大家帮我分析下她说的是不是真的啊。_百度知道
大家帮我分析下她说的是不是真的啊。
她没有躲着我？我们现在高中，问了所有一直困惑我的问题，感激不尽，而且在微笑。说我之前想太多了，我在班上唱了首歌，她没有不高兴，一直在笑，我们一直是朋友啊。晚上，她说，而且我感觉她一直在躲我。第二天晚上，把纸条给她的时候！？求大家回答我，她也鼓掌了，我打算高考完了和她表白。前几天她早就知道我喜欢她！她真的不讨厌我吗！她的话可以相信吗，当我找到她，大家都跟我鼓掌，两个人考上同一所大学困难吗！。这是真的吗，我写了纸条
我唱的是when i was your man. 大家应该都看出这首歌的歌名意思了吧。她也没有不高兴。
提问者采纳
想这么多干嘛，那就现在就确定关系，如果非得考完表白或者考到同一所大学？哪怕被拒绝只要还喜欢她你就百折不挠追，想多了就娘了，等你学业有成，有了自己的事业才是硬道理小弟弟好好读书吧，别误了你自己，如果有缘分总有一天会发芽开花结果的，过来你就慢慢懂了，你要是觉得有信心那就勇敢表白啊，不强求，年轻啊，感情这东西随缘的，总是会想这些，把这份喜爱先种到土里去
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发表于 11/2/24 16:51
我家宝宝四个月大，之前一直在我父母家养着，我父母不喜欢狗，除了一天两顿饭之外都不跟它玩，也从来没让它出过院子。我上周给它抱过来到我这里，我发现它的兴奋度低，具体表现为不喜欢玩，带出去遛，走两步就趴下不动，牵犬带拖着都不起来，就跟地上趴着，任凭我拖，根本不跑，走路也是懒洋洋的，不好好走路，屁股一扭一扭的，跟七老八十的一样，而且经常打瞌睡，我一开始怀疑是CHD，但是用手揉捏它胯时候它也不疼，而且当我用逗它时它偶尔回跑，而且跑的很正常，屁股也不扭了，所以基本排除了CHD，转而怀疑是性格原因，是不是从小+ X8 @" Y' f# l5 w! K&&Z! e8 w( Y: k2 F
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再有一点是依恋性几乎为零，具体表现为带它出去溜达，我趁它不注意的时候跑开藏起来，它的反应很让我失望------察觉到主人离开之后，缓慢的抬头张望看看，然后懒洋洋的趴下，一动不动。然后当我忽然出现的时候，它也不跑过来，我要喊起码三嗓子“来”，它才极不情愿的走过来（期间还会出现在半路又躺下的情况）。我从外面回家的时候它也不过来欢迎，而是躺在远处直愣愣的瞅着我。
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另外一个问题是胆子小，看见朝它狂吠的小熊，吓的连连后退，一顿哀嚎。看见人也害怕。5 A6 o4 r6 j6 G6 r
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现在我给它抱过来正好一周了，每天喂食，逗他玩，早中晚遛狗，每次遛完回来，它就往窝里一趴，自己撕咬一会儿玩具，然后睡觉。可以说它每天除了早中晚的遛狗，其余时间都在睡觉。
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我不知道是不是生病了，因为它便便很正常，食欲也很旺盛，毛色很亮，体重正常，除了后肢略显无力（平时不喜欢走和跑，两步就趴下。但是今天带它去公园，我逗引它跑，观察发现它跑起来很给力）
我很喜欢这个，可是没想到抱过来发现是这个样子。之前在父母家里养的时候，我每个月回家一次，会跟它玩玩。当时家里还有另外两条成年（不是德牧），不跟它玩儿。另外还有一只它的兄弟（一窝崽子）它和那个小狗玩，总欺负那个小德牧，比如追着扑咬什么的。不过那条小德牧一被咬就哀嚎，就跑。$ c- B" _( r+ T+ P( I
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是不是环境原因？还是生病了？还是天生的性格，血统原因？' H' j. y9 u) m$ l- L. s1 m
朋友们帮我分析一下吧！谢谢了！
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中级狗民, 积分 815, 距离下一级还需 685 积分
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发表于 11/2/24 16:54
呃&&跟我们家孩子正相反……
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初级狗民, 积分 111, 距离下一级还需 89 积分
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发表于 11/2/24 17:15
羡慕你家孩子啊。我家这样的我都愁，怎么训啊！
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发表于 11/2/24 17:20
听话的狗狗还训啥，大点可能就好了。我家这个淘气都出圈了。家里的拖鞋都烂了。你家的德牧是不是小姑娘啊。
