC捕捉潜 伏期(s)297.144-29.68百分 率70 90 90 80 80射精潜 伏期(s)299.33士34.757.86:眨.416.17+2.14237.00士28.89‘8.78士1.09’ 221.44+23。97‘ 272.38士31.07’ 9.564-1.51‘ 8.13士1.25262.13-4-24.76。8.00士1.5 1’80 256.00圭27.65’8.63士1.19’80 280.29士30.61 291.86士22.64 6.86士1.21 7.29士1.60’ 70 70LDMDHI)VS279.00士47.46’8.41士1.41CG。IPQ.053.2.4对雄性大鼠阴茎勃起功能的影响 结果表明:各剂量组的阴茎勃起潜伏期与CG组比较均有显著性差异(尸<0.05),LD、 HD组与PC组比较有显著性差异(P<0.05);PC组的阴茎勃起潜伏期与CG组比较有显著性 差异(尸<O.05)。见表12。20 吉林农业大学硕士学位论文九味至宝胶囊抗疲劳、补肾壮阳作用及其机制的研究表12.

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