最后登录14/2/25积分12057 点狗民币18 个注册时间09/7/23积分12057帖子主题精华4UID289512
青铜元老, 积分 12057, 距离下一级还需 7943 积分
发表于 11/2/24 21:24
性格问题，胆子小就要多带出去适应一下环境，毕竟还小。培养空间还是非常大的。如果老是关家里，基本来说，这犬就废了。主人要多和它玩，多关心，爱护它，时间久了，和主人就亲了。
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金牌狗民, 积分 3150, 距离下一级还需 1850 积分
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发表于 11/2/24 21:44
狗和人一样都有性格 你的狗长期受到人的冷落 性格孤僻了
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发表于 11/2/24 22:26
LZ，告诉你，我家B刚到家是45天，跟你家的情况有点类似，现在在我家快2个月了，跟疯子一样，打都不行（说打有点夸张了，我就是说个难听的）咱们这种情况45天和和4个月是一样的，都是不熟悉，陌生环境，我家狗刚到我家连球都不玩，现在对球的集中力很不错，我很满意，所以你不要急，亲和是需要一段时间的，我家狗现在出门紧跟我，看不见我就疯狂的找我，开始我走它身边 它还害怕的尿尿呢
虚B中的战斗机！
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金牌狗民, 积分 4623, 距离下一级还需 377 积分
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发表于 11/2/24 22:41
这个跟之前没人带他遛有一定关系，我朋友的狗就是四个月才拿回来，之前的情况跟你的差不多，那个狗就是，不兴奋，胆子小。但是训练不会耽误什么的，他那个只是怎么训，都不喜欢衔东西，衔一直训不会，其他的也都正常训了，不用太担心。
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狗民元老, 积分 9535, 距离下一级还需 465 积分
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发表于 11/2/25 08:48
多陪陪她吧，可能是很孤单，
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发表于 11/2/25 08:52
谢谢朋友们的帮忙分析，今天早上带我家狗狗去公园玩，狗狗比昨天表现强很多，敢四处张望了，也敢接触温顺点的狗狗了，也不怕人了，只是还害怕狂吠的狗，和马路上汽车。表现不错。感觉真是你们分析的那样，是小时候没接触外界环境的原因。看来我得多带出去溜溜了。
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发表于 11/2/25 08:58
对了顺便问一下，四个月的小狗狗，每天应该保证多少运动量？一天溜几遍？是不是不能带着疯跑？
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狗民元老, 积分 9136, 距离下一级还需 864 积分
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发表于 11/2/25 09:16
多走走多玩玩会好的
天生荔枝的3N妈
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青铜元老, 积分 13774, 距离下一级还需 6226 积分
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发表于 11/2/25 21:35
这个主人很上心' t1 x1 w5 p1 b4 {: x3 A* a# w1 |
表述能力也很强6 E4 u+ V3 J5 [: k
有一定的分析能力
其实原因你自己已经概括的比较全面了
就针对成因 做出改善即可
最后登录15/7/20积分33106 点狗民币9556 个注册时间08/1/13积分33106帖子主题精华24UID78166
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发表于 11/2/25 21:57
犬不教主之地。( S4 r* n' P: x2 p0 g6 f% s2 [' `9 O
而犬现在成这样子更是主之过。2 @# C/ F( A3 {! N4 Q( `
人和狗没有亲和力。人不和狗玩。狗就吃能吃到。那里不舒服了也没有人管他。在你的狗眼中。他的主人只是给他吃的。他就是吃完了就睡。自已乱玩或是不玩。这样的狗心里都不是那种健康的心里。身体也不可能多壮。
不和人玩不和人接触亲和力就不用提了。
德牧学习交流：犬国王
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发表于 11/2/26 00:30
原帖由 bester 于
22:26 发表 3 Q- m$ b, X' a, A7 o
LZ，告诉你，我家B刚到家是45天，跟你家的情况有点类似，现在在我家快2个月了，跟疯子一样，打都不行（说打有点夸张了，我就是说个难听的）咱们这种情况45天和和4个月是一样的，都是不熟悉，陌生环境，我家狗刚到我家 ... 6 q$ c# A7 ?/ w0 w
为什么尿尿 ？ 是害怕吗？
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中级狗民, 积分 429, 距离下一级还需 1071 积分
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发表于 11/2/26 03:24
我家的狗狗也跟你家状况差不多,叫n句都不会搭理我,带出去又不走,只有吃东西的时候,就马上跑出来守在你面前,
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初级狗民, 积分 111, 距离下一级还需 89 积分
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发表于 11/2/26 10:30
谢谢帮忙分析的朋友，经过九天的努力，我家狗狗现在开始闹腾了，遛狗时候开始往前串，见了大狗不害怕，玩的欲望很强烈
我总结一下我的经验，和大家分享。因为百度上看到许多幼犬都有我家小黑这种情况。大家可以借鉴一下。
【病症】：
抑郁症，兴奋度低、依恋性弱，帖子开头所述。
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【病因】：+ Q/ Z&&c! L: a7 ]+ t
父母犬血统不纯，有遗传疾病或者幼犬是近亲繁殖出来的，近亲繁殖出的幼犬大部分都有神经症和抑郁症。
感冒，肠炎或者肚子里有虫子，还有chd关节问题都会造成狗狗喜欢趴着，不爱动，蔫头耷脑对人爱答不理。& _# z" m4 f- u: y
狗跟人一样都有不同的性格，有的狗天性活泼胆大，有的天性慵懒、胆小。- o&&B+ S. {3 T7 Q* b7 M0 [
狗狗小时候（五个月之前）没有得到饲主足够的关爱，笼养或圈养、从未出过家门、从未进行散放，没有玩伴，没有接触过多少同类或人类、外部环境，或者接触过凶恶的同类和凶恶的人类、以及会让狗狗感到恐惧的外部环境。. Y, i% ~$ S+ Y7 j* t* L
+ X+ c2 D3 p( H4 n
0 y/ z6 A; H6 F& \2 |/ W( o& Y5 l& d9 P
如果是因为血统原因，那估计谁都没办法，除了画圈诅咒奸商或不负责任的犬舍。
6 k3 z/ F7 \1 |) T. k
如果是因为生病造成的，那么及早检查和治疗即可。如果你的狗狗小时候打过疫苗吃过驱虫药（确定不是假药），而且毛色亮丽（先梳掉绒毛再看）、揉捏关节狗狗不疼，鼻头湿润没有眼角分泌物和呕吐拉稀的情况，那么就可以排除生病的原因了。
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如果狗狗抑郁，兴奋度低，依恋性弱，胆小什么的，是“性格”和“环境”造成的，那就没问题了，你先别着急，揣着一个爱心和耐心，多陪伴你的小狗，多带它出去玩，多接触别的狗狗，慢慢的它就会好了，而且一定会好。) P. ^5 [* g# ]
玩的地方最好是开阔的公园，草坪，没有讨厌狗和对狗大喊大叫的SB（见到这样的SB一定要绕道走，为了你狗狗的心理健康），风景秀丽的地方，有利于逗引狗狗玩耍和培养狗狗自信心。然后再循序渐进的带狗狗去人多的市区练胆。& O: ]+ s# s4 X! R, g
. H& N% d. r) @9 ]4 G! \1 {
让你的狗狗跟其他友善的狗狗接触，首先，鼓励的你狗狗去玩耍，如果你的狗狗害怕，往后退甚至哀嚎，那么切记不要拖拉牵犬带，更不可气急败坏的辱骂你的狗狗，一定要温柔的唤狗狗前来，你半蹲，把狗狗夹在你两腿中间，左手温柔的揽住狗狗前胸，右手抚摸狗狗体侧，然后一边轻声鼓励狗狗，一边用左手轻轻往后拉狗狗前胸的同时，你用屁股把狗狗的屁股往下压，狗狗就会坐下（同时发出“坐”口令顺便训练狗狗坐）。这种状态下狗狗会感受到你的爱护、并且充满安全感和勇气。然后你逗引对方狗狗过来，鼓励你的狗狗和它“闻闻”。这样子多锻炼几次，你的狗狗就不会对其他狗狗感到恐惧了。; N& w( V+ }* v&&[$ C
切记：鼓励和安抚狗狗不要用表扬狗狗的 “好” 的口令，而要用 “没事儿，不害怕”等。否则你的狗狗会搞不清楚 “好” 的意义，日后的训练也无从谈起。
锻炼你的狗狗不害怕人类，不害怕外部环境也是同样方法。$ I/ N) m& y1 l0 o3 D6 E
一般来说遛狗时狗狗经常懒散的趴在地上不动，就是因为狗狗害怕外部环境和同类、人类造成的，狗狗不害怕了，会玩儿了，自然而然就喜欢跑了（找伴儿玩去啊）& ~. `7 K+ V& @: x
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如果你狗狗的先天性格很固执（比如慵懒胆小，不恋主），或者抑郁症很严重，上面的方法可能就不管用了。我有个办法有点变态，不过挺好用，但也不排除反作用的可能性，没经验的犬主和小型犬犬主不要乱试验：4 }' k- q! A# G, y& H0 d: o
俩字儿：连打带骂。( Q( y, y3 V8 h/ K8 @- w
2 `; j3 r6 _, c% H6 U0 K&&_
首先切记要在家里打，不要在外面打（因为狗狗也有自尊心），挑狗狗犯错的时候（不要毫无缘由），比如狗狗咬拖鞋，发现之后你（黑脸登场）就拿杂志卷成卷，发出“不行”口令同时开揍，转圈追着它揍（一定要给它揍的转圈跑），然后逮住，摁着脖子拖到拖鞋处，指着拖鞋用棒子敲地板骂它还敢不敢了，然后再转圈揍一圈儿。
这时候让你媳妇登场扮“白脸”，阻止你打狗狗，然后紧紧护住狗狗，安抚他的同时对你骂骂唧唧（狗狗会像地鼠一样往你媳妇怀里钻）。/ h9 P8 |# ~7 }) ]' t6 q' l
然后你躲起来，你媳妇离开狗狗，你再出来打它，你媳妇再登场。
我家小黑我前天这么揍了一次，之前它懒的不行，遛狗时候肯定趴着不动，揍过之后就开始调皮了，给他脾气打出来了，之前从未叫过，揍他时它跟我吼了一嗓子。此后下楼溜达就疯跑（我拿着棒子在后面追）。一般来说揍完一次两次狗狗的性格就会有改善，开始活泼好动起来，因为德牧血统里有狼的血液，有个斗性在里面，越打越皮，咱要做的，就是给它揍“醒”，给狼性和脾气揍出来。: P2 }6 B1 @7 {# G&&q3 p
一定要有白脸。没有白脸就不要这么干了。否则狗狗心理会崩塌，除此之外“白脸”的作用是培养狗狗恋主。还有揍完狗狗之后你不要立即搭理它，要么等第二天，要么等它表现好的时候（比如唤来成功）再稀罕它。否则你的狗狗会认为挨揍是因为你犯神经病而不是它犯错导致。
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肯定有朋友回想，揍完了之后狗不跟我亲了怎么办？放心，不会。只要你不是神经病那种毫无缘由的揍它，而且你赏罚分明，狗狗越揍越亲（只亲不揍的狗，抓糊主人）* e8 Q! C! V0 @" M* |3 }5 l* O
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还有朋友会想，要是狗狗发飙了扑我咬我怎么办？德牧那血盆大嘴.........# I, M( Q9 V5 E# ?( w8 Y2 _2 i
放心，狗任何情况下都不会咬主人，顶多是撕皮（咬衣服）。揍它的时候狗狗如果敢跟你打架，敢反抗你，低吼一声，那你这狗狗真不错，是个有勇气的家伙。日后只要你爱护它，它会格外的亲你。就跟人不打不相识一样，打过架的才能成为真朋友。
还有朋友会问，揍反性了，以后不听话了、攻击性强了怎么办。是，的确，狗狗骂多了不听话，揍多了会反性。不过就算狗狗揍反性了，变的太皮了，也比太蔫儿了强不是吗？况且训练中后天压制要比后天培养容易的多。
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最后再说一下这个方法，没辙了才用的。没经验的犬主切记不要乱用，用的话，一定要掌握好“度”。
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发表于 11/2/26 10:58
回复 15# 的帖子
确实是吓的。另外泌尿系统尚未发育完全，憋不住也是一个原因
最后登录15/3/7积分5952 点狗民币5976 个注册时间11/1/18积分5952帖子主题精华0UID556517
狗民元老, 积分 5952, 距离下一级还需 4048 积分
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发表于 11/4/21 16:12
跟我家的相似 他也是肠胃不好吧？
最后登录15/3/7积分5952 点狗民币5976 个注册时间11/1/18积分5952帖子主题精华0UID556517
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发表于 11/4/21 16:15
看来你是想抛砖引玉
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我的女友是我小时候的玩伴，一起长大的，后来她搬家了，消失了近十年，高中时她通过QQ找到了我，我现在大学了，她提出我们在一起，她的成绩不是很好，在家里一个大学上师范，我在外地上学，但离得很近，我们分居两地，但我觉得挺开心的，一直很恩爱，可是才几个星期，上次聊天是周六，我本准备回家的，可因为学校的比赛留了下来，当晚还和她聊天，和她聊到比赛，气氛很好，就是当晚给她发晚安时她没回，而且到现在，打电话，短信，扣扣她都不回了，只能看到她的说说，她先是用英文写了“自己是白痴，他背叛了她”，又跟我说对不起，到底怎么了，我怎么去追回她啊，我真的很喜欢她！都说两个天蝎撑不过两周，我不相信这个，但能通过这个分析下吗？
星座先不谈 这事有点不清晰 你现在要做的就是联系到她 是不是确定分手了呢
LZ&恕我直言&她有另外喜欢的人
楼主被人涮啦!哈哈哈哈哈!
哎，楼主有点志气吧
孩子醒醒吧，别再傻下去了。
什么样的女孩喜欢这样个性的男孩？
也许你被她耍了。
你可以到洛哈斯心理咨询中心咨询下那里的老师，都是很厉害的，我上次因为一些事情处理不好去的，他们的服务态度非常好！
找她问清楚喔，也许中间有什么误会或是她遭遇了什么又不方便和你讲或是不忍心伤害你才这样把你逼走的，你需要知道她的处境和她的所想
你确定他喜欢你？你们在一起？
跟我很像吗 放弃吧 刷你的 跟你说对 那么说明至少他喜欢过你 但是她先在喜欢别人了
放弃吧 没戏了
再观察一段时间吧
首先，看看她是否有其他喜欢的人了。感情不是强求的，也许她不喜欢你了。不过你给的信息太少，我无法分析。&&
我认为(你说的2星期，可能我理解错了），她有过喜欢的男生；她被甩了。那男生有找她来了，她觉得对不起你。&&
重点是：自己是白痴，他背叛了她 和 对不起你 。你给的信息太少，而且没说清。
我目前只能给你这句话：如果你喜欢她，真的在乎她；就抓住每一个机会，不要以后自己后悔就行。
不知道你注意到这点没有，你一只跟她有联系。你有没有说我喜欢你；做我女朋友吧！&&&
女的其实对称号很“重视”，有时就这么一句话，就有不同的结果。她很有可能把你的多年联系当成童年的玩伴的回忆。我无法判断，信息太少了
回复14楼：是她提出在一起的，因为在两地，而且因为我们很久没联系，所以我一开始很委婉拒绝了。但她一直说我陪她度过了她人生最美好的十年，她一直很想我，我才慢慢被打动的。而现在，我真的投入进去了。他一直称呼我老公，我喊她宝贝和my&angel，我问她发生什么时，她的说说还有一句话：“不想再难过&&&重新来过”那句英语原文是&＊＊&is&an&idiot&he&betrays&her&，这些有用吗？已经很感谢你了！
什么傻不傻的，做事就得认真负责，投入了就不会轻易放弃，动不动就放弃怎么行，而且我向他人求助，这是强者的行为。
你们应该把话说清楚吧。。。 也许她真有脚踏两只船的嫌疑。。。
楼主,她有喜欢的人，就是她前男友，根据她的QQ，得出结论1。她本想和你一起，她前男友来找她，她又和前男友和好了2。她只是用你激一下她原来的男朋友，可能她前男友冷落她，或者另结新欢
回复：18楼2。她只是用你激一下她原来的男朋友，可能她前男友冷落她，或者另结新欢这是错的。&&
用同年的玩伴刺激他？这可能不搭边啊！
你可以到洛哈斯心理咨询中心咨询下那里的老师，都是很厉害的，我上次因为一些事情处理不好去的，他们的服务态度非常好！
无聊，楼主痛快点，断了吧！
不好说啊。&&& 至于英语，我没及格过。我认为她可能被别人甩了，现在又被会追。&&& 现在最大的问题是你的女朋友好像是被人要强走了，当她伤心的时候，可能最先想起你。&&& 你先怎么跟她说吧：你能给我个机会好吗？我喜欢你给我机会好不好。&&& 注意了，这是你先说的话。这是你以后几个选择方法：（1）你也不会话了，等再次沉默时。你告诉她，我等你（这个方法的看她对你的喜欢程度，不过如果她和那人感情好那？那就会被强走了）（2）跟她说话，不过要注意频率。不要字多，你要关注她那面的天气预报；比如说天冷多穿衣服。让她感觉你的存在。（3）你直接去她那，看看是为什么。不过小心了，没准你的对手在那里&& 最后，你的好好想想你是否真喜欢她。她能做的妻子吗?如果能，把天捅个窟窿也给她拿下。不是，就尽量的做。&& 如果还有什么事，信息找我就行。祝你幸福哦，别是玩玩就算了，她可喜欢你10年啊。
回复22楼：John你好幸福，真的很谢谢你，我为没犯过的错道过歉，挽留过，也说过我会等她，但我想已经弄清原委了，只是他回来了，没想到我和她的关系如此脆弱，我能做的只有发个短信祝福她了。也谢谢大家的帮忙！
回复：24楼我是昨天分的手。我们也是异地恋 问题出在2个月前当我跑去她那里找她时她不想见过 只时叫我离开 她不想我逼她 我也尊重她 体谅她 我不想在折磨她我选择了离开 如果真的爱对方就放手让她过自己喜欢的生活而你也会找到属于自己的LIFE。 虽然你很痛 但你是否想过她的感受我们男人不能自私。 和我一样 努力过了 争取过了 就不要再后悔前面的人都在等我们 慢慢忘了她吧
女生定期犯病……你要耐心耐心耐心。
女人的爱最不值钱！
回复：24楼不用谢，不过如果就这样；一切真的就要结束了。
你得明白：（1）你在她心目中你有特殊的地位，她有你10年的回忆。而且在她受伤时他想到的是你，就像一个小孩被欺负了，哭着找妈妈。不得说，你很成功。（2）如果你想着她有一天会回来再找你，这几乎是不可能的。你有没有从她的角度想过，假如她只是普通想在找个男朋友；用找你吗？都10年了。上面说过的在他心目中的地位，从她说过：“自己是白痴，他背叛了她/对不起”；她是不会认为自己有脸在找你回来的。（3）你说过“我为没犯过的错道过歉，挽留过，也说过我会等她，但我想已经弄清原委了，只是他回来了，没想到我和她的关系如此脆弱”。&&&
你是认输了吗？不如说是自暴自弃了吧。男人有时应该认输，但是不是这样的。无论你以后是那个女朋友离开的，你要证明，证明她离开你是错的！你要变得更强、更有力、更加有实力。你要让她后悔，后悔她的选择。不是现在你这个样子！就说一句祝福她就行了！你连你的对手看都没看就认输？要看看你输哪了！这样就真的没机会了！&&&
你要把你天天的强盛写在你QQ空间里，让她看到。你比以前更好，让她懊悔。她不会主动再来找你，是你去找她！她说她你陪她度过了她人生最美好的十年。这就是你的本事吗？要让她感到你的存在！
好复杂。听起来像是一个男生和一个女生相恋，女生背着男生和另一个人搞暧昧，后来女生背叛了你，那个男的背叛了他的女朋友。复杂，复杂。不喜欢复杂的。不喜欢就散了吧。不是你的追也追不回来。向前看，总会有适合你的。
回复28楼：
嗯，我会振作的，谢谢！
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请大家帮忙分析下我的SDS-PAGE蛋白检测胶啊
我是按照TCA/丙酮沉淀方法，提取总蛋白用来跑双向的，跑双向之前，先用SDS-PAGE,检测了下蛋白质量，但是看到这张图，我不知道该怎么办，请大家帮忙分析下啊，图上的右边3个，为蛋白样品，右边第4为Marker泳道
为什么我的蛋白样品，就中间一块有呢，高分子量和低分子量都是空白呢？？还有就是带很模糊，这是降解的原因吗？？请高手给指点下 啊。先谢谢了啊
总蛋白的检测胶图
为什么我的蛋白样品，就中间一块有呢，高分子量和低分子量都是空白呢？？还有就是带很模糊，这是降解的原因吗？？请高手给指点下 啊。先谢谢了啊 这电泳是看到的最烂的 我觉得你你的胶没配好，mark一般跑的比较好的，你这mark的图谱都这么差，我只能推测是胶的问题了。你的ap是新配的吗？如果是，你跑胶时候的电压或者电流是多大呢？还有，mark点样时你注意的浓度了没？
我也做这个时间不是很长，但是我的一向SDS-PAGE效果比你的好些，楼主注意下操作吧。 先把marker跑好，确定排除电泳本身问题，再讨论样品条带 : Originally posted by fisheart at
先把marker跑好，确定排除电泳本身问题，再讨论样品条带 谢谢啊，其实我只是检测下，全蛋白有无的问题，没有想到跑成这样了，问题是全蛋白不应该只分布在中间一块啊，这是我问得核心啊（胶不好，可能是我丙烯酰胺储液放的时间太长了吧），还有就是，我的胶凝固以后，为什么一边会收缩的厉害，一边好着呢？？有人说因为没有混匀，但是以前为什么没事呢？？？？ 楼主，你的胶一边收缩，一边好着，很可能是两块玻璃板没有夹好，有点从下面漏液，还有胶一点要混匀，否则电泳图跑出来会拖尾，模糊。 我一开始看还以为拍照片的手抖了。。。。 胶没配好吧。丙烯酰胺储液放置时间影响不大，3楼说的ap应该指的是过硫酸铵吧，不是指丙烯酰胺，总之可能还是胶没有凝好。不均匀。一边收缩的厉害那就是漏胶了。这种情况就不能在用这边的孔了。玻璃板夹好后，还是要验一下漏不漏的。 : Originally posted by kristine2011 at
胶没配好吧。丙烯酰胺储液放置时间影响不大，3楼说的ap应该指的是过硫酸铵吧，不是指丙烯酰胺，总之可能还是胶没有凝好。不均匀。一边收缩的厉害那就是漏胶了。这种情况就不能在用这边的孔了。玻璃板夹好后，还是 ... 谢谢楼上各位，我胶重新跑了一遍，胶确实跑的不好了，但是其实我想知道的是，为什么我的全蛋白不是充满整个泳道呢？？仅仅就2-3条带呢？？是没有提出来？？还是中间降解？？还是跑出去了？？？整个是核心啊，以后没有人给帮忙分析下啊 ，
最右边是Marker，左二为全蛋白样品，为什么就3条带呢？ 大家分析的挺有道理的，胶居然还能跑成这样，长见识了 这个胶...长见识了...应该不是电泳的问题，是你提取蛋白的问题，你可以用超声破碎再试试 提的是什么样品的全蛋白阿？ : Originally posted by violetice at
提的是什么样品的全蛋白阿？ 你好啊 ，是牛肉总蛋白啊 我也出现过你这样的问题，我觉得一方面是蛋白开始有降解，还有就是胶的配置过程，丙烯酰胺最多放一个月就不能再用了，这是我的一些经验。 : Originally posted by 我要长大 at
我也出现过你这样的问题，我觉得一方面是蛋白开始有降解，还有就是胶的配置过程，丙烯酰胺最多放一个月就不能再用了，这是我的一些经验。 后来你是怎么解决的啊？？是换丙烯酰胺了，还是重新提的蛋白啊 ？？请指教下啊 谢谢楼上的啊，我蛋白重新提了次，是这样的条带，比以前进步了点，但是没有高分子量的，这是怎么回事啊 。是降解吗》》还是高分子量的比较难溶解啊，还是肉样本身的问题啊 ？？中间是Marker，两边是样品，上样样品10，Marker5
中间是Marker，两边是样品，上样样品10，Marker5 -------------广告内容-----------------
该虫多次发布广告，为了避免版主刷管理记录的嫌疑，不再每个帖子单独扣分，而是分几次重罚。请自重，勿扰乱论坛的正常交流！ 随时更新的哦实验进展啊，我昨天又提了次啊，浓度是3.8mg/ml，上样10ul,NI 你看看效果，给分析下啊，没有加硫脲，这次浓度提高是因为，裂解前，液氮研磨了下，且加了蛋白酶抑制剂（不知道是不是抑制降解的原因）， 不知道为啥高分子量蛋白依然依然很少，请大家分析下啊
液氮研磨溶解的带型（加蛋白酶抑制剂）
剪碎溶解的带型（仅加PMSF) LZ可以把裂解液直接拿来跑电泳，看看原来里面蛋白的情况，PMSF个人觉得问题不大，之前我做SDS-PAGE的时候，会跑一个全菌体，就是裂解之后不提取，直接电泳